Профилактика абсцедирования воспалительных инфильтратов мягких тканей в амбулаторной хирургии | #05/07

Как показывают статистические данные, из всех первичных обращений к хирургу поликлиники до 70 % приходится на гнойно-воспалительные заболевания мягких тканей. Чаще всего по такому поводу приходят рабочие, в основном имеющие низкую квалификацию труда и неблагоприятные условия труда, или работники умственного труда, причем высококвалифицированные, которым пришлось что-нибудь сделать собственными руками. Характерной особенностью при обращении по поводу фурункула, абсцесса, гидраденита, панариция и т. п. является классическая, ярко выраженная клинически, «студенческая» картина острого гнойного воспаления мягких тканей вследствие запущенности процесса, долгого «выжидания», разнообразного, но безуспешного самолечения, уверенности в том, что «само пройдет». Как правило, такие пациенты не нуждаются в госпитализации, и тактика их лечения не вызывает каких-либо вопросов у амбулаторных хирургов.

В большинстве случаев для таких пациентов вполне достаточно проведения малого оперативного вмешательства — вскрытия гнойника и санации его полости в условиях перевязочной под местной анестезией.

Анализ первичных посещений пациентов хирургического кабинета поликлиники выявляет факт преобладания обращений больных с неосложненными формами гнойно-воспалительных заболеваний на поздних сроках. Основная часть больных обращалась к хирургу только на 4–5-е сутки после появления признаков местного воспаления. Сбор анамнеза и беседа с пациентом показывают, что основными причинами позднего визита больных являются неосведомленность о заболевании и его возможных осложнениях и последствиях, попытки самолечения гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей в домашних условиях (применение мазей, компрессов, прикладывания капустного листа и т. п.), нежелание рабочих обращаться за листком временной нетрудоспособности, а также несерьезное отношение к своему заболеванию. Решению проблемы может способствовать комплекс организационных мероприятий, включающий в себя активную санитарно-просветительскую работу, своевременное выявление больных с гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей, в частности профилактический осмотр на предприятиях рук рабочих на наличие микротравм и гнойных осложнений, а также повышение квалификации терапевтов поликлинического звена в вопросах диагностики и профилактики этих заболеваний.

Однако у ряда пациентов после адекватно проведенного местного лечения (вскрытия гнойно-воспалительного очага, эвакуации гнойно-некротических масс, санации и в конечном итоге полного заживления полости гнойника) возникают часто рецидивирующие фурункулы других локализаций, т. е. речь идет о фурункулезе. Хронический рецидивирующий фурункулез характеризуется вялотекущим течением с периодическими обострениями, наличием множественных очагов различной локализации, резистентностью к проводимой антибактериальной терапии. Высокий уровень заболеваемости пиодермией и фурункулезом обусловлен в первую очередь широким распространением в природе стафилококков и стрептококков, являющихся этиологическими агентами, вызывающими эти заболевания. Наиболее частый причинный агент — стафилококки (золотистый и в последнее время эпидермальный).

В патогенезе фурункулеза, помимо вирулентности и патогенности различных штаммов кокков, имеет большое значение наличие предрасполагающих сопутствующих заболеваний (в первую очередь сахарного диабета или нарушения толерантности к глюкозе, заболеваний ЖКТ и печени, астении на фоне перенесенных инфекций или операций, длительного лечения глюкокортикостероидными препаратами).

В ряде работ (S. Laube) отмечено наличие аллергического компонента при фурункулезе у лиц старшего возраста, сопровождающегося повышением общего IgE.

По результатам работы, выполненной в НИИ иммунологии, фурункулез является одним из клинических проявлений так называемой спонтанной иммунологической недостаточности. В изучении возникновения и развития хронического фурункулеза, наряду с особенностями возбудителя, его патогенными, вирулентными и инвазивными свойствами, большое внимание уделяется нарушению нормального функционирования и взаимодействию различных звеньев иммунной системы. Наиболее диагностически значимыми являются изменения фагоцитарного и гуморального иммунитета, а также их сочетанная патология.

В настоящее время хронический рецидивирующий фурункулез расценивается как частный случай вторичных иммунодефицитных состояний, а выявляемые иммунологические сдвиги у больных фурункулезом способствуют широкому внедрению в амбулаторную практику неспецифической иммунокоррекции. Среди иммунокорригирующих препаратов традиционно используются Тактивин, Тималин, Иммунофан. В наиболее тяжелой ситуации возможна заместительная терапия иммуноглобулинами для внутривенного введения. Однако отнести проблему лечения и профилактики рецидивирующего фурункулеза к полной компетенции иммунологов не удается, так как даже после полноценного обследования иммунного статуса пациента не всегда возможно выявить какие-либо грубые отклонения от нормальных показателей. В частности, в классификации пациентов с клинико-лабораторными проявлениями иммунодефицита одна из трех групп обозначена как «лица, имеющие только клинические признаки нарушения иммунитета без изменения параметров иммунного статуса».

Часто больные с рецидивирующими фурункулами становятся постоянными клиентами хирургических отделений, подвергаясь многочисленным оперативным вмешательствам, дающим кратковременный клинический эффект. Несомненно, такие пациенты должны быть всесторонне обследованы и при необходимости направлены к терапевту, гастроэнтерологу, ЛОР-специалисту, тем более что, по данным литературы, в 80 % случаев у них выявляются очаги хронической инфекции, локализующиеся в ЖКТ и ЛОР-органах.

Таким образом, в настоящее время рецидивирующий фурункулез рассматривается не как локальное кожное воспаление, а как общесоматическое заболевание, возникающее в результате воздействия различных провоцирующих факторов, которые при наличии предрасполагающих иммунологических дефектов приводят к дебюту и хронизации пиодермии.

В зависимости от распространенности и выраженности воспалительного процесса хронический рецидивирующий фурункулез классифицируется по степени тяжести (Л. Н. Савицкая, 1987).

Легкая степень тяжести — одиночные фурункулы, сопровождающиеся умеренной воспалительной реакцией, с хорошо пальпируемыми регионарными лимфатическими узлами, с рецидивами 1–2 раза в год, без явлений интоксикации.

Средняя степень тяжести — одиночные или множественные фурункулы больших размеров, с ярко выраженной воспалительной реакцией с рецидивами от 1 до 3 раз в год. Иногда обострения сопровождаются увеличением регионарных лимфатических узлов, лимфангитом, кратковременным повышением температуры тела и незначительными признаками интоксикации.

Тяжелая степень фурункулеза — диссеминированные, множественные, непрерывно рецидивирующие очаги со слабой местной воспалительной реакцией, непальпируемыми или слегка пальпируемыми регионарными лимфатическими узлами, сопровождающиеся симптомами общей интоксикации.

Нет сомнения в необходимости воздействия на этиологический фактор заболевания. В связи с этим пациенты с хроническим фурункулезом, как правило, получают множественные и длительные курсы антибактериальных препаратов. К сожалению, бесконтрольное применение антибактериальных препаратов привело к распространению антибиотикорезистентных форм стафилококка. Одним из путей решения описанной сложной ситуации является подбор антибактериального препарата, к которому пока сохранена чувствительность микроорганизмов. В частности, может быть использован препарат Фуцидин, действующим веществом которого является фузидиевая кислота — антибиотическое вещество, образуемое при биосинтезе грибом Fusidium coccineum. По своей химической структуре фузидиевая кислота не относится ни к одной группе антибактериальных препаратов, являясь соединением, по строению более близким к сердечным гликозидам, стероидным гормонам и холестерину.

Не проявляя активности сердечных гликозидов и гормонов, Фуцидин оказывает эффективное противомикробное действие в отношении грамположительных кокков, причем максимально — в отношении стафилококков. Видимо, нетипичное химическое строение и отсутствие широкого использования объясняют чувствительность к Фуцидину стафилококков, устойчивых к пенициллинам, аминогликозидам, макролидам и другим антибиотикам.

Фуцидин получил распространение в дерматологической практике в качестве препарата для местного лечения при фолликулитах и пиодермии. Это послужило основанием для его местного применения в амбулаторной хирургии при гнойно-воспалительных заболеваниях мягких тканей в стадии инфильтрации для предотвращения абсцедирования.

В исследование были включены 28 человек с рецидивирующими гнойно-воспалительными заболеваниями мягких тканей. Все пациенты были трудоспособного возраста, от 22 до 54 лет, средний возраст составил 32,3 ± 5,2 года, преобладали женщины (19 женщин и 9 мужчин). Все больные обратились к амбулаторному хирургу по поводу самостоятельно обнаруженного болезненного уплотнения в коже различной локализации с умеренно выраженными воспалительными признаками.

У большинства пациентов (75 %) при осмотре были выявлены фурункулы в стадии воспалительной инфильтрации с локализацией на передней и внутренней поверхности бедра, на спине, на задней поверхности шеи, в подбородочной области. У 3 из этих пациентов фурункулы были множественными, с явлениями лимфангита и регионарного лимфаденита, у остальных — единичными, без выраженной воспалительной реакции, с умеренным увеличением регионарных лимфатических узлов. Помимо описанных больных, в исследование вошли 4 женщины с явлениями начинающегося гидраденита подмышечной области и 3 мужчин 22–28 лет с воспалительными уплотнениями в проекции послеоперационного рубца после иссечения эпителиального копчикового хода (операции выполнялись 1–2 года назад, заживление полное, до исследования подобных жалоб не возникало).

Главным критерием отбора пациентов являлось отсутствие у них признаков абсцедирования инфильтративных очагов и, соответственно, необходимости в срочном оперативном вмешательстве. Все пациенты ранее обращались за хирургической помощью по поводу абсцедирующих фурункулов другой локализации либо подмышечных гидраденитов, в связи с которыми перенесли неоднократные вскрытия и санации гнойных очагов и курсы антибиотикотерапии. Отметим, что первичное обращение к хирургу по поводу воспалительного заболевания мягких тканей в большинстве случаев происходит в стадии ярко выраженного нагноения, когда возможности консервативных мероприятий уже неактуальны.

Пациенты с хроническим рецидивирующим фурункулезом, перенесшие ранее неоднократные хирургические манипуляции и стремящиеся избежать их повторения, обращаются к врачу, как правило, в начальной стадии гнойно-воспалительного процесса. В стадии инфильтрации можно рекомендовать обработку воспалительного уплотнения растворами антисептиков, согревающие компрессы, различные физиотерапевтические процедуры — УВЧ, лазеро- и магнитотерапию, УФ-облучение, электрофорез с антибиотиками. Обкалывание инфильтрата раствором новокаина с антибиотиками применяется в настоящее время крайне редко. Влажные компрессы могут способствовать размягчению и мацерации кожи над инфильтратом, приводящими к распространению воспалительного процесса. Физиотерапевтические процедуры безопасны и высокоэффективны, однако ежедневное их выполнение в условиях поликлиники зачастую требует больших временных затрат и поэтому не всегда приемлемы для работающих людей.

У пациентов с воспалительными инфильтратами различной локализации в качестве монотерапии применялось местное лечение препаратом Фуцидин в виде крема или мази. В проведенном в Германии исследовании была отмечена очень высокая степень проникновения действующего вещества — фузидиевой кислоты — при нанесении препарата на неповрежденную кожу, благодаря чему обеспечивался хороший локальный антибактериальный эффект в очаге воспаления. Общая антимикробная терапия в этой ситуации не применялась ввиду отсутствия клинических и лабораторных признаков общей интоксикации. Пациентам с наличием нескольких инфильтратов (от 2 до 4) с локализацией на нижних конечностях и явлениями лимфангита и пахового лимфаденита крем в небольшом количестве наносился как на область воспалительных уплотнений, так и по ходу лимфатических сосудов и в проекции паховых лимфоузлов.

Параллельно больным проводилось полноценное плановое обследование для выявления сопутствующей соматической патологии и нарушений иммунного статуса.

В результате обследования установлено, что у 1 пациентки заболевание оказалось проявлением развития сахарного диабета, у 4 пациентов выявлено нарушение толерантности к углеводам, у 5 больных при посеве из полости носоглотки был обнаружен коагулазоположительный золотистый стафилококк. Все пациенты консультированы иммунологом — грубых нарушений иммунного статуса выявлено не было, после купирования воспалительных явлений всем пациентам были назначены курсовые приемы иммунокорректоров.

При лечении Фуцидином была отмечена хорошая переносимость препарата, аллергических реакций не отмечалось. Субъективно некоторый регресс болевого синдрома и локальных воспалительных явлений пациенты наблюдали в среднем спустя 2–3 сут после начала применения препарата, однако уже спустя сутки частью больных были отмечены стабилизация прогрессивно нарастающих до этого болевых ощущений и уменьшение локальной гипертермии. Полное купирование болей и воспалительных явлений со значительным уменьшением размеров инфильтрата происходило в среднем на 4–5-е сутки использования препарата. В итоге признаки воспаления мягких тканей полностью исчезли у 25 больных (89 %) благодаря только консервативному местному лечению. Малоэффективной оказалась терапия у 3 женщин. У одной оказался впервые выявленный сахарный диабет, у другой — нарушение толерантности к углеводам; еще у одной больной в ходе динамического наблюдения было отмечено абсцедирование подмышечного гидраденита и понадобились его вскрытие и санация, а также санация носоглотки и иммунокорригирующее лечение. Первые две пациентки имели исходно множественные (в количестве 3 и 4) фурункулы в области бедер с явлениями лимфангита и полиаллергия на антибактериальные препараты. Им понадобилось хирургическое вскрытие нагноившихся фурункулов в количестве 1 и 2 соответственно, остальные инфильтраты регрессировали без остаточных явлений.

Таким образом, своевременно начатое консервативное лечение гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей в инфильтративной стадии дает хороший эффект в купировании воспалительных явлений и предотвращении нагноения воспалительного инфильтрата. Важным критерием при выборе антибактериального препарата для местной терапии являются хорошая проникающая способность антибиотика, обеспечивающая его доставку к тканям в воспалительном очаге, и предполагаемая эмпирически высокая чувствительность к нему этиологического агента. Возможность избежать множественных, часто повторных, оперативных вмешательств позволяет обеспечивать хороший косметический эффект и психологический комфорт для больных, а также сохранить трудоспособность пациентов в период амбулаторного лечения.

Литература

1. Гостищев В. К. Оперативная гнойная хирургия: руководство для врачей. М.: Медицина, 1996. 416 с.
2. Кузин М. И., Костюченок Б. М. Раны и раневая инфекция. М.: Медицина, 1990. 591 с.
3. Хаитов Р. М., Щельцина Т. Л. и др. Иммуномодуляторы в профилактике и лечении гнойной хирургической инфекции // Хирургия. 1997. № 1. С. 49–56.
4. Гладько В. В., Устинов М. В. Пиодермия: взгляд профессионала на социальную значимость // Медицина. Качество жизни. 2006. № 6. С. 15–23.
5. Закиева И. В., Туйсин С. Р. Анализ обращаемости в хирургический кабинет поликлиники пациентов с гнойными заболеваниями мягких тканей // Хирургические болезни и новые технологии: Сб. трудов конференции. М., 2001. С. 22–27.
6. Машковский М. Д. Лекарственные средства: пособие для врачей. М.: Торгсин, 1997. 543 с.
7. Калинина Н. М. Нарушения иммунитета при рецидивирующем фурункулезе// Цитокины и воспаление. 2003. № 1. С. 28–36.
8. Laube S. Skin infections and ageing // Ageing Res. Rev. 2004; 3: 69–89.

---

М. А. Засорина, кандидат медицинских наук
МСЧ № 2, Москва

Внебольничная пневмония. Клинические примеры

Стенограмма лекции

XXV Всероссийской Образовательной Интернет Сессии для врачей

Общая продолжительность: 21:21

00:00

Оксана Михайловна Драпкина, секретарь межведомственного Научного Совета по терапии РАМН, доктор медицинских наук, профессор:

— Заключение нашей Интернет Сессии. Я сразу хочу сказать, что это заключение выбрано академиком Ивашкиным Владимиром Трофимовичем не случайно: это старт нового проекта, который будет курировать Соколина Ирина Александровна.

Сегодня Ирина Александровна будет говорить о внебольничной пневмонии, о клинических примерах.

Я хочу сказать, что вся наша клиника (и не только наша клиника, так как мы в одном корпусе) во всех сложных, да и не очень сложных случаях, когда надо посоветоваться в плане не только диагностики, но и ведения пациента с патологией легочной системы и с добавочными дольками селезенки (и с чем еще – я сейчас даже не могу припомнить)… Девятый этаж – это излюбленное место наших консультаций. Как раз кабинет Ирины Александровны, заведующей нашим отделением рентген-лучевой диагностики.

Ирина Александровна Соколина, заведующая отделением рентгено-лучевой диагностики Первого московского государственного медицинского университета имени И.М. Сеченова:

— Доброго времени суток, уважаемые коллеги! Сегодня темой нашего первого выступления будет именно современная лучевая диагностика пневмонии.

Итак. Задачами лучевой диагностики при любых заболеваниях является:

• выявление патологических изменений в легочной ткани;
• уточнение локализации и распространенности;
• наличие осложнений;
• оценка эффективности лечения;
• дифференциальная диагностика (самое важное).

01:32

При пневмониях используются следующие методы лучевой диагностики. Безусловно, все начинается с обзорной рентгенографии органов грудной полости, обязательно проведенной в двух проекциях – в прямой и в боковой проекции. Это исследование используется при начале заболевания и в среднем через 7-10 дней.

В сложных клинических случаях (например, при клинической картине пневмонии или высокой вероятности развития пневмонии, но при сомнительных и нормальных данных рентгенографии) целесообразно выполнение компьютерного томографического исследования для подтверждения либо исключения этого заболевания и с целью дифференциальной диагностики.

Проведение ультразвукового исследования целесообразно при подозрении на плевральный выпад для его выявления, а также для уточнения состояния жидкости.

Кратность выполнения рентгенологического исследования при пневмониях зависит от клинической ситуации. При неблагоприятном течении процесса, в том числе при развитии осложнений, частота и вид рентгенологических исследований определяются клиническими показаниями.

Лучевая картина пневмонии зависит от типа инфильтрации.

В настоящее время выделяют альвеолярный или так называемый плевропневмонический тип инфильтрации. Он развивается при локализации воспалительного процесса в альвеолярной ткани. Наиболее часто вызывается такими инфекционными агентами как пневмококки или палочка Фридлендера, стафилококками.

Рентгенологические признаки альвеолярной инфильтрации имеют вид участков инфильтрации, как правило, однородной структуры, средней интенсивности. В зоне инфильтрации отчетливо видны воздушные просветы бронхов (так называемый симптом «воздушной бронхографии»).

Инфильтрат широким основанием прилежит к костальной плевре. Интенсивность его уменьшается по направлению к корню легкого. Патологически инфильтрат чаще локализуется в задненижних отделах легких (в пределах 1-2 сегментов, реже в пределах целой доли).

04:02

Следующий тип инфильтрации: очаговый (так называемый бронхопневмонический). Он возникает при остром воспалении альвеолярной ткани легкого, которая развивается уже на основе возникшего бронхита или бронхиолита. Наиболее частыми инфекционными агентами, вызывающими бронхопневмонию, являются стрептококки, палочка инфлюэнцы, синегнойная палочка и стафилококки.

Рентгенологические признаки при бронхопневмонии разнообразны, но чаще всего это участок инфильтрации легочной ткани неоднородной структуры, который состоит из полиморфных (как правило, сливных) очагов с нечеткими контурами. Зона инфильтрации может занимать один или два сегмента. Чаще встречается двусторонняя локализация при этом типе инфильтрации.

В то же время следует обратить внимание, что около 10% бронхопневмоний не выявляются при рентгенологическом исследовании.

Наконец, самый сложный для выявления рутинными методами, обзорной рентгенографией тип инфильтрации: так называемый интерстициальный тип инфильтрации. При нем инфильтрация возникает преимущественно в стенках альвеол (вовлекаются интерстициальные структуры тканей легкого).

Это не следует путать с интерстициальными пневмониями в рамках фиброзирующего альвеолита.

Рентгенологические признаки при интерстициальном типе состоят из одного или нескольких участков уплотнения легочной ткани, как правило, неоднородной структуры, низкой интенсивности. Это называется симптом «матового стекла». Инфильтрат имеет нечеткие контуры. В зоне этих изменений возможно усиление легочного рисунка за счет инфильтрации интерстициальных структур.

Решающая роль в выявлении интерстициальной пневмонии принадлежит компьютерной томографии высокого разрешения.

Что касается внебольничных пневмоний, то они возникают, как правило, у здоровых людей при отсутствии у них заболеваний или патологических состояний, способствующих развитию инфекционного процесса. Основные инфекционные агенты – это пневмококки, микоплазма.

Возбудители проникают в легкие через дыхательные пути (бронхогенно) обычно на фоне переохлаждения, стрессовой ситуации или острого респираторного заболевания.

Как я уже говорила, рентгенологическая картина определяется типом инфильтрации и стадией воспалительного процесса.

06:33

Наиболее типичными рентгенологическими признаками является локальный участок инфильтрации легочной ткани (обычно альвеолярного типа), объем поражения. В настоящее время уже редко встречаются долевые инфильтрации. Обычно это 1-2 сегмента. Изменение обычно носит односторонний характер.

Как пример я могу привести пневмококковую пневмонию, которая развивается как самостоятельное заболевание. Характеризуется острым началом и яркой клинической картиной. Рентгенологические признаки зависят, прежде всего, от стадии развития этой пневмонии.

Стадия прилива будет характеризоваться понижением прозрачности участка легочной ткани без явных границ за счет гиперемии в зоне воспаления. В стадии опеченения мы будем видеть характерный альвеолярный инфильтрат долевой или сегментарной протяженности, на фоне которого будут видны воздушные просветы бронхов, будет сохраняться симптом «воздушной бронхографии». В стадии разрешения тень инфильтрата может становиться неоднородной.

Это не надо путать с появлением очага деструкции, потому что участки нормализации легочной ткани тоже будут придавать неоднородность, ячеистость воспалительному инфильтрату.

При компьютерном томографическом исследовании (мы видим слева фронтальную реконструкцию и справа мы видим аксиальные срезы) пневмококковая пневмония будет иметь вид уплотнения различной интенсивности — консолидации (эти участки располагаются ближе к костальной или междолевой плевре). Постепенно интенсивность инфильтрата убывает по направлению к корню. Она растекается к корню как масляное пятно.

Можно выделить следующие показания к компьютерной томографии при пневмониях.

У пациента с очевидной клинической симптоматикой пневмонии изменения легких на рентгенограмме отсутствуют. В этом случае для подтверждения воспаления (возможно, это какие-то небольшие участки инфильтрации) целесообразно проведение компьютерного томографического исследования.

При рентгенологическом исследовании больного с предполагаемой пневмонией выявлены, например, нетипичные для этого заболевания изменения. С целью дифференциальной диагностики здесь целесообразно применять компьютерную томографию как уточняющий метод.

Безусловно, рецидивирующая пневмония. При ней патологические изменения возникают в одной и той же зоне. Здесь тоже для уточнения причин возникновения этих изменений.

Конечно, затяжная пневмония, при которой длительность существования инфильтративных изменений в легочной ткани превышает один месяц. Здесь тоже для уточнения причин, которые препятствуют разрешению пневмонии, целесообразно выполнение компьютерного томографического исследования.

В целом, плевропневмония хорошо выявляется при обычном рентгенологическом исследовании.

09:53

Как я уже говорила, с помощью компьютерной томографии лучше проводить дифференциальную диагностику. Самым главным отличительным признаком пневмонии являются видимые воздушные просветы бронхов в структуре инфильтрата. Это мы видим на левом слайде: уплотненные ткани, воздушные просветы бронхов.

В отличие от этого при абсцессах или туберкулезных инфильтратах, которые тоже могут иметь вид уплотнения легочной ткани, мы не будем видеть этого главного симптома вследствие того, что это состояние представляет собой гнойник казеозного или иного расплавления легочной ткани.

Позвольте привести вам несколько сложных примеров.

Пациентка, 62-х лет, длительно курящая, страдающая хронической обструктивной болезнью легких. В связи с усилением кашля и появлением субфебрильной температуры обратилась в поликлинику по месту жительства. У нее были выявлены изменения в нижней доле правого легкого, которые первоначально были расценены как пневмонические.

В течение месяца ей проводилось соответствующее антибактериальное и противовоспалительное лечение. У нее нормализовалась температура, но все равно сохранились изменения при рентгенологическом исследовании. В связи с тем, что сохранялись жалобы, она была госпитализирована к нам в клинику.

При выполнении компьютерного томографического исследования мы видим совершенно четкую картину периферического образования средней доли правого легкого. Уже с явлениями распада. Такой фокус: прилежащий к плевре, со спикулообразными контурами, окруженный зоной лимфостаза, с наличием увеличенных лимфатических узлов в корне легкого.

При компьютерном томографическом исследовании эта картина не представляла собой сложности в дифференциально-диагностическом плане.

11:58

Еще один пример. Пациент 56-ти лет. У него остро появилась боль в правой половине грудной клетки, усиление одышки. При рентгенологическом исследовании были выявлены изменения средней доли. Они заключались в уплотнении в основании верхней доли (в третьем сегменте). Первоначально они тоже были расценены как пневмонические.

Но в связи с присоединением кровохарканья он был госпитализирован в стационар. Да, мы видим, что и при рентгенологическом исследовании… На компьютерных томограммах в основании верхней доли уплотнение легочной ткани, прилежащее широким основанием, более интенсивное в области междолевой плевры. Но оно имеет вид пропитывания легочной ткани, которое характерно обычно для кровоизлияния.

В базальных отделах мы видим участки со-плеврального линейного фиброза. То, что эти изменения двусторонние и такие многочисленные, позволило нам предположить наличие, заподозрить у больного тромбоэмболию, что впоследствии и… Вот эти вот участки линейного фиброза – как участки уже перенесенных инфарктов.

При выполнении КТ-ангиографии мы видим двусторонние дефекты перфузии, тромбы как в правой, так и в левой легочной артерии. На фоне контрастированных сосудов они выглядят более серыми структурами, которые и позволили изменить диагноз у этого пациента на рецидивирующую тромбоэмболию легочной артерии и инфаркт легкого.

13:51

Конечно, установление этиологического фактора по рентгенологическому исследованию невозможно. Но ряд возбудителей имеют очень характерную (и пневмонии, вызванные этими возбудителями) картину.

Стафилококковые первичные пневмонии, которые развиваются у детей и у пожилых лиц. Для них характерна рентгенологическая картина: они имеют в виде одного или нескольких участков бронхопневмонии. Как правило, это двустороннее поражение, тонкостенные полости деструкции. Характерная картина.

Что касается вторичных стафилококковых пневмоний, они возникают при гематогенном распространении инфекции или остром хроническом гнойном процессе. Тоже имеют вид множественных инфильтратов округлой формы (двусторонних, как правило). Для них характерен полиморфизм с формированием тонкостенных полостей деструкции, которые затем рассасываются.

Дифференциальный диагноз этих состояний необходимо проводить с нагноившимися кистами, истинными абсцессами легких и подострым диссеминированным туберкулезом. Но главная в данной ситуации не лучевая картина в дифференциальной диагностике, а, безусловно, клиническая картина и анамнез.

Пневмонии, вызванные грамотрицательной инфекцией, как правило, развиваются у лиц среднего и пожилого возраста, ослабленных, страдающих хроническими заболеваниями. Вызываются такими инфекционными агентами как клебсиелла, синегнойная палочка, протеус. Имеют тяжелое клиническое течение и высокую летальность.

Здесь мы видим пример пневмонии, вызванной клебсиеллой. При таких пневмониях вызывается обширное долевое затемнение, увеличение объема пораженной доли. Характерно быстрое появление полостей деструкции в структуре инфильтрата.

Микоплазменные пневмонии. Они участились в последнее время. Они характеризуются инфильтрацией альвеол и интерстициальной ткани. Имеют очень разнообразную рентгенологическую картину. Они могут протекать как интерстициальные изменения по типу бронхопневмонии, бронхиолита и так далее.

16:20

Я приведу вам несколько примеров микоплазменной пневмонии. В данном случае мы видим усиление легочного рисунка в нижней доле правого легкого, нечеткость и деформацию бронхососудистых пучков.

В данном случае пневмония имеет вид, близкий к лучевой картине бронхиолита: в виде сливных очагов в центре лобулярных очагов, обусловленных расширением и заполнением бронхиол. Как правило, при таких формах микоплазменной пневмонии наблюдается выраженный бронхообструктивный синдром, который длительно сохраняется после разрешения этой пневмонии.

Тяжелая форма микоплазменной пневмонии в виде обширных участков по типу «матового стекла» с практически субтотальным поражением легкого.

Рентгенологическая картина этой пневмонии может быть различной.

Что касается вирусных пневмоний, они возникают у детей и подростков. Как правило, вирусными агентами, возбудителями являются адено- и риновирусы, вирусы гриппа. Эти пневмонии характеризуются интерстициальным типом изменений легочной ткани, и поэтому являются наиболее сложными для диагностики.

Я позволю себе остановиться на гриппозной пневмонии. В клинической картине обычно преобладают признаки токсикоза, гипертермия, головная боль. Эта пневмония характеризуется в основном интерстициальным типом изменений на начальных этапах.

В данном случае мы видим усиление и деформацию легочного рисунка (обычно в прикорневых отделах). Мелкие очаговые тени. Локализация в средних и нижних отделах одного или обоих легких. Реакция корней.

При компьютерном томографическом исследовании возможно выявить утолщение легочного интерстиция, участки уплотнения легочной ткани по типу «матового стекла», расположенные перибронхиально или периваскулярно.

Здесь мы видели пример молодой женщины 48-ми лет, которую мы наблюдали. К сожалению, она погибла от гриппозной пневмонии. В терминальной стадии мы видим двустороннюю очагово-сливную пневмонию. Признаки геморрагического трахеита были обнаружены при вскрытии. При патологоанатомическом исследовании также массивные инфильтрации легочной ткани с геморрагическим пропитыванием.

19:02

Какой должна быть тактика лучевого обследования пациентов с внебольничной пневмонией?

Основной методикой лучевого обследования больных с предполагаемой или установленной пневмонией является, безусловно, рентгенография органов грудной полости в двух проекциях. Для уточнения данных рентгенографии может быть использована либо линейная, но лучше всего, конечно, компьютерная томография.

Основным рентгенологическим признаком пневмонии, как я уже говорила, является локальное уплотнение легочной ткани с наличием воздушного просвета бронхов. При отсутствии симптома уплотнения легочной ткани рентгенологическое заключение о наличии пневмонии является неправомерным. Я имею в виду, особенно если идет речь о компьютерной томографии. Если мы не выявляем пневмонию при таком методе – не бывает в данном случае рентген-негативной пневмонии.

Рентгенологическое исследование проводится, как правило, в начале заболевания и не ранее чем через 14 дней от начала антибактериальной терапии. Но оно может быть выполнено и в более ранние сроки при возникновении осложнений или существенном изменении клинической картины заболевания.

Рентгенологическая картина внебольничной пневмонии, как я уже говорила, не имеет корреляции с этиологией пневмонии. Степень ее клинического течения не позволяет определить исход заболевания.

При рентгенологическом исследовании пневмонии в динамике, изменения в легочной ткани постепенно уменьшаются, но сохраняются более длительное время, чем клиническая симптоматика. Об этом надо помнить. Они имеют право сохраняться в течение трех месяцев, поэтому здесь самое главное – ориентироваться на клинику.

Затяжное или рецидивирующее течение пневмонии является показанием для проведения томографического или бронхологического исследования для исключения центрального рака легкого, а также других воспалительных процессов в легочной ткани.

По нашему опыту и по данным литературы, компьютерная томография имеет существенные преимущества в сравнении с той же самой линейной томографией и в оценке состояния легочной ткани и бронхов.

Спасибо за внимание.

SCVP Endomyocardial Biopsy Tutorial

Большое увеличение

После того как слайд иследуется при малом увеличении (4x, 10x увеличения) патологоанатом обычно переходит на большое увеличение в тех областях, которые содержат воспалительный инфильтрат. Обычно это с 20-кратным увеличением. При этом увеличении изучается в первую очередь повреждение миоцитов в областях лимфоцитарного инфильтрата. Не стоит использовать большое увеличение для областей нормальных миоцитарных тканей наблюдаемых при мало увеличении. Этот раздел в учебном курсе рассказывает об особенностях, замеченных на большом увеличении. Она будет охватывать темы повреждения миоцитов, идентификации инфильтраций какподтверждение повреждений миоцитов.

Повреждение миоцитов

 

Как только наличие лимфоцитарного инфильтрата установлено, следующим шагом будет поиск повреждений миоцитов. Повреждение миоцитов (т.е. некроз), который связан с реакцией острого отторжения может быть трудно узнать и другие изменения могут быть приняты за повреждение миоцитов (плохая фиксация например). Этот процесс часто очень нежный и лучше всего его можно оценить, наблюдая за той же самой областью на нескольких уровнях. Некоторые морфологические особенности повреждение миоцитарных тканей включают: вакуолизацию, перинуклеарные просветление, одно ядро без окружающей цитоплазмы, посягательство лимфоцитов на миоцит также миоциты с неровными границами и исчезающие миоциты (зоны интенсивного воспаления и материалами матрицы, где должен был быть миоцит). Гиперэозинофилия и пикноз также является показателем повреждение миоцитов. В пересмотренной рабочий формулировке, приемлемыми признаками повреждения миоцитов включают миоцитолизис и коагуляционный некроз клетки и интерстициальных находок.

Еще один ключ для выявления поражения миоцитов является изменение структуры саркомера. Если можно увидеть нормальные структуры миофибриллов в миоцитах, это признак не пострадавшего миоцита. Если этой структуры нет, и цитоплазма становится гиперэозинофильный и массивной, это признак того, что миоцит поврежден. Специальная окраска может выделить раннее миоцитарное повреждение, и в этом случае миоциты маленькие и имеют больше серо-голубого цвета вместо обычной эозинофилии видимой в нормальном миокарде.

Все эти изменения должны рассматриваться в присутствии соседних лимфоцитов. Если лимфоцитов нет, то миоцитарное повреждение не вызвано клеточным отторжением и является результатом других процессов, таких как ишемическое повреждение, которое можно увидеть в первые недели после трансплантации.

Необходимо всегда смотреть на несколько уровней потенциально поврежденной области как подтверждение миоцитарной травмы, иногда одна гистологическая секция может быть неверно истолкованна.

Идентификация интерстициальных клеток

 

В целом кроме миоцитов можно увидеть множество дополнительных типов клеток в материале биопсии. Наиболее важным будет клеточный инфильтрат возникающий при остром сердечной отторжении, которое в основном Т-клетки (CD4 + и CD8 +), с меньшим количеством макрофагов и иногда эозинофилов. Существенное увеличение активированных В-клеток и естественных клеток-киллеров было замечено при умеренной или тяжелой форме отторжения.

Не все ядра, видимые в интерстиции являются лимфоцитами, однако, и большое увеличение может быть необходимо для определения точной природы инфильтрата, чтобы исключить отторжение. Другие клеточные компоненты интерстиция миокарда включают фибробласты и миофибробласты, примитивные мезенхимальные клетки, дендритные клетки, тучные клетки, эндотелиальные клетки и перициты. Лимфоциты и макрофаги могут также рассматриваться в нормальном миокарде. Как правило,только лимфоциты находятся большими скоплениями в миокарде.

Природа воспалительного инфильтрата

 

Тип воспалительных клеток, видимый в эндомиокардиальной биопсии у сердечных реципиентов важно отличить от реакции отторжения и другим процессом, это также помогает определить степень отторжения. Острое клеточное отторжение всегда характеризуется наличием лимфоцитов (Т-клетки). Активированные лимфоциты, которые являются более заметными при более высоких уровнях отторжения, увеличивают цитоплазму клетки.

В соответствующей ситуации, инфильтрат воспалительных клеток с нейтрофилами и эозинофилами могут указывать на более высокие оценки клеточного отторжения (3R). Нейтрофилы могут также рассматриваться в сердечных биопсиях, которые имеют ишемический некроз, который может присутствовать в течение нескольких недель после трансплантации.

Эозинофилы могут быть замечены в умеренных (2R) или тяжелых (3R) формах отторжения, в которых есть также некроз миоцитов. Как правило,эти формы редки и рассеяны. Эозинофилы почти никогда не присутствуют при слабом (1R) отторжении и их присутствие должно служить сигналом для того, что умеренное или тяжелое (2R и 3R) отторжение, может присутствовать.

Эозинофилы могут также появляться в гиперчувствительном миокардите и чаще всего это связано с фармакологическими агентами. В этом случае, эозинофилы составляют большую часть клеток .Воспалительный инфильтрат в гиперчувствительном миокардите также включает лимфоциты, плазматическими клетками и макрофагами. Хотя фокусный миоцитолиз можно увидеть в гиперчувствительном миокардите, некроз миоцитов не является характерной особенностью. Эозинофилы в эндомиокардиальой б иопсии может также рассматриваться при паразитарной инфекции.

Анализ интерстиция

Очаговая или диффузная субэндокардиальная вакуолизация миоцитов или миоцитолиз, может быть признаком обратимого ишемического повреждения. При миоцитолизе происходит очистка саркоплазмы и ядер, увеличение ядра и более заметные ядрышко. Если это присутствует в эндомиокардиальных образцах биопсии от сердечных реципиентов, которые более чем год после трансплантации, это может быть маркером для ускоренного сужения коронарной артерии, что происходит в пересаженном сердца.

Эндотелиальные клеточные изменения (в AMR)

Критерии постановки диагноза опосредованный антителами острого отторжения представлены в другом месте в этом учебнике. Среди находок на H&E-окрашенных срезах, которые могут предложить AMR, низкая видимость капилляров и вен может быть полезным. Большое увеличение полезно для изучения эндотелиальных клеток, которые в AMR, большие и видные («набухший»), с увеличенными и гиперхромными ядрами. Эти данные подтверждают наличие AMR и гарантируют дальнейшее исследование для оценки на наличие иммуноглобулинов и комплемента.

Вперед, к отторжению.

Обратно к Малое увеличение.

Общество Сердечно-Сосудистой патологии и его инернет страница, не оказывает медицинских советов или рекомендаций. Вы не должны заменить консультации с квалифицированными специалистами какой либо информацией из наших статей.

Инфильтрат. Словарь терминов лучевой диагностики

Главная глоссарий Инфильтрат

Инфильтрат — это межклеточное скопление жидкости с примесями клеточных компонентов, лимфы, крови, приводящее к увеличению объема и уплотнению ткани на данном участке (по аналогии с губкой, пропитанной жидкостью).

Инфильтратам предшествует воспаление инфекционной природы или опухолевый процесс. В первом случае причиной могут быть вирусы, бактерии, грибки, поражающие органы и ткани. Если к воспалительному очагу присоединяется инфекция, возможно нагноение с последующим образованием абсцесса, флегмоны, рубца (в процессе заживления).

Опухолевые инфильтраты возникают при инвазивном росте новообразования, когда клетки новообразования начинают разрушать и замещать здоровые ткани. На КТ инфильтраты визуализируются как локальные уплотнения, имеющие более светлый цвет по сравнению с окружающими тканями.

Легочный инфильтрат — скопление жидкости (экссудата) в легочной паренхиме. В норме альвеолярные пузырьки заполнены воздухом, благодаря этому человек может дышать. Участки легких с инфильтратами теряют функциональные свойства и отекают, в этой связи врачи говорят о поражении легких (например, при пневмонии). Причиной легочного инфильтрата может быть бактериальная, грибковая или вирусная инфекция, паразитическое заболевание, аллергия, развитие опухоли.

Послеоперационный инфильтрат — осложнение хирургического вмешательства, которое возникает из-за инфекции на травмированном участке. «Спусковым механизмом» может быть ослабленный иммунитет пациента, который не может сопротивляться инфекциям в послеоперационном периоде. Неглубокий послеоперационный инфильтрат может проявляться как пальпируемое уплотнение, покраснение и нагноение кожи.

Постинъекционный инфильтрат — осложнение после подкожных или внутримышечных инъекций, спровоцированное нарушением правил асептики и медицинской техники проведения уколов. Проявляется болью, покраснением кожи, повышенной температурой.

Аппендикулярный инфильтрат — воспаление, вызванное сращением аппендикса со слепой, тонкой кишкой или сальником. Наблюдается при аппендиците на 2-4 день заболевания. Вызывает острую боль, повышение температуры тела, нагноение.

Инфильтрат молочной железы лечение

Инфильтрат молочной железы характеризуется повышенной концентрацией в тканях наличия лимфы и крови, что увеличивает объем груди и делает ее ткани более плотными. При этом он может носить как опухолевый, так и воспалительный характер. Воспалительный инфильтрат выступает причиной мастита груди, который в свою очередь может привести к образованию иных малоприятных недуг органа.

Симптоматика инфильтрата груди

Наиболее частыми и распространенными симптомами данного заболевания молочной железы выступают такие показатели, как:

• Сильная постоянная или периодическая боль в месте, где развивается воспаление;
• Покраснение в области инфильтрата;
• Припухлость и уплотнение тканей;
• Повышение температуры.

В случае наблюдения данной симптоматики необходимо срочно обратиться к квалифицированному доктору, поскольку в некоторых случаях под воспалительным процессом местного характера может маскироваться некоторые формы онкологических образований, которые крайне быстро прогрессируют в молочных железах.

Диагностика и лечение инфильтрата молочной железы

Специалисты клиники «Laser medical» Харьков перед назначением курса лечения в обязательном порядке проведут полноценную диагностику недуга на новейшем оборудовании с применением высококачественных медицинских препаратов и высокоточных установок, позволяющих поставить точный диагноз в кротчайшие сроки. При этом обязательно исключат возможность онкологического образования путем гистологического исследования. Одновременно маммолог проведет обследование здоровой груди, чтобы исключить возможность развития гиперплазии на фоне гормонального дисбаланса, а также проведет полноценное исследование гормонального фона организма в целом.

Только после получения всех результатов обследования, установивши основную причину заболевания молочной железы, а также стадию его развития и общее состояние организма, пациентке будет назначено высокоэффективное лечение.

При своевременной диагностике заболевания, оно достаточно хорошо поддается лечению, что позволяет уже по истечению 1-2 недель говорить о полном рассасывании образования в груди и восстановлении гормонального баланса. Для такого консервативного метода лечения назначаются антибиотики широкого спектра, и при необходимости — препараты, направленные на дезинтоксикацию. Если воспаленный инфильтрат молочной железы носит уже гнойный характер, тогда необходимо проводить операцию, при которой в груди полностью вычищаются гнойные участки во избежание последующего распространения патологического процесса.

После оперативного вмешательства пациентке также назначаются антибактериальные и противовоспалительные лекарственные средства. Для того, чтобы записаться на прием к специалистам в клинику «Laser medical» Харьков, необходимо на сайте нажать специальную форму «Запись на прием» или позвонить по номерам телефонов, указанным на веб-портале медицинского учреждения.

Причины атипичного течения инфильтрации лёгочной ткани у пациентов пульмонологического стационара Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 616.24-003.2/.84:616-07

ПРИЧИНЫ АТИПИЧНОГО ТЕЧЕНИЯ ИНФИЛЬТРАЦИИ ЛЁГОЧНОЙ ТКАНИ У ПАЦИЕНТОВ

ПУЛЬМОНОЛОГИЧЕСКОГО СТАЦИОНАРА

М.Л.Штейнер, А.В.Жестков, А.Д.Протасов, Е.В.Паравима, А.П.Чигищев

Самарский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения РФ,

443099, г. Самара, ул. Чапаевская, 89

РЕЗЮМЕ

Цель исследования — анализ упорного (атипичного) течения инфильтрации лёгочной ткани среди 125 пациентов пульмонологического стационара. Всем больным проводилась рентгенография грудной клетки при поступлении и спустя две недели лечения. При отсутствии положительной динамики выполнялась бронхоскопия. Установлено, что в 49,60% случаев упорное течение лёгочной инфильтрации связано с опухолевым процессом, в 17,6% -с туберкулёзным. В 11,2% были выявлены «старые» инородные тела. В 16% случаев причиной отсутствия положительной динамики инфиль-тративного процесса явился определённый клинический фон: хроническая обструктивная болезнь лёгких и хроническая почечная недостаточность. В 4% случаев устойчивость лёгочной инфильтрации была обусловлена атипичной бактериальной флорой. Таким образом, большая часть случаев упорного течения инфильтративного процесса в лёгких была связана с опухолевым или туберкулёзным процессами. Второй по значению причиной является наличие определённого клинического фона, способствующего затяжному течению пневмонии.

Ключевые слова: атипичное течение инфильтрата лёгочной ткани, бронхоскопия.

SUMMARY

THE CAUSES OF LUNG TISSUE ATYPICAL

INFILTRATION COURSE IN PATIENTS OF PULMONARY HOSPITAL

M.L.Shteyner, A.V.Zhestkov, A.D.Protasov, E.V.Paravina, A.P.Chigishchev

Samara State Medical University, 89 Chapaevskaya Str., Samara, 443099, Russian Federation

The aim of the research is to study the thrust (atypical) course of infiltration of lung tissue in 125 patients of pulmonary hospital. All the patients underwent chest radiography on admission and after two weeks of treatment. In the absence of positive dynamics the bronchoscopy was performed. In 49.6% of cases persistent pulmonary infiltration is associated with the tumor process, in 17.6% with tuberculosis, in 11.2% chronic bronchial strange bodies were identified. In 16% of cases certain clinical background became the cause of the lack of positive dynamics of infiltrative process: chronic obstructive pulmonary disease and chronic renal failure. In 4% of cases the resistant pulmonary infiltration was due to atypical bacterial flora. Thus, most cases of persistent course of infiltrative process in the lungs were associated with tumor or tuberculosis

processes. The second most important cause is the presence of certain clinical background which contributes to lingering pneumonia.

Key words: atypical infiltration course of lung tissue, bronchoscopy.

Среди пациентов пульмонологического профиля на уровне стационара достаточно высокий удельный вес приходится на случаи клинико-рентгенологического синдрома инфильтрации лёгочной ткани. По сложившейся практике такие лица госпитализируются, как правило, с направительным диагнозом «внебольничная пневмония». В наиболее типичных случаях, на фоне адекватной антибактериальной терапии синдром инфильтрата нивелирует, что свидетельствует о правильной диагностике и эффективном лечении. Однако нередко инфильтрация лёгочной ткани имеет атипичное, упорное течение. Причинами могут быть как ошибки в диагностике, так и в ведении пациентов при правильном диагнозе «внебольничная пневмония» (неэффективная антибактериальная терапия, недооценка общего клинического фона заболевания и т.д.).

Пневмония на современном этапе определяется как острое инфекционное воспаление нижних дыхательных путей с обязательным поражением альвеол, проявляющееся клинически респираторной симптоматикой и воспалительной инфильтрацией ранее не поражённых участков легочной ткани, выявляемой при лучевой диагностике [2, 3, 6, 13].

Если объективные причины ошибок в распознавании пневмонии достигают 73,5%, то субъективные составляют 26,5-56,3%. Ошибки диагностики могут быть из-за неправильной оценки лихорадочного синдрома, неверной интерпретации аускультативных (застойная сердечная недостаточность) и рентгенологических данных — когда рентгенологические изменения в лёгких, обусловленные раком лёгкого, туберкулёзом, респираторным дистресс-синдромом расценивают как пневмоническую [3, 8, 15].

При дифференциально-диагностическом поиске чаще всего приходится проводить дифференциальный диагноз в группе: рак лёгкого — туберкулёз лёгких — неспецифический воспалительный процесс (т.е. пневмония). Кроме того, под маской пневмонии могут скрываться рентгенонегативные инородные тела тра-хеобронхиального дерева.

Практически, все пациенты с клинико-рентгеноло-гическими синдромами инфильтрата, ателектаза, плеврального выпота в лёгких направляются к врачу-бронхологу с диагнозом «пневмония» [1, 7, 12].

Рак лёгкого, как правило, имеет визуальную эндо-бронхиальную симптоматику, и значимость бронхоскопического метода в его диагностике очевидна [10, 11].

Туберкулёз лёгких же, как правило, патогномонич-ной эндобронхиальной симптоматики не имеет (кроме тех случаев, когда он сочетается с туберкулёзом бронхов), и здесь, зачастую, на первый план выходят диагностический бронхоальвеолярный лаваж с выявлением микобактерий туберкулёза и т.н. «защищённая» браш-биопсия, проводимая с той же целью [4, 5, 14, 16].

Многие авторы отмечают схожесть течения пневмонии и инфильтративного туберкулёза лёгких на современном этапе. Размываются традиционные представления о верхнедолевой локализации процесса. Туберкулёз нередко поражает нижние доли лёгких. Трудности диагностики приводят к тому, что диагноз заболевания выставляется в среднем через 4,5 недели после его начала [5, 9].

В этой ситуации на эндоскопическую службу возлагаются большие задачи по своевременной диагностике состояний, сопровождающихся атипичным течением инфильтративного процесса в лёгких.

Целью исследования был анализ упорного (атипичного) течения инфильтрации лёгочной ткани среди пациентов пульмонологического стационара.

Материалы и методы исследования

Проанализированы результаты обследования и лечения 125 пациентов (100%) с атипичным (упорным)

течением инфильтративного процесса в лёгких за период 2012-2014 гг. Под атипичным течением инфильтративного процесса понималось отсутствие положительной динамики в течение 2 недель активной, в первую очередь антибактериальной терапии внеболь-ничной пневмонии и (или) появление (прогрессирова-ние) осложнений инфильтративного процесса -деструкции лёгочной ткани, абсцедирования, плеврального выпота. Наличие синдрома инфильтрата лёгочной ткани, а также его динамика оценивалось по данным рентгенографии грудной клетки, проводимой дважды: при поступлении и через две недели после лечения. Всем пациентам выполнялось бронхоскопическое исследование. Бронхоскопия проводилась фиб-робронхоскопами FB-15P (Pentax, Япония), BF-TE, BF-1TE30 и BF-1TE60 (Olympus, Япония), а также ви-деобронхоскопом MAF-TE (Olympus, Япония), с помощью которого выполнялись эндобронхиальные фотографии. Премедикационная подготовка осуществлялась с учётом основного заболевания и сопутствующей соматической патологии, местная анестезия проводилась 8 мл 5% р-ра лидокаина.

Результаты исследования и их обсуждение

В результате проведённой бронхоскопии была выявлена следующая патология (табл.)

Таблица

Результаты бронхоскопического исследования у пациентов с атипичным течением инфильтративного

процесса в лёгких за период 2012-2014 гг

Эндоскопическое заключение 2012 2013 2014

Центральный рак лёгкого 18 (14, 4%) 25 (20,0%) 19 (15,2%)

Туберкулёз лёгких (лабораторно верифицированный)* В том числе с формированием туберкулёза бронха, язвенной формы 7 (5,6%) 2 (1,6%) 8 (6,4%) 2 (1,6%) 7 (5,6%) 3 (2,4%)

Инородное тело бронха 5 (4,0%) 4 (3,2%) 5 (4,0%)

Эндобронхиты различной распространённости и степени интенсивности воспаления 9 (7,2%) 7 (5,6%) 9 (7,2%)

Общее количество проведённых исследований по годам 39 (31,2%) 44 (35,2%) 42 (33,6%)

Общее количество проведённых исследований всего 125 (100%)

Примечание: * Визуальная картина в этой ситуации, за исключением случаев сопутствующего туберкулёза бронхов, носила неспецифический характер. Диагноз был установлен по итогам исследования жидкости бронхо-альвеолярного лаважа (окраска центрифугата по методу Циля-Нильсена для выявления кислотоустойчивых микобактерий).

Абсолютное большинство изменений было связано с наличием центрального рака лёгкого (49,6% всех случаев атипичного течения инфильтративного процесса). Как правило, задержка в диагностике была обусловлена отсутствием у этих пациентов клинико-рентгено-логического синдрома ателектаза лёгочной ткани, наличие которого является одним из основных показаний к проведению бронхоскопии. Во всех случаях при бронхоскопии были обнаружены прямые анатомические признаки опухолевого роста (рис. 1). В большинстве случаев центральный рак получил патоморфологическую верификацию.

В другой ситуации чёткую эндобронхиальную симптоматику имели «старые» инородные тела бронхов. При этом отмечалось отсутствие их рентгенопо-

зитивности и, столь характерных для взрослой практики анамнестических указаний на аспирацию (из 14 случаев 9 было связано с алкогольными эксцессами, 2 — с наркотическими и 3 эпизода аспирации отмечались у пациентов с выраженной дисциркуляторной энцефалопатией на фоне хронической цереброваскулярной недостаточности). Пациенты имели клинико-рентгено-логические признаки пневмонического процесса, и лишь отсутствие положительной динамики явилось причиной проведения бронхоскопии (рис. 2).

Туберкулёз лёгких, кроме случаев сочетания с туберкулёзом бронхов (во всех случаях отмечалась язвенная форма поражения) специфической эндобронхиальной симптоматики не имел. Диагноз был верифицирован по итогам исследования жидкости

бронхоальвеолярного лаважа. Проводилась микроскопия осадка с предварительной окраской препарата по методу Циля-Нильсена, в результате которой были идентифицированы кислотоустойчивые микобактерии.

Рис.3

У остальных 25 пациентов (20,0%) в клиническом плане упорное течение инфильтрата было ассоциировано с упорным течением внебольничной пневмонии. При этом у 14 пациентов (11,2%) впервые диагностирована хроническая обструктивная болезнь лёгких, что вполне вписывается в общую негативную тенденцию поздней диагностики этого заболевания. Данный диагноз хронической обструктивной болезни лёгких был подтверждён при поведении спирографического исследования. У всех пациентов была затруднена естественная экспекторация бронхиального секрета, бронхоскопическое пособие помогло разрешить ситуацию. У 6 пациентов отмечалась фоновая хроническая почечная недостаточность различной этиологии. Характерное для этой ситуации частичное перераспределение выделительной функции почек на слизистые оболочки нашло отражение в эндобронхиальной картине (рис. 3): отмечались выраженные воспалительные изменения слизистой (II-III степени интенсивности воспаления по классификации Лемуана), а также наличие геморрагического компонента эндобронхиального воспаления (геморрагическая примесь бронхиального секрета, выраженная петехиальная сыпь).

Таким образом, в большинстве случаев инфильтраты лёгочной ткани были связаны не с пневмонией, а с другими нозологическими формами (при инородных телах пневмонии носили вторичный характер).

Рис.2

Рис. 1. Опухолевые разрастания в главном бронхе.

Рис. 2. В верхнедолевом бронхе правого лёгкого отмечается инородное тело (рыбья кость).

Рис. 3. Множественные геморрагии (петехиальная и сливная геморрагическая сыпь) слизистой оболочки левых главного, верхнедолевого и промежуточного бронхов у пациента с нижнедолевой левосторонней пневмонией на фоне хронической почечной недостаточности.

Выраженный воспалительный процесс слизистой трахеобронхиального дерева препятствовал разрешению инфильтрации лёгочной паренхимы.

И лишь у 5 пациентов (4,0%) причиной упорного течения инфильтративного процесса в лёгких явилась атипичная флора, потребовавшая индивидуального подбора антибактериальной терапии.

Выводы

1. Большая часть случаев упорного течения инфильтративного процесса в лёгких связана с опухолевым или туберкулёзным процессами.

2. Второй по значению причиной является наличие определённого клинического фона, способствующего затяжному течению пневмонии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Волков B.C. Бронхоскопия в дифференциальной диагностике поражений бронхов при туберкулёзе и онкологических процессах // Военно-мед. журн. 2007. Т.328, №4. С.20-23.

2. Гончар Е.Е. Внебольничная пневмония у взрослых // Острые и неотложные состояния в практике врача (Украина). 2009. №6 (интернет-версия). URL:

http://urgent.com.ua/article/135.html

3. Дворецкий Л.И. Ошибки ведения больных вне-больничной пневмонией. Можно ли их избежать? // РМЖ. 2009. Т.17, №14 (интернет-версия). URL: http://www.rmj.ru/articles_6899.htm

4. Дворецкий Л.И., Налиткина А.А., Борисов С.Е. Диагностика туберкулёза органов дыхания в многопрофильном стационаре // Пробл. туб. и бол. легких. 2009. №3. С.9-15.

5. Дейкина О.Н., Мишин В.Ю., Демихова О.В. Дифференциальная диагностика туберкулёза легких и вне-больничной пневмонии // Пробл. туб. и бол. легких. 2007. №1. С.39-42.

6. Колосов В.П., Кочегарова Е.Ю., Нарышкина С.В. Внебольничная пневмония (клиническое течение, прогнозирование исходов). Благовещенск, 2012. 124 с.

7. Кибрик Б.С., Челнокова О.Г. Ошибки диагностической и лечебной тактики при казеозной пневмонии // Пробл. туб. и бол. легких. 2007. №12. С.26-28.

8. Ноников В.Е. Дифференциальная диагностика и лечение внебольничных пневмоний // Consilium medicum. 2005. Т.7, №4. С.268-272.

9. Синопальников А.И., Зайцев А.А. Что скрывается за синдромом «затяжной пневмонии» // Атмосфера. Пульм. и аллергол. 2010. №2. С.11-15.

10. Трахтенберг А.Х., Колбанов К.И. Рак лёгкого // Атмосфера. Пульм. и аллергол. 2008. №4. С.3-9.

11. Лучевая и эндоскопическая семиотика рака лёгкого / Г.Г.Федченко [и др.] // Пульмонология. 2004. №6. С.49-54.

12. Клинико-эндоскопическая диагностика инородных тел бронхов / Н.Е.Чернеховская [и др.] // Пульмонология. 2009. №2. С.120-123.

13. Чучалин А.Г., Синопальников А.И., Страчун-ский Л.С. Пневмония. М.: Мед. информ. агентство. 2006. 464 с.

14. Chung H.S., Lee J.H. Bronchoscopic assessment of the evolution of endobronchial tuberculosis // Chest. 2000. Vol.117, №2. P.385-392.

15. Empirical atypical coverage for inpatients with community-acquired pneumonia: systematic review of randomized controlled trials / D.Shefet [et al.] // Arch. Intern. Med. 2005. Vol.165, №17. Р. 1992-2000.

16. Induced sputum and bronchoscopy in the diagnosis of pulmonary tuberculosis / T.McWilliams [et al.] // Thorax. 2002. Vol.57, №12. P.1010-1014.

REFERENCES

1. VolkovVS. Voenno-meditsinskiy zhurnal 2007; 328 (4): 20-23.

2. Gonchar E.E. Ostrye i neotlozhnye sostoianiya v praktike vracha (Ukraine) 2009; 6. Available at: www.ur-gent.com.ua/article/135.html

3. Dvoretskiy L.I. Russkiy meditsinskiy zhurnal 2009; 17(14). Available at: www.rmj.ru/articles_6899.htm

4. Dvoretskiy L.I., Nalitkina A.A., Borisov S.E. Prob-lemy tuberkuleza I boleznei legkikh 2009; 3:9-15.

5. Deikina O.N., Mishin V.Yu., Demikhova O. V Prob-lemy tuberkuleza I boleznei legkikh 2007; 1:39-42.

6. Kolosov VP., Kochegarova E.Yu., Naryshkina S.V Community-acquired pneumonia (clinical course, predicting outcomes). Blagoveshchensk; 2012 (in russian).

7. Kibrik B.S., Chelnokova O.G. Problemy tuberkuleza I boleznei legkikh 2007; 12:26-28.

8. Nonikov V.E. Consilium medicum 2005; 7(4):268-272.

9. Sinopal’nikov A.I., Zaitsev A.A. Atmosfera. Pul’-monologiya i allergologiia 2010; 2:11-15.

10. Trakhtenberg A.Kh., Kolbanov K.I. Atmosfera. Pul’monologiya i allergologiia 2008; 4:3-9.

11. Fedchenko G.G., Chernekhovskaya N.E., Salpa-garova O.R., Andreev V.G. Pul’monologiya 2004; 6:4954.

12. Chernekhovskaya N.E, Mal’tseva I.M., Korzheva I.Yu., Povalyaev A.V., Makarova G.I. Pul’monologiya 2009; 2:120-123.

13. Chuchalin A.G., Sinopal’nikov A.I., Strachunskiy L.S. Pneumonia. Moscow: Meditsinskoe informatsionnoe agenstvo; 2006 (in russian).

14. Chung H.S., Lee J.H. Bronchoscopic assessment of the evolution of endobronchial tuberculosis. Chest 2000; 117(2):385-392.

15. Shefet D., Robenshtok E., Paul M., Leibovici L. Empirical atypical coverage for inpatients with community-acquired pneumonia: systematic review of randomized controlled trials. Arch. Intern. Med. 2005; 165(17):1992-2000.

16. McWilliams T., Wells A.U., Harrison A.C., Lindstrom S., Cameron R.J., Foskin E. Induced sputum and bronchoscopy in the diagnosis of pulmonary tuberculosis. Thorax 2002; 57(12):1010-1014.

Поступила 06.02.2015

Контактная информация Михаил Львович Штейнер, доктор медицинских наук, врач-эндоскопист, ассистент кафедры хирургии с курсом эндоскопии, Самарский государственный медицинский университет, 443099, г. Самара, ул. Чапаевская, 89.

E-mail: [email protected] Correspondence should be addressed to Mikhail L. Shteyner, MD, PhD, Endoscopist, Assistant of Department of Surgery with the Course of Endoscopy of Samara State Medical University, 89 Chapaevskaya Str., Samara, 443099, Russian Federation.

E-mail: [email protected]

МРТ мягких тканей в Новокузнецке

Понятием «мягкие ткани» условно объединяют разнородные по структуре и функциям тканевые компоненты. К ним относятся подкожно-жировая клетчатка, фасции, сухожилия, рыхлая межмышечная ткань, внутримышечные и периневральные соединительнотканные прослойки, синовиальная ткань, поперечно-полосатые мышцы, сосуды, нервы и лимфатические узлы. Все эти структуры составляют, в среднем, 50% массы тела и могут рассматриваться как отдельная органная система.

Исследование мягких тканей с помощью магнитно-резонансной томографии уникально, оно дает возможность увидеть и оценить мельчайшие структурные элементы нашего тела, такие как, например, волокна сухожилий, отдельные мышечные пучки или тончайшие межмышечные перегородки. Ни один другой метод лучевой диагностики не дает такой контрастности различных тканей и структур, что позволяет увидеть даже минимальные патологические изменения.

Понятием «мягкие ткани» условно объединяют разнородные по структуре и функциям тканевые компоненты. К ним относятся подкожно-жировая клетчатка, фасции, сухожилия, рыхлая межмышечная ткань, внутримышечные и периневральные соединительнотканные прослойки, синовиальная ткань, поперечно-полосатые мышцы, сосуды, нервы и лимфатические узлы. Все эти структуры составляют, в среднем, 50% массы тела и могут рассматриваться как отдельная органная система.

Исследование мягких тканей с помощью магнитно-резонансной томографии уникально, оно дает возможность увидеть и оценить мельчайшие структурные элементы нашего тела, такие как, например, волокна сухожилий, отдельные мышечные пучки или тончайшие межмышечные перегородки. Ни один другой метод лучевой диагностики не дает такой контрастности различных тканей и структур, что позволяет увидеть даже минимальные патологические изменения.

При этом на пациента не оказываться никакого вредного воздействия.

Исследование мягких тканей на высокопольном томографе дает возможность рассмотреть любые имеющиеся изменения как бы «под увеличительным стеклом», то есть томограф может выполнять тончайшие срезы с очень высоким разрешением. Это помогает в выявлении даже незначительных патологических процессов и детальной их оценке.

Итак, МРТ мягких тканей позволяет выявить:

— различные виды травматических повреждений — растяжения, контузии мышц, повреждения сухожилий с детализацией по степеням повреждения;

Контузия промежуточной широкой мышцы бедра III ст. по Stoller.

— варианты посттравматических изменений, такие как застарелые гематомы, рубцово-атрофические изменения,  участки жировой атрофии и фиброза;

Рубцово-атрофические изменения полуперепончатой, большой приводящей

и двуглавой мышц бедра с вовлечением в процесс седалищного нерва.

— воспалительные изменения, такие как воспалительная инфильтрация тканей, абсцессы и флегмоны;

Абсцесс стопы, осложненный распространением процесса на IVплюсневую кость.

— объемные процессы мягких тканей. Применение же контрастного усиления в МР диагностике мягких тканей дает возможность отдифференцировать злокачественные объемные образования от доброкачественных.

Постконтрастные томограммы.

Невринома большеберцового нерва голени.

 Постконтрастные томограммы.

Рабдомиосаркома мягких тканей средней трети бедра.

В случае МР диагностики мягких тканей нельзя не выделить отдельно такие наиболее часто встречающиеся разновидности исследований, как:

МР исследование мягких тканей шеи. Это исследование позволяет выявить и оценить патологические изменения слюнных желез, лимфоузлов, гортани, щитовидной железы и превертебральных мягких тканей.

Увеличенные лимфатические узлы шеи.

Прицельное исследованиеплечевого или крестцового сплетения дает возможность определить наличие компрессионно-невропатических синдромов, таких как сдавление невральных стволов собственно сплетения и/или синдром грушевидной мышцы (сдавление седалищного нерва патологически измененной грушевидной мышцей).

Компрессия седалищного нерва рубцово-измененной грушевидной мышцей.

Исследование инфильтрации ткани мозга клетками медуллобластомы в модели ex vivo

Совместное культивирование среза мозжечка и опухолевых клеток

Для создания модели ex vivo мозжечок был выделен у детенышей мышей в послеродовой день (PND ) 8–10, нарезанный и помещенный в культуру в физиологических условиях (рис. 1A). PND 8–10 приблизительно соответствует стадии развития нервной системы новорожденного ²² . Поскольку одно из мест появления МБ в детском возрасте близко к червю, мозжечок был ориентирован таким образом, что во время сечения мы получали либо типичные дольчатые сагиттальные срезы, либо коронковые срезы, содержащие червь (рис.1Б). Срезы толщиной 350 мкм культивировали на мембранных вставках (помещенных в шестилуночный планшет, содержащий среду) в течение подходящего периода времени. Затем на срезы мозжечка имплантировали сфероиды клеток DAOY MB, экспрессирующих GFP, усиленный LifeAct (LA-EGFP) (фиг. 1A, C). Один сфероид был имплантирован на срез, и это было проверено под микроскопом через день после имплантации сфероида. Эту систему совместного культивирования органотипического среза мозжечка и сфероида опухоли поддерживали in vitro , а исследование роста и инфильтрации опухолевых клеток проводили с использованием иммунофлуоресценции и конфокальной микроскопии.Мы наблюдали базальный уровень диссеминации в срезах, где опухолевые клетки мигрировали либо в виде отдельных клеток (звездочка), либо в виде кластеров (стрелки) (рис. 1D).

Рисунок 1

Совместное культивирование органотипического среза мозжечка и опухоли. (A) Рабочий процесс создания ОКСК и имплантации опухолевого сфероида. (1) Обезглавливание детенышей (ов) мыши на PND 8–10 и изоляция мозжечка. (2) Разделение мозжечка в физиологических условиях с использованием вибратома для создания сагиттальных или коронарных срезов толщиной 350 мкм.(3) Культура срезов мозжечка на мембранных вставках в течение 15 дней in vitro (DIV). (4) Имплантация одного LifeAct-усиленного GFP (LA-EGFP), экспрессирующего сфероид опухоли, на срез. (5) Дальнейшая инкубация совместной культуры in vitro без обработки или с ней. (6) Фиксация и иммунофлуоресценция для микроскопического анализа. (7) Количественная оценка и анализ данных. ( B) Сагиттальный и коронарный срезы мозжечка, окрашенные анти-кальбиндином (красный) для визуализации клеток Пуркинье.( C) Имплантация сфероида клеток DAOY, экспрессирующих LA-EGFP, на срезы. ( D) Распространение опухолевых клеток (зеленые) в срезах мозжечка через 5 дней после начала культивирования.

Определение подходящей временной точки для имплантации опухолевых сфероидов и изучение динамики опухолевых клеток в OCSC

Критическим шагом в создании модели совместного культивирования является определение временной точки, подходящей для имплантации опухолевого сфероида .Таким образом, мы изучили морфологические изменения в архитектуре мозжечка срезов в различные моменты времени, а именно: день in vitro (DIV) 0, DIV 1, DIV 10 и DIV 21 с использованием иммунофлуоресценции. Мы наблюдали, что на DIV 1 характерный монослой клеток Пуркинье (красный), наблюдаемый на DIV 0, был потерян. Это могло быть связано с неизбежной обрезкой определенных аксонов во время секционирования мозжечка. Однако по мере того, как время культивирования прогрессировало, наблюдалась постепенная реорганизация срезов, возможно, из-за установления новых синаптических связей.Между DIV 15 и DIV 21 упорядоченное расположение клеток Пуркинье было видно в большинстве частей культуры. К DIV 21 толщина срезов была уменьшена, и слой клеток Пуркинье (PCL) был установлен в непосредственной близости от расположения на DIV 0 (рис. 2A). Более того, между DIV 10 и DIV 21 присутствие коллатералей аксонов, которые переходят во внутренний гранулярный слой, и дендритных шипов, которые формируют обширные ветви, указывает на созревание срезов (Fig. 2B). На основании этого DIV 15 был выбран как момент времени, подходящий для имплантации опухолевых сфероидов, и протокол культивирования срезов был соответствующим образом скорректирован.На рисунке 2C показан график процедур с анализом имплантированных сфероидов между 5 и 15 днями после имплантации (DIV 20 — DIV 30). Используя маркеры для идентификации различных слоев коры мозжечка (рис. 2D) и сосудистой сети (рис. 2E), мы исследовали любые возможные изменения в организации тканей между DIV 0 и DIV 15. На DIV 15 мы наблюдали четко слоистую организацию. в дольках с зернистым слоем (GL), встроенным в массив клеток Пуркинье. Надежная сосудистая сеть, наблюдаемая с использованием окрашивания антиколлагеном IV на DIV 0, по-видимому, истончалась / уплощалась и реорганизовывалась с новой эндотелиальной сетью в зрелых срезах на DIV 15.Чтобы оценить степень пролиферации как в опухолевых клетках, так и в культуре срезов на DIV 20 (5 дней совместного культивирования), мы выполнили окрашивание 5-этинил-2′-дезоксиуридином (EdU) с последующим обнаружением флуоресцентным азидом. через реакцию [3 + 2] циклоприсоединения, катализируемую Cu (I) (химия «щелчка»). Чтобы определить количество апоптотических клеток, мы окрашивали расщепленную каспазу 3. Мы обнаружили, что LA-EGFP-положительные опухолевые клетки отображали смешанную популяцию клеток — при этом большинство клеток пролиферировало, и менее 10% из них были положительными на расщепленную каспазу. 3 (рис.2F). Несколько EdU-положительных клеток также были обнаружены в срезе, в то время как уровни расщепления каспазой 3 выше фона не были обнаружены. Когда совместное культивирование сохранялось в течение 5 дней in vitro , диссеминированные опухолевые клетки демонстрировали характерные ламеллиподии и мезенхимальную морфологию с полярностью клеток спереди и сзади (фиг. 2G). Через 15 дней после начала совместного культивирования мы наблюдали отчетливую миграцию опухолевых клеток, и эти мигрирующие клетки находились вблизи эндотелиальной сети (рис.2H).

Рисунок 2

Морфологические оценки срезов мозжечка и совместное культивирование in vitro . ( A) Изменения в монослое клеток Пуркинье после культивирования in vitro срезов контролировали на DIV 0, DIV 1, DIV 10 и DIV 21 с помощью антитела против кальбиндина (красный) с помощью конфокальной микроскопии. (B) Серые изображения срезов мозжечка на DIV 0 и после культивирования для DIV 21. ( C) Временная шкала экспериментальной установки для пятидневного эксперимента по совместному культивированию.DIV 15 был выбран как момент времени, подходящий для имплантации опухолевого сфероида. ( D) Слои коры мозжечка визуализировали с помощью конфокальной микроскопии на DIV 0 и DIV 15 для сравнения с антителами против кальбиндина (красный, слой клеток Пуркинье) и против NeuN (зеленый, зернистый слой). ( E) Визуализация сосудистой сети с использованием антиколлагена IV (серый) на DIV 0 и DIV 15. ( F) Определение апоптоза и пролиферации после пятидневного совместного культивирования с использованием анти-расщепленной каспазы 3 (красный) и Click-iT EdU (синий) соответственно.( G) Мониторинг опухолевых клеток, инфильтрирующих срезы мозжечка. ( H) Визуализация сосудистой сети (синий) в присутствии опухолевых клеток. Нижние панели: увеличенные версии вставок в рамке в F, G и H соответственно. В H, EGFP и коллагене IV флуоресценция была увеличена.

Мы пришли к выводу, что оптимальным моментом времени для имплантации опухолевого сфероида является DIV 15. Имплантированные опухолевые клетки пролиферируют, и только небольшая часть опухолевых клеток показывает признаки гибели клеток.Таким образом, совместно культивируемые опухолевые клетки являются жизнеспособными, пролиферативными, инфильтрируют ткань мозжечка и не влияют на жизнеспособность клеточных компонентов ткани хозяина.

Качественное и количественное исследование миграции клеток МБ и массы опухоли с использованием OCSC

Качественный и количественный анализ распространения клеток МБ являются важными предпосылками для оценки поведения опухолевых клеток, особенно после применения экспериментального доклинического лечения. Поскольку инфильтрация здоровой ткани мозжечка трансформированными клетками MB требует клеточной подвижности, мы качественно оценили морфологические характеристики мигрирующих клеток MB в срезах мозжечка после 5 дней начала совместного культивирования.Мы использовали клетки DAOY MB, экспрессирующие LA-EGFP, чтобы обеспечить визуализацию и анализ цитоскелета. Мы наблюдали, что даже в отсутствие экзогенной стимуляции, MB клетки инфильтрировались в смешанном фенотипе как с одиночными, так и с кластерами инфильтрирующих клеток (Fig. 3A). Инфильтрирующие клетки были удлиненными и характеризовались длинными расширениями и заметными ламеллиподиями и филоподиями-подобными выступами, состоящими из сеток и пучков F-актина (Рис. 3A, c-e, стрелки). Мы также наблюдали инфильтрацию ткани мозга человеческим SHH MB линии UW228 (рис.S2), линия HD-MB03 G3 MB (фиг. 5B), а также две первичные клеточные линии глиобластомы Zh511 и ZH561 (фиг. S1).

Рисунок 3

Качественный и количественный анализ поведения клеток MB в совместном культивировании. (A) Визуализация совместного культивирования началась в течение 5 дней. Была проведена морфологическая оценка инвазивных клеток (вставки от а до е в рамке и их соответствующие версии в увеличенном масштабе). (B) Визуализация совместного культивирования клеток Пуркинье / опухолевых клеток через 12 дней после имплантации.( C) Увеличенная версия прямоугольной области в A и ее ортогональный вид. ( D) Увеличение объема опухолевых кластеров в B с помощью Imaris. Графическое изображение расстояния опухолевых клеток-сателлитов от опухолевого кластера 6 (E) и объема опухоли (F) . Изображения в инвертированной шкале серого показывают отдельные каналы для лучшей визуализации клеточных структур. a — e — увеличенные в 63 раза изображения областей, выделенных желтыми рамками. Стрелки указывают на инвазивные ламеллиподии и филоподии-подобные выпячивания во вторгшихся клетках.

Для количественного анализа мы позволили опухолевым клеткам расти и распространяться в течение 12 дней после имплантации в коронковый срез. Совместную культуру затем фиксировали и окрашивали на кальбиндин и исследовали под микроскопом (фиг. 3B). Мы наблюдали отчетливое отделение вторичного кластера опухолевых клеток от первичного кластера опухолевых клеток и активное дальнейшее распространение LA-EGFP-положительных клеток внутри ткани мозжечка. Ортогональные срезы показали, что эти клетки действительно проникли в ткань, а не присутствовали только на поверхности (рис.3С). Чтобы определить, насколько далеко клетки распространились от вторичного кластера в ткани, мы количественно оценили расстояние миграции третичных кластеров от центра кластера 6 (вторичный кластер, рис. 3D). Мы объединили отдельные вторичные и третичные кластеры (рис. 3C и D) и количественно оценили их объемы, чтобы получить представление об их относительных размерах. Мы количественно определили объемы от 5000 до 10 000 мкм ³ в третичных кластерах (рис. 3F) и локализовали их на расстоянии от 200 до 400 мкм от вторичного кластера 6 (рис.3E).

Эти данные показывают, что OCSC могут быть использованы для изучения динамики миграции клеток MB в срезах мозжечка и для количественного определения расстояний и объемов распространения отдельных опухолевых клеток / кластеров. Кроме того, они указывают на то, что диссеминированные клетки либо индивидуализируются сразу после клеточного деления, либо не размножаются массово и остаются неподвижными.

EGF способствует инвазии пластинчатой ​​ткани мозжечка в клеточной модели SHH MB

В предыдущих исследованиях мы определили фактор роста гепатоцитов (HGF) и эпидермальный фактор роста (EGF) как мощные факторы роста, способствующие миграции для MB in vitro . ^23,24 .Чтобы определить их биологическое значение для инфильтрации ткани МБ, мы обрабатывали совместную культуру опухолевых клеток среза мозжечка и МБ с помощью HGF или EGF и измеряли изменение (я) в динамике опухолевых клеток / росте и пролиферации опухолевых клеток по сравнению с необработанными контроль через пять дней непрерывного лечения. Интересно, что в отличие от данных наших исследований in vitro , HGF не стимулировал миграцию сверх того, что мы наблюдали в необработанных клетках. Напротив, EGF вызывал очень отличное поведение опухолевых клеток как в DAOY (рис.4A) и UW228 (рис. 4G). Параллельно мы также определили количество ядер, в которых есть EdU, чтобы оценить различия в пролиферации в трех условиях. Гораздо большее количество EdU-положительных ядер было обнаружено в клетках, стимулированных EGF, по сравнению с клетками, обработанными HGF, или контрольными клетками (фиг. 4B). Опухолевые клетки при обработке EGF также занимали заметно большую площадь среза, чем в необработанных срезах (фиг. 4B). Соответственно, количественная оценка объема сигнала LA-EGFP в стопках изображений, полученных из обработанных EGF срезов, показала значительное увеличение объема опухоли по сравнению с необработанным контролем (рис.4Б).

Рисунок 4

Количественная оценка относительного роста и пролиферации в ответ на стимуляцию HGF или EGF. (A) Анализ с помощью конфокальной микроскопии сфероидных клеток DAOY LA-EGFP, совместно культивируемых в течение пяти дней в ОКСК и подвергнутых воздействию факторов роста, как указано. Сигнал EGFP был увеличен и объем определен количественно. EdU-положительные ядра также были помечены и подсчитаны. ( B) Количественная оценка объема, занятости (площадь опухоли / площадь среза) и количества EdU-положительных ядер.Показаны среднее и стандартное отклонение двух независимых экспериментов. Был проведен статистический анализ ANOVA (* = p <0,05). ( C) Более сильное увеличение стимулированных EGF клеток DAOY, вторгающихся в молекулярный слой. D) Фиолетовые звездочки на панели серой шкалы LA-EGFP выделяют пролиферирующие клетки. E) Увеличение фронта инвазии (вставка в рамке на ( D ). Изображение в перевернутой шкале серого показывает F-актиновый цитоскелет клеток переднего края с отчетливыми филоподиями и ламеллиподиями (стрелки).( F) EGF-индуцированная инвазия клеток DAOY в молекулярный слой (зеленый: LA-EGFP, красный: антикальбиндин). Ортогональный разрез XYZ показывает инфильтрацию опухолевых клеток в слой клеток Пуркинье. Красный и зеленый каналы также показаны как изображения с инвертированной шкалой серого для лучшей визуализации различных слоев. ( G) Сравнение роста и инвазии необработанных и стимулированных EGF сфероидов опухоли UW228. Красные стрелки на полутоновом изображении LA-EGF указывают приблизительную длину вторгающихся клеточных потоков.( H) Более сильное увеличение тканевой инфильтрации клеток UW228 в ответ на EGF. Показаны клетки-лидеры (зеленые) на фронте инвазии на глубине 600 мкм в ткани хозяина и клетки Пуркинье (синие). Изображение в перевернутой шкале серого показывает удлиненный цитоскелет F-актина лидерной клетки с выраженной ламеллиподией. ( I) Морфология EGF-стимулированных клеток UW228 во время сфероид-проксимальной инфильтрации. Изображение справа показывает объемный цитоскелет F-актина с заметными инвазивными выступами.

Наряду с этим заметная разница в способах роста и инфильтрации / распространения наблюдалась при обработке EGF, когда клетки DAOY расширялись в ткань мозжечка в виде компактного слоя, в котором межклеточные контакты оставались неповрежденными. Фронт инвазии стимулированных EGF клеток был ориентирован в сторону молекулярного слоя (рис. 4C). Включение EdU показало отсутствие разницы в пролиферации между вторгающимися и не вторгающимися клетками, поскольку позитивность EdU можно было наблюдать как на фронте инвазии, так и дальше внутри (рис.4D, звездочки). Проникающие клеточные листы, наблюдаемые в ответ на стимуляцию EGF, по-видимому, управляются несколькими клетками-лидерами на фронте вторжения. Примечательно, что эти лидерные клетки обнаруживают выраженные ламеллиподии, которые расширяют богатые F-актином филоподии-подобные выступы в ткани мозжечка. (Рис. 4E, стрелки). Сходным образом клетки UW228 вторгаются коллективно при стимуляции EGF (рис. 4G). Однако, в отличие от клеток DAOY, UW228 имеет тенденцию образовывать потоки удлиненных клеток, которые проникают на несколько сотен микрон вглубь молекулярного слоя окружающей ткани мозга (рис.4G, H). Заметные выпячивания, управляемые полимеризацией F-актина, также четко обнаруживаются в клетках, вторгающихся в непосредственной близости от сфероида опухоли (Fig. 4I).

Вместе эти эксперименты подтвердили, что EGF является сильным промотором клеточной пролиферации и миграции в MB, и продемонстрировали его способность управлять инфильтрацией ткани мозга опухолевыми клетками. Это демонстрирует, что модель ex vivo может использоваться в качестве инструмента для тестирования потенциала различных факторов роста и скрининга возможных терапевтических целей.Наши данные, кроме того, показывают, что во время инвазии в ткань, управляемую EGF, инфильтрирующая клеточная масса организована в виде пластин или потоков с лидерными клетками, простирающимися маркированными, богатыми F-актином выступами на фронте вторжения, которые проникают преимущественно в молекулярный слой.

SHH и клетки MB группы 3 по-разному растут в ткани мозга

Наши исследования с использованием клеток DAOY и UW228 выявили новые морфологические характеристики роста и инфильтрации этих линий SHH MB. Чтобы расширить это исследование и выявить различия в росте и инфильтрационном поведении между клетками разных молекулярных подгрупп, мы создали OCSC с клетками МБ группы 3, чтобы установить новую модель ex vivo также для группы 3 МБ.Мы выбрали эту подгруппу, потому что метастазирующую группу 3 МБ очень трудно контролировать в клинике и она связана с очень высоким риском и плохим прогнозом ²¹ . Мы использовали клетки HD-MBO3, которые были выделены из метастазирующей группы 3 МБ и которые можно выращивать как in vitro , так и in vivo ²⁵ . Подобно клеткам SHH MB DAOY, клетки HD-MB03 выращивали в сфероиды, а затем имплантировали в срезы мозжечка в соответствии с протоколом, установленным для сфероидов DAOY.Поскольку клетки HD-MBO3, экспрессирующие LA-EGFP, еще не доступны, мы визуализировали опухолевые клетки с помощью окрашивания EdU или Vybrant Dil или обоих (фиг. 5A). Через 5 дней после имплантации сфероида мы обнаружили очень большую массу опухолевых клеток, которая увеличилась в пределах мозжечка. Мы сравнили относительную площадь, покрытую массами опухолевых клеток SHH и группы 3 в срезах мозжечка. Клетки HD-MBO3 увеличились почти в три раза больше, чем клетки DAOY, и покрыли 29% площади среза (SHH: 3%) (рис.5А, справа, 5Б). Используя другой срез совместной культуры HD-MBO3-мозжечка, мы определили, инфильтрируют ли клетки MB группы 3 также ткань мозжечка (рис. 5B). Мы увеличили область границы опухоли и обнаружили EdU-положительные ядра того же размера и внешнего вида, что и те, которые были обнаружены в основной массе опухоли (рис. 5B a и b, стрелки). Поскольку ожидается, что не все клетки HD-MBO3 будут включать EdU, мы пометили опухолевые клетки липофильным мембранным красителем Vybrant Dil перед имплантацией, что должно позволить визуализировать опухолевые клетки с помощью флуоресцентной микроскопии.Однако из-за очень высокой скорости пролиферации краситель разбавлялся и обнаруживался в виде перинуклеарных пятен, а не, как ожидалось, в плазматической мембране (рис. 5B). Тем не менее, обнаружение Vybrant Dil также идентифицировало EdU-отрицательные опухолевые клетки, которые проникли в ткань мозга (фиг. 5B c, стрелки c), тем самым подтверждая, что экспансия HD-MBO3 в срезе мозга также включает инфильтрацию ткани одиночными опухолевыми клетками.

Рисунок 5

Массивный рост и инфильтрация мозговой ткани клеток МБ группы 3.( A) Сфероиды LA-EGFP DAOY или HD-MBO3 имплантировали в срезы мозжечка DIV 15 и инкубировали в течение 5 дней. Изображение показывает анализ целых срезов, полученный при конфокальной микроскопии. Окрашивание, как указано. Площадь опухоли по отношению к площади всего среза мозжечка была определена количественно (правые панели) и составила 2,9 и 29,0% для DAOY и HD-MBO3, соответственно. ( B) Рост сфероида HD-MBO3 в OCSC и микроскопический анализ, как в (A). Изображения в перевернутой шкале серого показывают окрашивание опухолевых клеток Vybrant Dil.Графическое представление занятости, полученное в результате трех независимых экспериментов для каждой клеточной линии. Средние значения и стандартное отклонение показаны со статистическим анализом, проведенным с использованием непарного двустороннего t-критерия. (а) — конфокальное изображение границы опухоль-паренхима с большим увеличением. Желтой линией на (b) обозначена граница опухоли, а желтыми стрелками показаны EdU-положительные ядра инфильтрирующих опухолевых клеток. (c) как (a), но с желтыми стрелками, указывающими на EdU-отрицательные инфильтрирующие опухолевые клетки, идентифицированные окрашиванием Vybrant Dil (зеленые).Звездочки указывают на EdU-положительные ядра инфильтрирующих опухолевых клеток.

Таким образом, OCSC также подходит для выращивания ячеек MB группы 3. Важно отметить, что скорость роста клеток группы 3 заметно выше, чем у линий SHH MB DAOY или UW228. Одиночные опухолевые клетки HD-MBO3 внутри ткани мозжечка могут быть обнаружены с помощью маркера пролиферации EdU или липофильного красителя Vybrant Dil, что позволяет предположить, что HD-MBO3 разрастается как за счет роста, так и за счет локальной инфильтрации.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

---

Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

• В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
• Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
• Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
• Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
• Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

---

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

---

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

шагов к обработке тканей для гистопатологии: Leica Biosystems

1.Получение свежего образца

Образцы свежих тканей будут поступать из различных источников. Следует отметить, что они очень легко могут быть повреждены при удалении от пациента или подопытного животного. Важно, чтобы с ними обращались осторожно и как можно скорее после вскрытия правильно зафиксировали. В идеале фиксация должна производиться на месте удаления, например в операционной, или, если это невозможно, сразу после транспортировки в лабораторию.

2. Крепление

Образец помещают в жидкое фиксирующее средство (фиксатор), такое как раствор формальдегида (формалин). Он будет медленно проникать в ткань, вызывая химические и физические изменения, которые укрепляют и сохраняют ткань и защищают ее от последующих этапов обработки. ² Существует ограниченное количество реагентов, которые можно использовать для фиксации, поскольку они должны обладать особыми свойствами, которые делают их пригодными для этой цели.Например, компоненты ткани должны сохранять некоторую химическую активность, чтобы впоследствии можно было применить определенные методы окрашивания. ³ Формалин, обычно в виде раствора с фосфатным буфером, является наиболее популярным фиксатором для сохранения тканей, которые будут обрабатываться для изготовления парафиновых срезов. В идеале образцы должны оставаться в фиксаторе достаточно долго, чтобы фиксатор проник во все части ткани, а затем в течение дополнительного периода, чтобы позволить химическим реакциям фиксации достичь равновесия (время фиксации).Как правило, это означает, что образец должен фиксироваться от 6 до 24 часов. Большинство лабораторий используют ступень для фиксации в качестве первой станции в своем процессоре.

После фиксации может потребоваться дальнейшее рассечение образцов для выбора подходящих участков для исследования. Образцы, которые должны быть обработаны, будут помещены в кассеты с соответствующей маркировкой (небольшие перфорированные корзины), чтобы отделить их от других образцов. Продолжительность графика обработки, используемого для обработки образцов, будет зависеть от типа и размеров самых больших и самых маленьких образцов, конкретного используемого процессора, выбранных растворителей, температуры растворителя и других факторов.Следующий пример основан на шестичасовом графике, подходящем для использования на быстром процессоре ткани Leica Peloris ™.

3. Обезвоживание

Поскольку расплавленный парафин является гидрофобным (не смешивается с водой), большую часть воды из образца необходимо удалить, прежде чем он может быть пропитан воском. Этот процесс обычно выполняется путем погружения образцов в серию растворов этанола (спирта) с возрастающей концентрацией до получения чистого безводного спирта.Этанол смешивается с водой во всех пропорциях, поэтому вода в образце постепенно заменяется спиртом. Серия увеличивающихся концентраций используется, чтобы избежать чрезмерного искажения ткани.

Типичная последовательность дегидратации образцов толщиной не более 4 мм:

1. 70% этанол 15 минут
2. 90% этанол 15 минут
3. 100% этанол 15 минут
4. 100% этанол 15 минут
5. 100% этанол 30 мин.
6. 100% этанол 45 мин.

На этом этапе все, кроме крошечного остатка прочно связанной (молекулярной) воды, должны были быть удалены из образца.

4. Клиринг

К сожалению, хотя ткань теперь практически не содержит воды, мы все еще не можем пропитать ее воском, потому что воск и этанол в значительной степени не смешиваются. Следовательно, мы должны использовать промежуточный растворитель, который полностью смешивается как с этанолом, так и с парафином. Этот растворитель вытеснит этанол в ткани, а затем он, в свою очередь, будет вытеснен расплавленным парафином. Этот этап процесса называется «очисткой», а используемый реагент — «очищающим агентом».Термин «клиринг» был выбран потому, что многие (но не все) очищающие агенты придают оптическую прозрачность или прозрачность ткани из-за их относительно высокого показателя преломления. Другая важная роль очищающего агента заключается в удалении значительного количества жира из ткани, который в противном случае представляет собой барьер для инфильтрации воска.

Популярным очищающим агентом является ксилол, и для полного вытеснения этанола требуется несколько замен.

Типичная последовательность очистки образцов толщиной не более 4 мм:

1. ксилол 20 мин
2. ксилол 20 мин
3. ксилол 45 мин

5.Восковая инфильтрация

Теперь можно пропитать ткань подходящим гистологическим воском. Несмотря на то, что многие различные реагенты были оценены и использовались для этой цели на протяжении многих лет, гистологические воски на основе парафинового воска являются наиболее популярными. Типичный воск является жидким при 60 ° C и может проникать в ткань при этой температуре, а затем остывать до 20 ° C, где он затвердевает до консистенции, позволяющей равномерно разрезать срезы. Эти воски представляют собой смеси очищенного парафинового воска и различных добавок, которые могут включать смолы, такие как стирол или полиэтилен.Следует принимать во внимание, что эти восковые композиции обладают очень особыми физическими свойствами, которые позволяют тканям, пропитанным воском, быть разрезанными по толщине до, по крайней мере, 2 мкм, с образованием лент, когда разрезы разрезаются на микротоме, и для сохранения достаточной эластичности. полностью расплющить во время флотации на теплой водяной бане.

Типичная последовательность инфильтрации для образцов толщиной не более 4 мм будет следующей:

1. воск 30 мин
2. воск 30 мин
3. воск 45 мин

6.Встраивание или блокировка

Теперь, когда образец полностью пропитан воском, из него необходимо сформировать «блок», который можно закрепить в микротоме для разрезания срезов. Этот этап выполняется с использованием «центра заливки», где форма заполняется расплавленным воском и в нее помещается образец. Образец очень тщательно ориентируют в форме, потому что его размещение будет определять «плоскость сечения», что является важным фактором как в диагностической, так и в исследовательской гистологии.Кассета помещается на форму сверху, доливается воском, и все это помещается на холодную тарелку для застывания. Когда это будет завершено, блок с прикрепленной к нему кассетой можно вынуть из формы, и он будет готов к микротомии. Следует отметить, что при правильной обработке тканей восковые блоки, содержащие образцы тканей, очень стабильны и представляют собой важный источник архивного материала.

Клеточная инфильтрация — обзор

МАКРОФАГИ ПРИ ИНТЕРСТИЦИОННОЙ ТРАВМЕ

Макрофагальная и Т-клеточная инфильтрация в интерстиции характерна для всех форм почечной недостаточности у человека, за исключением нефропатии с минимальными изменениями (7, 13, 48, 144, 244). , 361), а также различные модели иммуноопосредованных заболеваний, включая гломерулонефрит против GBM (210, 341), нефрит против TBM (21), гломерулонефрит, индуцированный иммунными комплексами (142, 151), волчаночный нефрит (30) , обструкция мочеточника (340) и нефрит, опосредованный ангиотензином II (107).Во многих из этих моделей была описана временная связь между накоплением макрофагов и почечной прогрессией. Например, накопление интерстициальных макрофагов во время развития гломерулонефрита крыс против GBM дает очень значимую корреляцию с протеинурией, снижением клиренса креатинина и интерстициальным фиброзом (210). Количество резидентных макрофагов в почке зависит от баланса между привлечением моноцитов, пролиферацией макрофагов (207) и смертью. Механизм переноса лейкоцитов обсуждается ниже и включает действие хемоаттрактантов и молекул адгезии лейкоцитов.

Макрофаги можно разделить на две большие группы: резидентные тканевые макрофаги и воспалительные макрофаги. Резидентные тканевые макрофаги обладают небольшой пролиферативной способностью и обновляются за счет постоянной иммиграции моноцитов крови (397). Принимая во внимание, что воспалительные макрофаги, обнаруженные в поврежденных тканях, происходят в основном из циркулирующих моноцитов и активно делятся, хотя некоторые возникают в результате местного деления клеток (208, 414). Воспалительные макрофаги представляют собой гетерогенную популяцию, и выявлены функциональные различия.Интерстициальные, но не гломерулярные макрофаги экспрессируют хемокиновый рецептор CCR5 при пролиферативном гломерулонефрите (343). Кроме того, некоторые исследования показывают, что макрофаги, экспрессирующие белки, связанные с фактором ингибирования миграции (MRP8 и MRP14), лучше коррелируют с тяжестью нефрита (99).

В модели гломерулонефрита на крысах с антителами к GBM более 50% макрофагов в интерстиции пролиферируют. Степень пролиферации макрофагов сильно коррелирует с общим количеством интерстициальных макрофагов, что позволяет предположить, что локальная пролиферация макрофагов является основным механизмом накопления макрофагов во время прогрессирования ускоренного пассивного гломерулонефрита против GBM (405).В модели волчаночного нефрита на мышах локальная продукция макрофагального колониестимулирующего фактора (M-CSF) запускает пролиферацию макрофагов (30). Продукция M-CSF почками, особенно эпителиальными клетками канальцев, играет важную роль в регулировании локальной пролиферации макрофагов при экспериментальном гломерулонефрите и гломерулонефрите человека (159, 160).

Апоптоз — основная сила, уравновешивающая накопление интерстициальных макрофагов, хотя макрофаги, выходящие в дренирующие лимфатические узлы, играют определенную роль (206).В модели ускоренного пассивного гломерулонефрита против GBM на крысах наблюдается значительный апоптоз макрофагов (205). Апоптоз был основан как на окрашивании терминальной дезоксинуклеотидтрансферазой in situ, так и на классических морфологических критериях. В зависимости от количества пролиферирующих макрофагов и количества макрофагов, подвергающихся апоптозу, апоптоз — это процесс, посредством которого количество макрофагов стабилизируется во время воспаления почек (205).

Ряд исследований подтверждают причинную роль интерстициальных макрофагов в опосредовании тубулоинтерстициального повреждения.В большинстве иммуноопосредованных моделей интерстициального заболевания трудно отличить роль Т-клеток от роли макрофагов. Например, в модели ускоренного пассивного переноса анти-GBM заболевания у крыс наблюдается отличная корреляция между интерстициальным накоплением макрофагов и IL-2R-экспрессирующих (активированных) CD4 ⁺ Т-клеток и снижением почечной функции, связанным с интерстициальным фиброз (210). Лечение антагонистами рецептора IL-1 (IL-1ra) (209) или антителами к TNF-α (16) или фактором, препятствующим миграции макрофагов (204), который снижает накопление этих интерстициальных клеток, также защищает от интерстициальных повреждать.Более убедительные доказательства роли макрофагов прибывают из моделей, не инициированных иммунной системой, таких как модель односторонней обструкции мочеточника (UUO). При UUO интерстициальное повреждение в первую очередь зависит от макрофагов, на что указывает тот факт, что у мышей SCID, у которых нет Т- или В-клеток, развивается такая же степень интерстициального повреждения, что и у мышей дикого типа (347). Напротив, истощение макрофагов и Т-клеток улучшает интерстициальное повреждение (126). В совокупности эти исследования убедительно свидетельствуют о том, что макрофаги являются причинным эффектором интерстициального повреждения.

Хотя несколько исследований непосредственно посвящены механизму, посредством которого макрофаги вызывают повреждение канальцев, существует ряд продуктов макрофагов, которые могут опосредовать канальцевую токсичность и интерстициальное повреждение. В моделях на животных, а также у людей инфильтрирующие макрофаги продуцируют активные формы кислорода (ROS), оксид азота (NO), IL-1 и TNF-α, каждый из которых может непосредственно вызывать эпителиальную токсичность (164, 287, 288, 369). , 418). Макрофаги также могут повредить базальную мембрану канальцев, что может повлиять на функцию канальцев и облегчить доступ инфильтрирующих Т-клеток к эпителию канальцев.

Макрофаги играют важную роль в фиброзном ответе на поздних этапах повреждения ткани за счет продукции цитокинов, которые способствуют накоплению, пролиферации и синтезу матрикса фибробластов. Проникающие макрофаги являются основным источником провоспалительного цитокина IL-1, который участвует в фиброзном процессе. IL-1 может стимулировать пролиферацию некоторых типов фибробластов, включая фибробласты, выделенные из фиброзной почки человека (230). Сообщалось также, что IL-1 стимулирует синтез коллагена фибробластами в некоторых, но не во всех исследованиях (307).Макрофаги также синтезируют bFGF и PDGF, два мощных митогена фибробластов, которые играют важную роль в развитии активных фиброзных поражений (201). Кроме того, макрофаги могут синтезировать большие количества TGF-α, ключевой молекулы, регулирующей фиброз почек (348). Производство TGF-α и появление интерстициальных фибробластов параллельно накоплению интерстициальных макрофагов в модели UUO. Повышение регуляции TGF-α предотвращается в этой модели за счет истощения макрофагов (74).

Полная клеточная инфильтрация и формирование толстой ткани in vivo в специально разработанных электроспрядных каркасах

Abstract

Электроспрядные каркасы (ESP) являются перспективным типом тканевых инженерных конструкций для больших дефектов с ограниченной глубиной.Чтобы сформировать новую функциональную ткань, каркасы должны быть пропитаны клетками, которые откладывают внеклеточный матрикс. Однако из-за плотной упаковки волокон и мелких пор инфильтрация клеток и тканей в каркасы ESP ограничена. Здесь мы комбинируем два установленных метода: увеличение диаметра волокна и совместное прядение жертвенных волокон, чтобы создать пористую основу ESP, которая обеспечивает надежную инфильтрацию тканей. Полная клеточная инфильтрация через каркасы толщиной 2 мм наблюдается через 3 недели после подкожной имплантации у крыс.Через 6 недель каркасы ESP почти полностью заполняются тканью de novo . Инфильтрация клеток и формирование ткани in vivo с такой толщиной ранее не достигалось. Кроме того, мы предлагаем новый метод посева in vitro клеток для улучшения инфильтрации клеток и модель для изучения трехмерной миграции через волокнистую сетку. Этот простой подход для облегчения клеточной инфильтрации дополнительно улучшает предыдущие усилия и может значительно помочь в подходах к тканевой инженерии с использованием каркасов ESP.

Заявление о значимости Электроспиннинг создает высокопористые каркасы с волокнами размером от нано до микрометра и является многообещающим кандидатом для различных приложений тканевой инженерии. Однако более мелкие волокна также создают мелкие поры, в которые трудно проникнуть клеткам, ограничивая клетки верхними слоями каркасов. Здесь мы улучшили инфильтрацию клеток за счет оптимизации диаметра волокна и совместного прядения жертвенного полимера. Мы разработали новую технику культивирования, которую можно использовать для улучшения посева клеток и изучения трехмерной миграции цитокинов через волокнистые сетки.После подкожной имплантации наблюдалась инфильтрация тканей и клеток вплоть до каркасов толщиной до 2 мм. О такой глубине инфильтрации in vivo еще не сообщалось для электроспрядных каркасов. Каркасы, которые мы представляем здесь, могут быть использованы для исследований миграции in vitro, и для тканевой инженерии в дефектах с большой площадью поверхности и ограниченной глубиной.

Большая инфильтрация жировой ткани в скелетных мышцах у пожилых мужчин африканского происхождения | Журнал клинической эндокринологии и метаболизма

Контекст: Предрасположенность к ожирению и связанным с ним метаболическим нарушениям существенно различается по этническим группам.Было установлено, что жир скелетных мышц является важным депо, которое увеличивается с возрастом и может способствовать развитию диабета.

Цель: Мы проверили, имеют ли мужчины африканского происхождения большую межмышечную жировую ткань теленка (IMAT) по сравнению с мужчинами европеоидной расы, и связано ли IMAT с диабетом 2 типа (T2D).

Дизайн: Мы измерили уровень глюкозы в сыворотке крови натощак, индекс массы тела, общий жир тела с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии и состав скелетных мышц теленка с помощью количественной компьютерной томографии у 1105 мужчин европеоидной расы и 518 мужчин афро-карибского происхождения в возрасте 65+.

Результаты: По сравнению с мужчинами европеоидной расы мы обнаружили более высокий показатель IMAT и более низкий уровень подкожной жировой ткани у афро-карибских мужчин на всех уровнях общего ожирения ( P <0,0001), включая подгруппу мужчин, сопоставимых по возрасту и по двойному возрасту. Энергетическая рентгеновская абсорбциометрия общего процентного содержания жира в организме ( P <0,001). Кроме того, IMAT был на 29 и 23% выше, тогда как sc жировая ткань была на 6 и 8% ниже среди мужчин европеоидной расы и афро-карибских мужчин с СД2, соответственно, по сравнению с мужчинами без СД2 ( P <0.01). Наблюдаемые различия в межмышечном и подкожном жировых тканях, как этнические, так и между мужчинами с СД2 и без него, не зависели от возраста, роста, скелетных мышц теленка и общей жировой ткани, а также факторов образа жизни.

Выводы: Наш анализ показывает, что, несмотря на более низкое общее ожирение, жировая инфильтрация скелетных мышц выше среди африканцев, чем среди мужчин кавказского происхождения, и связана с СД2 в обеих этнических группах. Необходимы дополнительные исследования, чтобы определить механизмы, способствующие этническим различиям в ожирении скелетных мышц, и определить последствия этого депо для метаболизма и здоровья.

Предрасположенность к ожирению и связанным с ним метаболическим аномалиям, таким как инсулинорезистентность, диабет и дислипидемия, существенно различается среди этнических групп (1, 2). Афроамериканцы более склонны к развитию ожирения, чем представители других этнических групп (1, 2). Этнические различия в массе тела, общем ожирении или даже центральном ожирении (висцеральное и подкожное ожирение) не могут объяснить повышенный риск метаболических нарушений среди афроамериканцев по сравнению с европейцами (2–6).Эти данные предполагают, что другие механизмы могут способствовать метаболическим нарушениям у лиц африканского происхождения. Однако сравнительные исследования этнических групп населения африканского происхождения за пределами США не проводились, и результаты предыдущих исследований не обязательно применимы к другим популяциям африканского происхождения. Новые данные предполагают, что накопление жировой ткани в фасции, окружающей скелетные мышцы (межмышечная жировая ткань), связано с более высоким уровнем глюкозы натощак (7), нарушением толерантности к глюкозе, инсулинорезистентностью и диабетом 2 типа (T2D) (8, 9) и метаболическими нарушениями. синдром (10), не зависящий от общего ожирения.Несколько исследований подтверждают возможность того, что у афроамериканцев может быть больше межмышечного жира по сравнению с европейцами, независимо от различий в общем ожирении и других важных переменных (11, 12). Таким образом, для дальнейшего описания и подтверждения этнических различий в распределении жировой ткани в скелетных мышцах необходимы более масштабные исследования среди популяций африканского происхождения, живущих в различных условиях.

В настоящем исследовании мы проверили гипотезу о том, что у афро-карибских мужчин больше межмышечной жировой ткани по сравнению с мужчинами европеоидной расы, независимо от различий в общем ожирении, массе скелетных мышц и других антропометрических характеристиках и характеристиках образа жизни.Вторичной целью было изучить взаимосвязь между межмышечной жировой тканью и СД2 у мужчин кавказского и африканского происхождения.

Предметы и методы

Исследуемые группы

Примерно 3300 мужчин в возрасте 40 лет и старше на Карибском острове Тобаго были набраны в период с 1998 по 2003 год для популяционного скринингового исследования простат-специфических антигенов (13). Чтобы иметь право на участие, мужчины должны были находиться в амбулаторных условиях, не быть госпитализированными и не неизлечимо больными.Набор участников для опроса осуществлялся с помощью листовок, общественных объявлений, плакатов, информирующих медицинских работников в местных больницах и медицинских центрах, а также с помощью молвы. Приблизительно 60% всех подходящих по возрасту мужчин на острове участвовали, и участие было типичным для приходов острова. Набранная когорта составляла 97% африканцев, 2% жителей Восточной Индии, менее 1% европеоидов и менее 1% «других», как определено в отчете участника об этнической принадлежности бабушек и дедушек по отцовской и материнской линии. Генетические маркеры, информативные о происхождении, подтвердили низкую примесь (6% неафриканцев) в этой популяции (14) по сравнению с афроамериканской популяцией, которая имеет более высокую степень неафриканской примеси (17-24%) (15-17 ).Письменное информированное согласие было получено от всех участников исследования с использованием форм, одобренных институциональными наблюдательными советами Университета Питтсбурга и Отделом здравоохранения и социального обеспечения Тобаго.

В 2004 г. состав тела был оценен при контрольном обследовании с помощью периферической количественной компьютерной томографии (pQCT) и двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA) (Hologic QDR 4500W; Hologic Inc., Бедфорд, Массачусетс) у 2031 мужчины. в когорте (70% выживших) и 451 новый участник.Настоящий анализ ограничен 518 мужчинами в возрасте 65+ лет афро-карибского происхождения (самоотчет четырех бабушек и дедушек африканского происхождения), у которых были полные антропометрические измерения, демографическая информация, история болезни и данные о составе тела. Во время этого визита 87% подходящих мужчин завершили измерения pQCT. Важно отметить, что не было различий в возрасте, росте, весе и индексе массы тела (ИМТ) между мужчинами, которые прошли сканирование pQCT, и теми, у кого не было сканирования pQCT во время визита 2.

мужчин европеоидной расы были включены в исследование остеопоротических переломов в Мужчины (MrOS) Исследование.MrOS — это многоцентровое исследование, в котором приняли участие 5995 мужчин в возрасте 65 лет и старше из шести географических регионов США в период с марта 2000 г. по апрель 2002 г. Подробности исследования были опубликованы (18, 19). Для участия в программе MrOS мужчины должны быть не моложе 65 лет и иметь возможность ходить без посторонней помощи, и им нельзя было сделать двустороннюю операцию по замене тазобедренного сустава. Мужчин набирали в основном через списки рассылки на уровне общины. Рекламные объявления в местных и ведущих газетах и ​​презентации для общественных групп использовались в качестве дополнения к усилиям по набору персонала.Исследование было одобрено экспертными советами в каждом из шести клинических центров, участвующих в MrOS, и до сбора данных от участников было получено письменное информированное согласие.

В среднем через 4,5 года участники исследовательских центров Миннеаполиса и Питтсбурга вернулись на второй визит, когда состав тела и состав скелетных мышц теленка были оценены с помощью DXA и pQCT, соответственно. Участники также заполнили анкеты относительно истории болезни, лекарств, физической активности, употребления алкоголя и курения.Настоящий анализ ограничен белыми участниками из исследовательских центров Питтсбурга и Миннеаполиса, у которых есть полные данные pQCT визита 2 о составе скелетных мышц (n = 1105). Во время визита 2 65% мужчин европеоидной расы в Питтсбурге и Миннеаполисе завершили измерения pQCT. Мужчины, прошедшие сканирование pQCT, были немного моложе (77,5 против , 79,5 лет; P <0,0001), чем те, у кого не было сканирования pQCT во время 2 посещения, но рост, вес и ИМТ не различались между двумя группами. .

pQCT

Сканирование pQCT теленка было выполнено с использованием сканеров Stratec XCT-2000 (Тобаго и Питтсбург) и XCT-3000 (Миннеаполис) (Orthometrix, Inc., Уайт-Плейнс, Нью-Йорк) для оценки общего количества скелетных мышц и площади поперечного сечения жировой ткани. Единственная разница между сканерами XCT-2000 и -3000 — это размер портала. Одно и то же программное обеспечение для сбора и анализа данных использовалось для анализа сканированных изображений на всех объектах. Сканы были получены на 66% длины теленка, проксимальнее терминального конца большеберцовой кости.Это место было выбрано, потому что это область теленка с наибольшей окружностью теленка с небольшими вариациями у разных особей (20). Различные ткани в анализах были разделены в соответствии с разными порогами плотности с использованием алгоритма «мягких тканей». Основываясь на калибровке, жир, мышцы и кортикальный слой кости измеряются с плотностями минерального эквивалента 0, 80 и 1200 мг / см ³ , соответственно. Следовательно, превращение мышечной ткани в жировую ткань будет определяться как сдвиг в минеральной эквивалентной плотности мышцы с 80 до 0 мг / см ³ .Изображения площади поперечного сечения скелетных мышц и жировой ткани анализировали с использованием аналитического программного обеспечения Stratec версии 5.5D (Orthometrix, Inc.). Для обеспечения согласованности все изображения были проанализированы одним исследователем (C.L.G.). Мы получили измерения общей площади поперечного сечения мышц (CSA), общей жировой ткани (TAT), sc жировой ткани (SAT) и межмышечной жировой ткани (IMAT) CSA, все из которых были измерены в квадратных миллиметрах.

DXA измеряет распределение жира в организме

DXA-измерения всего тела были выполнены с использованием денситометра QDR 4500W (Hologic Inc.). Сканы анализировали с помощью программного обеспечения QDR версии 8.26a.

Прочие меры

Высота измерялась с точностью до 0,1 см с помощью настенного ростометра. Вес без обуви регистрировался с точностью до 0,1 кг на весах балансира. ИМТ рассчитывался исходя из роста и веса ( ² килограммов на метр). Информация о привычках образа жизни, демографическая информация, медицинские условия и использование лекарств также оценивалась с помощью анкет, проводимых интервьюером.Было зафиксировано, что курение никогда не курило, курило в прошлом и курило в настоящее время. Частота употребления алкоголя была указана в заранее определенных категориях. Мы произвольно создали две категории употребления алкоголя (≤3 и> 3 напитков в неделю). В обоих исследованиях была записана информация о ходьбе, предоставленная самими участниками, а вопросы, связанные с привычками ходьбы, были сформулированы так, чтобы в основном оценивать «ходьбу в свободное время» (ходьба для физических упражнений или отдыха). Для сравнения результатов MrOS и исследования здоровья на Тобаго мы использовали информацию о ходьбе, о которой сообщают сами люди, поскольку ходьба является преобладающей формой физической активности на острове Тобаго.Анализ глюкозы натощак проводили ферментативно. Образцы контроля качества с нормальным и высоким уровнем глюкозы использовались для мониторинга эффективности анализа глюкозы. Коэффициент вариации между исследованиями был менее 3% в исследовании MrOS и менее 2% в исследовании Тобаго. СД2 определялся как уровень глюкозы в сыворотке крови натощак не менее 126 мг / дл (21) или текущее лечение противодиабетическими препаратами. Уровни глюкозы натощак не были доступны во время визита 2 в MrOS, поэтому мы использовали уровни глюкозы натощак и информацию о текущем приеме противодиабетических препаратов, собранную на базовом экзамене в MrOS.

Статистический анализ

Ковариационный анализ проводился с использованием общей процедуры линейной модели для проверки различий между этническими группами в скорректированных средних непрерывных переменных (возраст, ИМТ, состав тела и состав скелетных мышц pQCT). Из-за их предполагаемой связи с показателями ожирения и состава мышц мы оценили следующие ковариаты: возраст, ходьба, текущее курение и потребление алкоголя, плюс рост для общего жира тела DXA, pQCT общего жира теленка CSA и pQCT мышцы CSA. , плюс pQCT общего жира теленка и CSA мышц теленка для IMAT и SAT.Эти потенциальные ковариаты оценивались в каждой общей линейной модели, даже если они существенно не различались между этническими группами в первоначальном нескорректированном анализе (исходные данные не показаны). Мы также исследовали различия в составе скелетных мышц по тертилям общего жира в организме DXA, по уровню физической активности и по статусу диабета. Чтобы учесть различия в возрасте и общем ожирении между мужчинами кавказского и африканского происхождения и проверить различия в составе скелетных мышц, подвыборка мужчин была сопоставлена ​​по возрасту и процентному содержанию общего жира в организме DXA.Распределения всех непрерывных измерений сначала оценивали на предмет отклонений от нормы. И IMAT (логарифмическое преобразование), и SAT (преобразованное квадратным корнем) были преобразованы перед статистическим анализом. Различия в категориальных переменных (факторы образа жизни и медицинские условия) между мужчинами кавказского и африканского происхождения оценивались с помощью теста χ ² . Система статистического анализа (SAS, версия 9.1; Институт SAS, Кэри, Северная Каролина) использовалась для всех статистических анализов.

Результаты

белых мужчин были старше, имели больший ИМТ, чаще ходили на прошлой неделе, пили больше алкоголя, но курили реже по сравнению с афро-карибскими мужчинами (таблица 1).Распространенность ожирения, определяемая как ИМТ не менее 30 кг / м ² , и процент общего жира в организме были выше, тогда как распространенность СД2 была ниже среди мужчин европеоидной расы, чем среди афро-карибских мужчин. Мы также проверили различия в составе мышц pQCT теленка (таблица 1). У кавказцев было больше общей жировой ткани теленка, а также площади скелетных мышц, чем у афрокарибов. Подкожная жировая ткань составляла более высокий процент, тогда как межмышечная жировая ткань составляла более низкий процент от общей площади жировой ткани у кавказских мужчин по сравнению с афро-карибскими мужчинами.IMAT был на 23% больше, и напротив, SAT был на 42% ниже у афро-карибских мужчин по сравнению с европейскими мужчинами. Различия в IMAT и SAT сохранялись после поправки на возраст, рост, площадь скелетных мышц икры и общую жировую ткань, ходьбу, курение и потребление алкоголя.

Таблица 1.

Характеристика мужчин по национальности

6 8811 ± 28

Характеристика .	европеоид (n = 1105) .	Афро-карибские (n = 518) .	Не скорректированное значение P .	Скорректированное значение P .
Возраст (лет)	77,2 ± 0,16	72,1 ± 0,25	<0,0001
ИМТ (кг / м 2 )	411 0,1 ± 0,11	<0,0001	<0,0001 c
DXA общий жир тела (%)	27.2 ± 0,16	22,2 ± 0,26	<0,0001	<0,0001 d
Факторы образа жизни
(Прогулки в% за последнюю неделю) 59,3	<0,0001
В настоящее время курят (%)	2,9	6,6	0,0005
Потребление алкоголя> 3 порций в неделю (%)	33.1	6,4	<0,0001
Медицинские условия
Ожирение (%) a	4106	904 9011 9011 904	4 T2D (%) b	15,7	36,6	<0,0001
pQCT Состав скелетных мышц теленка							1862 ± 39	<0.0001	<0,0001 d
SAT (мм 2 )	1801 ± 24	1264 ± 28	<0,0001	<0,0001 e	6 )	341,7 ± 10,9	419,2 ± 18,7	<0,0001	<0,0001 e
Общая площадь поперечного сечения мышц (мм 2 )	7506 ± 36	534	6800001	<0,0001 d

94 9011 904 общий жир тела 9011 D 27,2 ± 0,16 2410 ± 28A 08 904 2 )

Характеристики .	европеоид (n = 1105) .	Афро-карибские (n = 518) .	Не скорректированное значение P .	Скорректированное значение P .
Возраст (лет)	77,2 ± 0,16	72,1 ± 0,25	<0.0001
ИМТ (кг / м 2 )	27,9 ± 0,11	26,8 ± 0,19	<0,0001	<0,0001 c
22,2 ± 0,26	<0,0001	<0,0001 d
Факторы образа жизни
(ходили за неделю)	(% ходили за последнюю неделю)1	59,3	<0,0001
В настоящее время курят (%)	2,9	6,6	0,0005
Потребление алкоголя> 316,14 9011 904	<0,0001
Медицинские условия
Ожирение (%) a	25.4	18,3	0,0016
T2D (%) b	15,7	36,6	<0,0001
9011 9011 9011 9011 9011 9010 9011 9011 9011 9011 9011 9011 9011 9011
TAT (мм 2 )	2283 ± 28	1862 ± 39	<0,0001	<0,0001 d
SAT (мм 208)	<0.0001	<0,0001 e
IMAT (мм 2 )	341,7 ± 10,9	419,2 ± 18,7	<0,0001	<0,0001 e 9106	7506 ± 36	6807 ± 53	<0,0001	<0,0001 d

Таблица 1.

Характеристики мужчин по национальности

904 26411 0,1 ± 0,1111 904

Характеристики .	европеоид (n = 1105) .	Афро-карибские (n = 518) .	Не скорректированное значение P .	Скорректированное значение P .
Возраст (лет)	77,2 ± 0,16	72,1 ± 0,25	<0,0001
ИМТ (кг / м 2 )	<0.0001	<0,0001 c
DXA Общий жир тела (%)	27,2 ± 0,16	22,2 ± 0,26	<0,0001	<0,0001 d
Прогулки за последнюю неделю (%)	88,1	59,3	<0,0001
Курят сейчас (%)	2.9	6,6	0,0005
Потребление алкоголя> 3 порции в неделю (%)	33,1	6,4	<0,0001
9011
Ожирение (%) a	25,4	18,3	0,0016
T2D (%) b	15.7	36,6	<0,0001
pQCT Состав скелетной мускулатуры теленка
TAT (мм 11 2 9011 9011 9011 9011 902 11 2 108) <0,0001	<0,0001 d
SAT (мм 2 )	1801 ± 24	1264 ± 28	<0,0001	<0.0001 e
IMAT (мм 2 )	341,7 ± 10,9	419,2 ± 18,7	<0,0001	<0,0001 e
мм	7506 ± 36	6807 ± 53	<0,0001	<0,0001 d

6 8811 ± 28

Характеристики .	европеоид (n = 1105) .	Афро-карибские (n = 518) .	Не скорректированное значение P .	Скорректированное значение P .
Возраст (лет)	77,2 ± 0,16	72,1 ± 0,25	<0,0001
ИМТ (кг / м 2 )	411 0,1 ± 0,11	<0,0001	<0,0001 c
DXA общий жир тела (%)	27.2 ± 0,16	22,2 ± 0,26	<0,0001	<0,0001 d
Факторы образа жизни
(Прогулки в% за последнюю неделю) 59,3	<0,0001
В настоящее время курят (%)	2,9	6,6	0,0005
Потребление алкоголя> 3 порций в неделю (%)	33.1	6,4	<0,0001
Медицинские условия
Ожирение (%) a	4106	904 9011 9011 904	4 T2D (%) b	15,7	36,6	<0,0001
pQCT Состав скелетных мышц теленка							1862 ± 39	<0.0001	<0,0001 d
SAT (мм 2 )	1801 ± 24	1264 ± 28	<0,0001	<0,0001 e	6 )	341,7 ± 10,9	419,2 ± 18,7	<0,0001	<0,0001 e
Общая площадь поперечного сечения мышц (мм 2 )	7506 ± 36	534	6800001	<0,0001 d

Не скорректированные средние значения IMAT и SAT по тертилям DXA общего жира тела показаны на рис. 1. IMAT был больше, тогда как SAT был ниже (все значения P < 0,0001) на каждом уровне общего ожирения афро-карибских мужчин по сравнению с мужчинами европеоидной расы. Эти ассоциации оставались значимыми после поправки на возраст, рост, икроножные мышцы и общую жировую ткань, а также факторы образа жизни (все значения P <0.0001; данные не показаны).

Рис. 1.

IMAT (A) и SAT (B) теленка по тертилям DXA общего жира в организме мужчин европеоидной и афро-карибской национальностей. Значения — это нескорректированные средства. Внутри каждого тертиля были значительные этнические различия ( P <0,0001). Тертили были определены как 17,8 или менее, от 17,9 до 23,8 и не менее 23,8 кг соответственно.

Рис. 1.

IMAT (A) и SAT (B) теленка по тертилям DXA общего жира в организме мужчин европеоидной и афро-карибской национальностей.Значения — это нескорректированные средства. Внутри каждого тертиля были значительные этнические различия ( P <0,0001). Тертили были определены как 17,8 или менее, от 17,9 до 23,8 и не менее 23,8 кг соответственно.

Ходьба не была связана с измеренными pQCT общей и подкожной жировой тканью или площадью скелетных мышц. У мужчин европеоидной расы, которые ходили на прошлой неделе, было меньше межмышечной жировой ткани, чем у менее активных ( P <0,05) (Таблица 2). Хотя тенденция осталась прежней, эта разница не была статистически значимой среди афро-карибских мужчин, возможно, из-за меньшего размера выборки ( P = 0.07).

Таблица 2.

Отношение физической активности к общему процентному содержанию жира в организме DXA и составу скелетных мышц теленка у мужчин европеоидной и афро-карибской национальностей

1211410 45410 45410 ± 53

.	Вы ходили за последнюю неделю .
	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Да (n = 974) .	Нет (n = 131) .	Да (n = 307) .	Нет (n = 211) .
DXA общий жир тела (%)	27,2 ± 0,17	27,3 ± 0,45	21,7 ± 0,33	23,0 ± 0,40 b
pQT 8 мм	pQT 8	2283 ± 29	2279 ± 80	1853 ± 51	1876 ± 62
pQCT SAT теленка (мм 2 )	1826 ± 25	1770 ± 66
pQCT теленка IMAT (мм 2 )	318.7 ± 12,4	372,9 ± 33,3 a	436,6 ± 22,7	480,3 ± 26,4
pQCT Общая мышца CSA голени (мм 2 )	7512 ± 36		7459 66	6889 ± 80

1211410 45410 45410 ± 53

.	Вы ходили за последнюю неделю .
	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Да (n = 974) .	Нет (n = 131) .	Да (n = 307) .	Нет (n = 211) .
DXA общий жир тела (%)	27,2 ± 0,17	27,3 ± 0,45	21,7 ± 0,33	23,0 ± 0,40 b
pQT 8 мм	pQT 8	2283 ± 29	2279 ± 80	1853 ± 51	1876 ± 62
pQCT SAT теленка (мм 2 )	1826 ± 25	1770 ± 66
pQCT теленка IMAT (мм 2 )	318.7 ± 12,4	372,9 ± 33,3 a	436,6 ± 22,7	480,3 ± 26,4
pQCT Общая мышца CSA голени (мм 2 )	7512 ± 36		7459 66	6889 ± 80

Таблица 2.

Связь физической активности с общим процентным содержанием жира в теле DXA и составом скелетных мышц теленка у мужчин европеоидной и афро-карибской национальности

9039CT1 мм ² ) ± 3310 374,3

.	Вы ходили за последнюю неделю .
	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Да (n = 974) .	Нет (n = 131) .	Да (n = 307) .	Нет (n = 211) .
DXA общий жир тела (%)	27,2 ± 0,17	27,3 ± 0,45	21,7 ± 0.33	23,0 ± 0,40 b
pQCT ТАТ теленка (мм 2 )	2283 ± 29	2279 ± 80	1853 ± 51	1876 ± 62	1826 ± 25	1770 ± 66	1211 ± 45	1244 ± 53
pQCT теленок IMAT (мм 2 )	318,7 ± 12,4	436.6 ± 22,7	480,3 ± 26,4
pQCT Общая мышечная масса теленка ППС (мм 2 )	7512 ± 36	7459 ± 99	6750 ± 66	6889 ± 80

15 1211410 45410 45410 ± 53

.	Вы ходили за последнюю неделю .
	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Да (n = 974) .	Нет (n = 131) .	Да (n = 307) .	Нет (n = 211) .
DXA общий жир тела (%)	27,2 ± 0,17	27,3 ± 0,45	21,7 ± 0,33	23,0 ± 0,40 b
pQT 8 мм	pQT 8	2283 ± 29	2279 ± 80	1853 ± 51	1876 ± 62
pQCT SAT теленка (мм 2 )	1826 ± 25	1770 ± 66
pQCT теленка IMAT (мм 2 )	318.7 ± 12,4	372,9 ± 33,3 a	436,6 ± 22,7	480,3 ± 26,4
pQCT Общая мышца CSA голени (мм 2 )	7512 ± 36		7459 66	6889 ± 80

Мы также проверили различия в составе скелетных мышц теленка среди 152 мужчин кавказского и африканского происхождения, соответствующих возрасту и общему содержанию жира в организме DXA (Таблица 3). Несмотря на то, что не было различий в ИМТ, процентном содержании общего жира в организме и общей жировой ткани теленка между двумя этническими группами, мужчины африканского происхождения по-прежнему имели более высокий показатель IMAT и меньший показатель SAT, чем мужчины европеоидной расы ( P <0.001 для всех). Разница в распространенности СД2 в подобранной подвыборке была особенно разительной: 44% афрокарибов страдали диабетом по сравнению с 13% европеоидов.

Таблица 3.

Признаки ожирения и доля СД2 в подвыборке мужчин европеоидной и афро-карибской национальности, сопоставимой по возрасту и общему количеству жира в организме,

pQCT теленка SAT (мм ² ) ^c p мускул 2 ) ^b

Характеристики .	европеоид (n = 76) .	Афро-карибские (n = 76) .
Возраст (лет)	74,4 ± 0,4	74,4 ± 0,4
ИМТ (кг / м 2 ) a	27,5 ± 0,5	27,840 ± 0,5 DXA общий жир тела (%) b	25,6 ± 0,65	25,4 ± 0,65
pQCT ТАТ теленка (мм 2 ) b	2198 ± 117	214910 ± 116	214910 ± 116	1722 ± 43.8	1460 ± 44,2 d
pQCT теленок IMAT (мм 2 ) c	276,2 ± 43,7	544,6 ± 43,4 d
7770 ± 123	6468 ± 122 e
T2D (%)	13,2	44,3 e

9039 9039 . pQCT теленка SAT (мм ² ) ^c p мускул 2 ) ^b

европеоид (n = 76) .	Афро-карибские (n = 76) .
Возраст (лет)	74,4 ± 0,4	74,4 ± 0,4
ИМТ (кг / м 2 ) a	27,5 ± 0,5	27,840 ± 0,5 DXA общий жир тела (%) b	25,6 ± 0,65	25,4 ± 0,65
pQCT ТАТ теленка (мм 2 ) b	2198 ± 117	214910 ± 116	214910 ± 116	1722 ± 43.8	1460 ± 44,2 d
pQCT теленка IMAT (мм 2 ) c	276,2 ± 43,7	544,6 ± 43,4 d
7770 ± 123	6468 ± 122 e
T2D (%)	13,2	44,3 e

ipos Таблица 3. Характеристика таблицы 3. 9000D в подвыборке мужчин европеоидной и афро-карибской национальности, сопоставимой по возрасту и общему количеству жира в организме,

pQCT теленка SAT (мм ² ) ^c p мускул 2 ) ^b

Характеристики .	европеоид (n = 76) .	Афро-карибские (n = 76) .
Возраст (лет)	74,4 ± 0,4	74,4 ± 0,4
ИМТ (кг / м 2 ) a	27,5 ± 0,5	27,840 ± 0,5 DXA общий жир тела (%) b	25,6 ± 0,65	25,4 ± 0,65
pQCT ТАТ теленка (мм 2 ) b	2198 ± 117	214910 ± 116	214910 ± 116	1722 ± 43.8	1460 ± 44,2 d
pQCT теленок IMAT (мм 2 ) c	276,2 ± 43,7	544,6 ± 43,4 d
7770 ± 123	6468 ± 122 e
T2D (%)	13,2	44,3 e

9039 9039 . pQCT теленка SAT (мм ² ) ^c p мускул 2 ) ^b

европеоид (n = 76) .	Афро-карибские (n = 76) .
Возраст (лет)	74,4 ± 0,4	74,4 ± 0,4
ИМТ (кг / м 2 ) a	27,5 ± 0,5	27,840 ± 0,5 DXA общий жир тела (%) b	25,6 ± 0,65	25,4 ± 0,65
pQCT ТАТ теленка (мм 2 ) b	2198 ± 117	214910 ± 116	214910 ± 116	1722 ± 43.8	1460 ± 44,2 d
pQCT теленка IMAT (мм 2 ) c	276,2 ± 43,7	544,6 ± 43,4 d
7770 ± 123	6468 ± 122 e
T2D (%)	13,2	44,3 e

9000 мужчин, наконец, нашли существенные различия среди мужчин европеоидной расы во всех измерениях состава тела между людьми с диабетом 2 типа и без него (таблица 4).В частности, у мужчин европеоидной расы с диабетом были более высокие ИМТ, процентное содержание общего жира в организме, измеренное с помощью DXA, и измеренные с помощью pQCT скелетные мышцы теленка, общая жировая ткань и IMAT ( P <0,05 для всех), но меньше SAT ( P < 0,0001). Интересно, что среди афро-карибских мужчин не наблюдалось различий в ИМТ, процентном содержании общего жира в организме с помощью DXA и общей жировой ткани и скелетных мышцах теленка, измеренных с помощью pQCT, между людьми с диабетом и без него (Таблица 4). Тем не менее, среди афро-карибских мужчин IMAT был выше, тогда как SAT был ниже ( P <0.01) у больных диабетом.

Таблица 4. ИМТ

, процентное содержание общего жира в организме и состав скелетных мышц теленка по статусу T2D

904 ± 85,0 ^e

Характеристики .	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Недиабетики (n = 924, 84,2%) .	Диабетики (n = 172, 15,8%) .	Недиабетики (n = 283, 63,4%) .	Диабетики (n = 163, 36,6%) .
Возраст (лет)	77,3 ± 0,17	77,0 ± 0,39	72,3 ± 0,34	72,2 ± 0,45
ИМТ (кг / м 2 108	27,5 2 11 а 0,12	29,9 ± 0,28 f	26,6 ± 0,25	27,4 ± 0,32
Общий телесный жир (%) a	26,9 ± 0,17	28.8 ± 0,39 f	22,0 ± 0,34	23,1 ± 0,45
pQCT TAT теленка (мм 2 ) a	2255 ± 30,0	2424000 ± 7010 1866 ± 30,0	1854 ± 70,8
pQCT SAT теленка (мм 2 ) c	1815 ± 10	1711 ± 23 f	1300 ± 23	1201 9406	pQCT теленка IMAT (мм 2 ) c	328.6 ± 10,3	422,7 ± 23,9 f	390,0 ± 20,7	480,6 ± 27,3 d
pQCT Общая мускулатура голени CSA (мм 2 ) a 7	6793 ± 65,4	6617 ± 85,9

6 904 pQCT теленка SAT (мм ² ) ^c 904 ± 85,0 ^e

Характеристики .	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Недиабетики (n = 924, 84,2%) .	Диабетики (n = 172, 15,8%) .	Недиабетики (n = 283, 63,4%) .	Диабетики (n = 163, 36,6%) .
Возраст (лет)	77,3 ± 0,17	77,0 ± 0,39	72,3 ± 0,34	72,2 ± 0,45
ИМТ (кг / м 2 108 5 ± 0,12	29,9 ± 0,28 f	26,6 ± 0,25	27,4 ± 0,32
Общий телесный жир (%) a	26,9 ± 0,17	28,8 ± 0,310 9 ± 0,34	23,1 ± 0,45
pQCT ТАТ теленка (мм 2 ) a	2255 ± 30,0	2424 ± 70,0 d	1866 ± 53,954	1815 ± 10	1711 ± 23 f	1300 ± 23	1201 ± 30 d
pQ8 9000 мм ) с	328.6 ± 10,3	422,7 ± 23,9 f	390,0 ± 20,7	480,6 ± 27,3 d
pQCT Общая мускулатура голени CSA (мм 2 ) a08 7	6793 ± 65,4	6617 ± 85,9

Таблица 4.

ИМТ, процентное содержание общего жира в организме и состав скелетных мышц теленка по статусу СД2

9039 904% Всего жира1 904% ^a p мм ² ) ^a

Характеристики .	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Недиабетики (n = 924, 84,2%) .	Диабетики (n = 172, 15,8%) .	Недиабетики (n = 283, 63,4%) .	Диабетики (n = 163, 36,6%) .
Возраст (лет)	77,3 ± 0,17	77,0 ± 0,39	72,3 ± 0,34	72,2 ± 0.45
ИМТ (кг / м 2 ) a	27,5 ± 0,12	29,9 ± 0,28 f	26,6 ± 0,25	27,4 ± 0,32
26,9 ± 0,17	28,8 ± 0,39 f	22,0 ± 0,34	23,1 ± 0,45
pQCT TAT теленка (мм 2 ) 3010 240004 ± 70,0 д	1866 ± 53.9	1854 ± 70,8
pQCT SAT теленка (мм 2 ) c	1815 ± 10	1711 ± 23 f	1300 ± 23	120 d1 ± 308 9
pQCT теленка IMAT (мм 2 ) c	328,6 ± 10,3	422,7 ± 23,9 f	390,0 ± 20,7	480,6 ± 27,3 d	7458 ± 36.7	7733 ± 85,0 e	6793 ± 65,4	6617 ± 85,9

904^{10 pQ ммCT} ) ^с 904 ± 85,0 ^e

Характеристики .	Кавказский .		Афро-карибские острова .
	Недиабетики (n = 924, 84,2%) .	Диабетики (n = 172, 15,8%) .	Недиабетики (n = 283, 63,4%) .	Диабетики (n = 163, 36.6%) .
Возраст (лет)	77,3 ± 0,17	77,0 ± 0,39	72,3 ± 0,34	72,2 ± 0,45
ИМТ (кг / м 2 108	27,5 2 11 а) 11 0,12	29,9 ± 0,28 f	26,6 ± 0,25	27,4 ± 0,32
Общий телесный жир (%) a	26,9 ± 0,17	28,8 ± 0,39 07 01080 ± 0,34	23,1 ± 0,45
pQCT ТАТ теленка (мм 2 ) a	2255 ± 30,0	2424 ± 70,0 d	1866 ± 53.954	pQCT теленка SAT (мм 2 ) c	1815 ± 10	1711 ± 23 f	1300 ± 23	1201 ± 30 d
328.6 ± 10,3	422,7 ± 23,9 f	390,0 ± 20,7	480,6 ± 27,3 d
pQCT Общая мускулатура голени CSA (мм 2 ) a08 7	6793 ± 65,4	6617 ± 85,9

Обсуждение

Мы обнаружили, что по сравнению с мужчинами европеоидной расы, у афро-карибских мужчин больше инфильтрация жировой ткани в скелетных мышцах, несмотря на более низкий процент общего жира в организме и меньшую распространенность ожирения, чем у мужчин европеоидной расы.Наши результаты подтверждают выводы двух небольших исследований, в которых сообщается, что афроамериканцы (как мужчины, так и женщины) имеют больше межмышечного жира по сравнению с европейцами, даже после поправки на различия в общем ожирении и других ковариатах (11, 12). Одно из этих исследований показало, что межмышечный жир значительно различается между этническими группами только при высоком уровне общего ожирения (11). Это контрастирует с нашими данными об увеличении межмышечной жировой ткани и более низкой жировой ткани в скелетных мышцах афро-карибских мужчин на всех уровнях общего ожирения, а также среди мужчин, не страдающих ожирением, сопоставимых по возрасту и общему количеству жира в организме.Распространенность диабета у афро-карибских мужчин была значительно выше, чем у мужчин европеоидной расы, даже среди мужчин того же возраста и общего ожирения. Это наблюдение согласуется с результатами других исследований популяций африканского и кавказского происхождения (2, 22–27). Распространенность СД2 среди афро-карибского мужского населения Тобаго, по-видимому, даже выше, чем среди афроамериканских мужчин в предыдущих исследованиях (30%) (28). Предыдущие исследования показали, что черно-белые различия в уровнях глюкозы и инсулина натощак, ИМТ и DXA общего жира в организме могут быть связаны с популяционными частотами аллелей, поскольку эти характеристики коррелировали с процентным содержанием африканской примеси (15, 30, 31).Таким образом, популяции африканского происхождения с очень низкой примесью неафриканского происхождения по сравнению с афроамериканцами, например, афро-карибские мужчины Тобаго, будут полезны для изучения факторов риска, которые могут объяснить большее бремя СД2 среди мужчин африканского происхождения. Будущие исследования в этой популяции должны значительно углубить наше понимание конкретного генетического вклада в жировую инфильтрацию скелетных мышц и повышенного риска СД2 среди лиц африканского происхождения.

Факторы, лежащие в основе этнических различий в жировой инфильтрации скелетных мышц, неизвестны, но существует несколько вероятных биологических механизмов.Некоторые исследования показали снижение окисления жиров (32) и липолиза (33) у афроамериканцев по сравнению с европейцами с аналогичным ИМТ. В других исследованиях сообщалось о более высокой скорости поглощения жирных кислот адипоцитами и более высокой экспрессии белков, транспортирующих жирные кислоты, в адипоцитах среди афроамериканцев (34), что может способствовать их большей жировой инфильтрации в скелетных мышцах. Повышенная экспрессия мышечных волокон типа II была также обнаружена у взрослых афроамериканских мужчин по сравнению с европейцами (35), что может привести к увеличению накопления, а не окислению жирных кислот в скелетных мышцах (36).

Некоторые предположили, что накопление липидов в скелетных мышцах может происходить из-за снижения использования жирных кислот (, т.е. . Снижение липолиза и окисления липидов) (37, 38) и / или увеличения транспорта жирных кислот и их поглощения мышцами. (39). Другие предположили, что нарушение функции митохондрий скелетных мышц и снижение скорости митохондриального окислительного фосфорилирования могут предрасполагать людей к увеличению жировой инфильтрации скелетных мышц (40, 41). Наконец, некоторые предположили, что избыток липидов и диета с высоким содержанием жиров могут снизить количество компонентов дыхательной цепи митохондрий в мышцах (42, 43).Однако исследования с экспериментальным избытком липидов показали неубедительные результаты (44–46). Необходимы дальнейшие исследования, чтобы лучше понять механизмы повышенного накопления жира в скелетных мышцах в целом и между популяциями африканского и кавказского происхождения.

Предыдущие исследования с участием афроамериканцев и европеоидов сообщили о связи между межмышечной жировой тканью и инсулинорезистентностью и диабетом (12, 47). Точно так же у мужчин европеоидной расы и афро-карибских мужчин с диабетом в текущем исследовании было больше межмышечной жировой ткани, независимо от общего ожирения.Мы уже ранее сообщали, что у афро-карибских мужчин с диабетом Тобаго больше межмышечной, но меньше подкожно-жировой ткани, чем у мужчин без диабета, независимо от различий в общем ожирении или площади скелетных мышц (9). В текущем исследовании, в отличие от более высокого общего ожирения (ИМТ, ​​процент общего жира в организме и общая жировая ткань теленка) среди кавказских мужчин с диабетом, афро-карибские мужчины с диабетом и без него имели одинаковые уровни общего ожирения. Важно подчеркнуть, что предыдущие исследования показали, что даже люди африканского происхождения с нормальным весом более инсулинорезистентны по сравнению с сопоставимыми европейцами, и это наблюдение особенно очевидно среди мужчин (5, 48).Не исключено, что жировая ткань скелетных мышц может быть фактором риска инсулинорезистентности и СД2 в популяциях африканского происхождения, особенно среди худощавых мужчин. Для окончательной проверки этой гипотезы необходимы лонгитюдные исследования.

Хотя механизмы, связывающие накопление жира в скелетных мышцах с инсулинорезистентностью и диабетом, все еще неясны, несколько исследований показали, что повышенное отложение жира в скелетных мышцах может препятствовать утилизации глюкозы за счет снижения фосфорилирования тирозина субстрата рецептора инсулина (49–51). ).Кроме того, это жировое депо может нарушать путь субстрата инсулинового рецептора / фосфатидилинозитол-3-киназы и регулируемый фактором роста путь Akt / протеинкиназы B передачи сигналов инсулина, стимулированный инсулином синтез гликогена в скелетных мышцах и транспорт глюкозы (40, 49-51) . Кроме того, региональные различия в секреции адипокинов между межмышечным и подкожным жиром могут быть еще одним возможным объяснением наблюдаемых различий в ассоциациях жировых депо с диабетом, поскольку сообщалось о различиях в функции жировой ткани в зависимости от анатомического расположения (52).Однако наше понимание механизмов, связывающих инфильтрацию жира в скелетных мышцах и диабет, а также причин, по которым некоторые люди и этнические группы накапливают больше жира в чувствительных к инсулину тканях, чем другие, все еще ограничено.

В текущем исследовании мы также обнаружили, что ходьба на прошлой неделе была связана с уменьшением межмышечной жировой ткани у кавказцев, но не у афро-карибских мужчин. Наши результаты, наблюдаемые у мужчин европеоидной расы, согласуются с другими исследованиями, показывающими усиление инфильтрации межмышечной жировой ткани при снижении физической активности в скелетных мышцах здоровых молодых людей, перенесших 4-недельное одностороннее подвешивание нижних конечностей (53).Также было показано, что физические упражнения как у людей с ожирением, так и у худых значительно улучшают способность окислять липиды в скелетных мышцах (54). Недавнее рандомизированное контролируемое исследование интервенций аэробных упражнений с участием 73 белых и афроамериканцев показало, что аэробные упражнения уменьшают межмышечную жировую ткань бедер как у мужчин, так и у женщин (55). Тем не менее, мы обнаружили значительные этнические различия в межмышечной жировой ткани и ассоциации с диабетом после адаптации к ходьбе, предполагая, что различия в уровне активности между популяциями вряд ли могут объяснить более высокий уровень межмышечной жировой ткани среди афро-карибских жителей.

Известно, что жировая ткань скелетных мышц сильно влияет на мышечную силу (56), что, в свою очередь, может влиять на подвижность. Было показано, что повышенная инфильтрация жировой ткани скелетных мышц может напрямую способствовать потере подвижности у пожилых мужчин и женщин (57). Следовательно, повышенная жировая инфильтрация скелетных мышц может также повлиять на уровень инвалидности у пожилых людей и привести к дальнейшей жировой инфильтрации скелетных мышц. Однако в нашем анализе этнические различия в жировой инфильтрации скелетных мышц не зависели от ходьбы.

Настоящее исследование имеет несколько ограничений. Во-первых, существуют вероятные различия между культурами Карибского бассейна и Америки, и будущие исследования черно-белых различий в составе скелетных мышц должны также включать другие популяции африканского происхождения. Во-вторых, конструкция поперечного сечения не позволяет установить причинную связь между инфильтрацией жировой ткани скелетных мышц и диабетом. В-третьих, уровни глюкозы натощак не были доступны в MrOS, когда проводились измерения телят с помощью pQCT.Таким образом, количество диабетиков 2 типа в MrOS, вероятно, будет несколько недооценено. Кроме того, различия в доступе к медицинскому обслуживанию между странами могли повлиять на вероятность того, что респондент сообщит о приеме противодиабетических препаратов. Наконец, в других исследованиях использовался единственный компьютерный томографический срез средней части бедра для оценки жировой инфильтрации в скелетных мышцах (10, 58, 59). Получив единственный срез икроножной мышцы, мы смогли измерить только относительно небольшое депо жировой ткани скелетных мышц по сравнению с компьютерными томографическими измерениями средней части бедра.Тем не менее, предыдущие исследования отметили относительно сильную корреляцию между инфильтрацией жировой ткани в мышцах икр и средней части бедра (29).

Таким образом, инфильтрация жировой ткани в скелетных мышцах была выше среди пожилых мужчин африканского происхождения по сравнению с мужчинами европеоидной расы, несмотря на меньшее количество жира в организме. Инфильтрация жира в скелетных мышцах также была выше среди мужчин с СД2 в обеих этнических группах, независимо от общего ожирения. Необходимы дополнительные исследования для определения факторов, способствующих этим популяционным различиям в составе скелетных мышц, и для лучшего определения метаболических и медицинских последствий увеличения жировой ткани скелетных мышц.

Благодарности

Д-р Милькович получил поддержку от Национального института диабета, болезней органов пищеварения и почек (грант K01DK083029). Исследование здоровья Тобаго и исследование остеопоротических переломов у мужчин было поддержано грантами R01AR049747, U01 AR45580, U01 AR45614, U01 AR45632, U01 AR45647, U01 AR45654, U01 AR45583, U01 AG18197 и M01 RR000334 Национального института артритов и кожных заболеваний. Болезни, Национальный институт старения и Национальный институт рака.

Краткое раскрытие информации: C.L.G. получил плату за консультацию за чтение сканированных изображений pQCT. Другим авторам нечего раскрывать.

Сокращения

• ИМТ

• CSA

• DXA

  Двухэнергетическая рентгеновская абсорбциометрия

• IMAT

  межмышечная жировая ткань CSA

• 64

  64

  периферийная компьютерная томография

• TAT

• T2D

Ссылки

1

Flegal

KM

,

Carroll

MD

,

Ogden

CL

,

Johnson

CL

2002

Распространенность и тенденции ожирения среди взрослых в США, 1999–2000 гг.

JAMA

288

:

1723

—

1727

2

Бранкати

FL

,

Kao

WH

,

Folsom

AR

,

Watson

RL

k

2000

Инцидент сахарного диабета 2 типа у афроамериканцев и белых взрослых: исследование риска атеросклероза в сообществах.

JAMA

283

:

2253

—

2259

3

Després

JP

,

Couillard

C

,

Gagnon

J

,

Bergeron

J

J

,

Rao

DC

,

Skinner

JS

,

Wilmore

JH

,

Bouchard

C

2000

Раса, висцеральная жировая ткань, липиды плазмы и липопротеиновая липазная активность у мужчин женщины: семейное исследование «Здоровье, факторы риска, физические упражнения и генетика» (НАСЛЕДИЕ).

Артериосклер Тромб Vasc Biol

20

:

1932

—

1938

4

Лавджой

JC

,

Бретонский

JA

,

Клемперер

M

,

Клемперер

M

,

1996

Распределение брюшного жира и метаболические факторы риска: влияние расы.

Метаболизм

45

:

1119

—

1124

5

Паланиаппан

LP

,

Карнетон

MR

,

Fortmann

SP

2002

Гетерогенность отношения , и инсулин натощак.

Уход за диабетом

25

:

1351

—

1357

6

Райан

AS

,

Никлас

BJ

,

Берман

DM

2002

Расовые различия в инсулинорезистентности -отложение жира на бедрах у женщин в постменопаузе.

Obes Res

10

:

336

—

344

7

Yim

JE

,

Heshka

S

,

Albu

J

,

Heymsfield

S

P

,

Harris

T

,

Gallagher

D

2007

Межмышечная жировая ткань конкурирует с висцеральной жировой тканью в независимых ассоциациях с риском сердечно-сосудистых заболеваний.

Int J Obes (Lond)

31

:

1400

–

1405

8

Goodpaster

BH

,

Krishnaswami

S

,

Resnick

H

,1

Kelley

Haggerty

C

,

Harris

TB

,

Schwartz

AV

,

Kritchevsky

S

,

Newman

AB

2003

Связь между региональным распределением жировой ткани и обоими типами диабета и нарушение толерантности к глюкозе у пожилых мужчин и женщин.

Уход за диабетом

26

:

372

—

379

9

Милькович-Гачич

I

,

Гордон

CL

,

Гудпастер

BH

,

Патрик

,

Бункер

AL

,

Kuller

LH

,

Wheeler

VW

,

Evans

RW

,

Zmuda

JM

2008

Инфильтрация жировой ткани в скелетных мышцах и ассоциация с диабетом: возрастные особенности среди мужчин африканского происхождения.

Am J Clin Nutr

87

:

1590

—

1595

10

Goodpaster

BH

,

Krishnaswami

S

,

Harris

TB

,

Katsiaras

,

Katsiaras

,

SB

,

Simonsick

EM

,

Nevitt

M

,

Holvoet

P

,

Newman

AB

2005

Ожирение, региональное распределение жира в теле и метаболический синдром у пожилых мужчина и женщина.

Arch Intern Med

165

:

777

—

783

11

Gallagher

D

,

Kuznia

P

,

Heshka

S

,

Hehka

J

,

Albu

J

SB

,

Goodpaster

B

,

Visser

M

,

Harris

TB

2005

Жировая ткань в мышцах: новое депо, аналогичное по размеру висцеральной жировой ткани.

Am J Clin Nutr

81

:

903

—

910

12

Albu

JB

,

Kovera

AJ

,

Allen

L

,

Wainwright

,

M

E

,

Raja-Khan

N

,

Janumala

I

,

Burkey

B

,

Heshka

S

,

Gallagher

D

2005

Независимая ассоциация инсулинов

резистентность с большим количеством межмышечной жировой ткани и более острая реакция инсулина на глюкозу у афроамериканцев, чем у белых женщин, не страдающих диабетом.

Am J Clin Nutr

82

:

1210

—

1217

13

Бункер

CH

,

Патрик

AL

,

Konety

BR

,

Dhir

Brufsky,

AM

,

Vivas

CA

,

Becich

MJ

,

Trump

DL

,

Kuller

LH

2002

Высокая распространенность рака простаты, выявленного при скрининге, среди афро-карибских жителей Обследование рака простаты на Тобаго.

Биомаркеры эпидемиологии рака Предыдущая

11

:

726

—

729

14

Милькович-Гачич

I

,

Феррелл

RE

,

Патрик

AL

,

Патрик

AL

,

Бункер

CH

2005

Оценки африканского, европейского и индейского происхождения афро-карибских мужчин на острове Тобаго.

Hum Hered

60

:

129

—

133

15

Райнер

AP

,

Ziv

E

,

Lind

DL

,

Nievergelt

CM

,

Nievergelt

CM

,

NJ

,

Cummings

SR

,

Phong

A

,

Burchard

EG

,

Harris

TB

,

Psaty

BM

,

Kwok

PY

Население структура, примеси и фенотипы, связанные со старением у взрослых афроамериканцев: исследование здоровья сердечно-сосудистой системы.

Am J Hum Genet

76

:

463

—

477

16

Parra

EJ

,

Marcini

A

,

Akey

J

,

Martinson

Batzer

MA

,

Cooper

R

,

Forrester

T

,

Allison

DB

,

Deka

R

,

Ferrell

RE

,

Shriver

MD

Оценка пропорций примесей афроамериканцев с использованием популяционных аллелей.

Am J Hum Genet

63

:

1839

—

1851

17

Парра

EJ

,

Киттлс

RA

,

Argyropoulos

G

,

Pfaff11

CL

K

,

Bonilla

C

,

Sylvester

N

,

Parrish-Gause

D

,

Garvey

WT

,

Jin

L

,

McKeigue

,

McKeigue

Kamboh

MI

,

Ferrell

RE

,

Pollitzer

WS

,

Shriver

MD

2001

Пропорции предков и динамика примесей у географически определенных афроамериканцев, проживающих в Южной Каролине.

Am J Phys Anthropol

114

:

18

—

29

18

Orwoll

E

,

Бланк

JB

,

Barrett-Connor

E

,

Cauley

J

Cummings

S

,

Ensrud

K

,

Lewis

C

,

Cawthon

PM

,

Marcus

R

,

Marshall

LM000

,1414 McGowan Phipps

K

,

Sherman

S

,

Stefanick

ML

,

Stone

K

2005

Исследование дизайна и исходных характеристик остеопоротических переломов у мужчин (MrOS) — крупное обсервационное исследование детерминант перелома у пожилых мужчин.

Contemp Clin Trials

26

:

569

—

585

19

Blank

JB

,

Cawthon

PM

,

Carrion-Petersen

ML

,

Harper

Harper

Johnson

JP

,

Mitson

E

,

Delay

RR

2005

Обзор набора пациентов для лечения остеопоротических переломов у мужчин (MrOS).

Клинические испытания Contemp

26

:

557

—

568

20

Simonsick

EM

,

Maffeo

CE

,

Rogers

SK

,

Skinner

EA Davis

D

,

Guralnik

JM

,

Fried

LP

1997

Методология и возможность проведения домашнего обследования пожилых женщин-инвалидов: исследование женского здоровья и старения

.

J Gerontol A Biol Sci Med Sci

52

:

M264

—

M274

21

1997 Отчет Экспертного комитета по диагностике и классификации сахарного диабета.

Уход за диабетом

20

:

1183

—

1197

22

Amoah

AG

,

Овусу

SK

,

Adjei

S

2002

Диабетическое сообщество в Гане исследование распространенности в Большой Аккре.

Diabetes Res Clin Pract

56

:

197

—

205

23

Motala

AA

,

Omar

MA

,

Pirie

FJ

2003

Диабет в Африке. Эпидемиология диабета 1 и 2 типа в Африке.

J Кардиовасковый риск

10

:

77

—

83

24

Sobngwi

E

,

Mauvais-Jarvis

F

,

Vexiau

P

11,

Mbanya Готье

JF

2001

Диабет у африканцев.Часть 1: эпидемиология и клиническая специфика.

Diabetes Metab

27

:

628

—

634

25

Хеннис

A

,

Wu

SY

,

Nemesure

B

,

Li

X

,

Leske

,

Leske MC

2002

Диабет у населения Карибского бассейна: эпидемиологический профиль и последствия.

Int J Epidemiol

31

:

234

—

239

26

Шай

I

,

Jiang

R

,

Manson

JE

,

Stampfer

MJ

MJ

MJ

WC

,

Colditz

GA

,

Hu

FB

2006

Этническая принадлежность, ожирение и риск диабета 2 типа у женщин: последующее 20-летнее исследование.

Уход за диабетом

29

:

1585

—

1590

27

Харрис

MI

,

Flegal

KM

,

Cowie

CC

,

Eberhardt

0

MS Golds

,

Eberhardt

0

MS

,

MS Golds DE

,

Little

RR

,

Wiedmeyer

HM

,

Byrd-Holt

DD

1998

Распространенность диабета, нарушение глюкозы натощак и нарушение толерантности к глюкозе в США.С. взрослые. Третье национальное обследование здоровья и питания, 1988–1994 гг.

Уход за диабетом

21

:

518

—

524

28

Синьорелло

LB

,

Schlundt

DG

,

Cohen

SS

,

Steinwandel

Steinwandel

Steinwandel

MS

,

McLaughlin

JK

,

Hargreaves

MK

,

Blot

WJ

2007

Сравнение распространенности диабета между афроамериканцами и белыми с аналогичным социально-экономическим статусом.

Am J Public Health

97

:

2260

—

2267

29

Larson-Meyer

DE

,

Smith

SR

,

Heilbronn

LK

,

Kelley

,

Kelley

Равуссин

E

,

Новичок

BR

2006

Триглицерид, связанный с мышцами, измеренный с помощью компьютерной томографии и магнитно-резонансной спектроскопии.

Ожирение (Silver Spring)

14

:

73

—

87

30

Shaffer

JR

,

Kammerer

CM

,

Reich

D

,

McDonald

G

G Паттерсон

N

,

Goodpaster

B

,

Bauer

DC

,

Li

J

,

Newman

AB

,

Cauley

JA

,

Harris

TB

,

TB

F

,

Ferrell

RE

,

Zmuda

JM

2007

Генетические маркеры происхождения коррелируют с особенностями состава тела у пожилых афроамериканцев.

Osteoporos Int

18

:

733

—

741

31

Фернандес

JR

,

Шрайвер

MD

,

Бисли

TM

,

Rafla11

E

,

Albu

J

,

Nicklas

B

,

Ryan

AS

,

McKeigue

PM

,

Hoggart

CL

,

WeinsierL

DB

2003

Связь африканской генетической примеси с уровнем метаболизма в покое и ожирением среди женщин.

Obes Res

11

:

904

—

911

32

Hickner

RC

,

Privette

J

,

McIver

K

,

Barakat

Окисление жирных кислот у афроамериканок и женщин европеоидной расы во время физической активности.

J Appl Physiol

90

:

2319

—

2324

33

Barakat

H

,

Hickner

RC

,

Privette

J

,

Haver

J

E

,

Udupi

V

,

Зеленый

A

,

Pories

W

,

MacDonald

K

2002

Различия в липолитической функции препаратов жировой ткани у чернокожих американцев и европеоидов женщины.

Метаболизм

51

:

1514

—

1518

34

Бауэр

JF

,

Дэвис

JM

,

Hao

E

,

2006 Difference

4

4

HA в транспорте жирных кислот и экспрессии белков, транспортирующих жирные кислоты, в жировой ткани черных и белых женщин с ожирением

.

Am J Physiol Endocrinol Metab

290

:

E87

—

E91

35

Ama

PF

,

Simoneau

JA

,

Boulay

MR

Thé

O Serresse

G

,

Bouchard

C

1986

Характеристики скелетных мышц у сидячих чернокожих мужчин и мужчин европеоидной расы.

J Appl Physiol

61

:

1758

—

1761

36

Simoneau

JA

,

Kelley

DE

1997

Изменение гликолитической и окислительной способности инсулинорезистентных мышц способствует устойчивости к инсулину NIDDM.

J Appl Physiol

83

:

166

—

171

37

Kelley

DE

,

Goodpaster

BH

2001

Триглицерид скелетных мышц.Аспект регионарного ожирения и инсулинорезистентности.

Уход за диабетом

24

:

933

—

941

38

Ким

JY

,

Hickner

RC

,

Cortright

RL

,

Dohm

14 GL

m, JA

2000

Окисление липидов снижено в скелетных мышцах человека с ожирением

.

Am J Physiol Endocrinol Metab

279

:

E1039

—

E1044

39

Bonen

A

,

Parolin

ML

,

Steinberg

GR

,

,

Calles-Escandon

Calles-Escandon

Tandon

NN

,

Glatz

JF

,

Luiken

JJ

,

Heigenhauser

GJ

,

Dyck

DJ

2004

Триацилгликозный диабет связан с диабетом 2 типа с повышенной скоростью транспорта жирных кислот в скелетных мышцах и увеличением сарколеммы FAT / CD36.

FASEB J

18

:

1144

—

1146

40

Morino

K

,

Petersen

KF

,

Shulman

GI

2006

Молекулярные механизмы инсулинорезистентности человека и их потенциальные связи с митохондриальной дисфункцией

.

Диабет

55

(

Suppl 2

):

S9

—

S15

41

Simoneau

JA

,

Veerkamp

JH

,

Turcotte

LP

,1

K

1999

Маркеры способности использовать жирные кислоты в скелетных мышцах человека: связь с инсулинорезистентностью и ожирением, а также последствия потери веса.

FASEB J

13

:

2051

–

2060

42

Iossa

S

,

Mollica

MP

,

Lionetti

L

,

Crescenzo

M

,

Liverini

G

2002

Окислительная способность скелетных мышц у крыс, получавших диету с высоким содержанием жиров.

Int J Obes Relat Metab Disord

26

:

65

—

72

43

Laurent

D

,

Didier

L

,

Yerby

B

,

Yerby

,

Deacon

R

,

Gao

J

2007

Модуляция митохондриальной активности в мышцах крысы, индуцированная диетой

.

Am J Physiol Endocrinol Metab

293

:

E1169

—

E1177

44 ​​

Vogt

M

,

Puntschart

A

,

Howald

H

,

Mueller

,

Mueller

C

,

Gfeller-Thencher

L

,

Mullis

P

,

Hoppeler

H

2003

Влияние диетического жира на мышечные субстраты, метаболизм и производительность спортсменов.

Med Sci Sports Exerc

35

:

952

—

960

45

Cameron-Smith

D

,

Burke

LM

,

Angus

DJ

,

Tunstall

RJ

Cox

GR

,

Bonen

A

,

Hawley

JA

,

Hargreaves

M

2003

Кратковременная диета с высоким содержанием жиров регулирует метаболизм липидов и экспрессию генов в скелетная мышца человека.

Am J Clin Nutr

77

:

313

—

318

46

Искры

LM

,

Xie

H

,

Koza

RA

,

Mynatt

R

MW

,

Bray

GA

,

Smith

SR

2005

Диета с высоким содержанием жиров координированно подавляет гены, необходимые для окислительного фосфорилирования митохондрий в скелетных мышцах.

Диабет

54

:

1926

—

1933

47

Goodpaster

BH

,

Thaete

FL

,

Simoneau

JA

,

Келли

DE

абдоминальный жир и состав мышц бедра позволяют прогнозировать чувствительность к инсулину независимо от висцерального жира.

Диабет

46

:

1579

—

1585

48

der

Merwe

MT

,

Panz

VR

,

Crowther

NJ

,

Schlaphoff

GP

,

Schlaphoff

GP

IP

,

Froguel

P

,

Joffe

BI

,

Lönnroth

PN

1999

Свободные жирные кислоты и уровни инсулина — взаимосвязь с уровнями лептина и составом тела у различных групп пациентов из Южной Африки.

Int J Obes Relat Metab Disord

23

:

909

—

917

49

Hulver

MW

,

Dohm

GL

2004

Молекулярный механизм, связывающий накопление мышечного жира с инсулинорезистентностью .

Proc Nutr Soc

63

:

375

—

380

50

Петерсен

KF

,

Шульман

GI

2006

Этиология инсулинорезистентности

.

Am J Med

119

:

S10

—

S16

51

Шульман

GI

2004

Раскрытие клеточного механизма инсулинорезистентности у людей: новые открытия из магнитно-резонансной спектроскопии.

Physiology (Bethesda)

19

:

183

—

190

52

ван

Harmelen

V

,

Dicker

A

,

Rydén

M

,

Huner

,

004 Hauner

Lönnqvist

F

,

Näslund

E

,

Arner

P

2002

Повышенный липолиз и снижение продукции лептина сальником человека по сравнению с подкожными преадипоцитами.

Диабет

51

:

2029

—

2036

53

Манини

TM

,

Clark

BC

,

Nalls

MA

,

Goodpaster

BH 900outz,

LL

,

Harris

TB

2007

Снижение физической активности увеличивает межмышечную жировую ткань у здоровых молодых людей.

Am J Clin Nutr

85

:

377

—

384

54

Berggren

JR

,

Boyle

KE

,

Chapman

WH

,

Houmard4

Houmard4

Окисление липидов скелетных мышц и ожирение: влияние потери веса и физических упражнений

.

Am J Physiol Endocrinol Metab

294

:

E726

—

E732

55

Durheim

MT

,

Slentz

CA

,

Bateman Krantz

LA

,

Mabe

,

Mabe

WE

2008

Взаимосвязь между уменьшением межмышечной жировой ткани бедра, вызванным физической нагрузкой, изменениями размера липопротеиновых частиц и висцеральным ожирением

.

Am J Physiol Endocrinol Metab

295

:

E407

—

E412

56

Goodpaster

BH

,

Carlson

CL

,

Visser

Minger

,

Kelley

A

,

Harris

TB

,

Stamm

E

,

Newman

AB

2001

Ослабление скелетных мышц и силы у пожилых людей: исследование ABC Health

.

J Appl Physiol

90

:

2157

—

2165

57

Visser

M

,

Goodpaster

BH

,

Kritchevsky

SB

,

Newman

AB

AB

M

,

Rubin

SM

,

Simonsick

EM

,

Harris

TB

2005

Мышечная масса, мышечная сила и инфильтрация мышечного жира как предикторы случайных ограничений подвижности у хорошо функционирующих пожилых людей .

J Gerontol A Biol Sci Med Sci

60

:

324

—

333

58

Goodpaster

BH

,

Kelley

DE

,

Thaete

FL

,

He

,

Ross

R

2000

Ослабление скелетных мышц, определенное компьютерной томографией, связано с содержанием липидов в скелетных мышцах.

J Appl Physiol

89

:

104

—

110

59

Ryan

AS

,

Nicklas

BJ

1999

Возрастные изменения отложения жира в мышцах средней части бедра в женщины: взаимосвязь с метаболическими факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний.

Int J Obes Relat Metab Disord

23

:

126

—

132

Авторские права © 2009 Эндокринологическое общество

JCI — Тканевая инфильтрация при синдроме лимфоцитоза CD8, связанном с инфекцией вируса иммунодефицита человека-1, имеет фенотипический вид антигенно-обусловленного ответа.

ВИЧ-1-инфекция может инициировать HLA-ассоциированный ответ, называемый синдромом диффузного инфильтративного лимфоцитоза, характеризующийся повышенным количеством циркулирующих CD8 Т-клеток, которые инфильтрируют слюнные железы, легкие, желудочно-кишечный тракт и почки.Поскольку этот ответ может быть либо антигенным процессом, индуцированным ВИЧ-1, либо лимфопролиферацией клеток с неопластическими или необычными характеристиками, мы стремились определить фенотип клеточных популяций, природу тканевых нарушений и локализацию вируса в тканях. синдром диффузного инфильтративного лимфоцитоза. Циркулирующие Т-клетки CD8 были значительно увеличены, в то время как количество Т-лимфоцитов CD4 оставалось в диапазоне, обнаруженном у бессимптомных серопозитивных людей. Большинство CD8 и CD4 Т-клеток как в крови, так и в тканях обладали фенотипом памяти экспрессии CD29 + (бета 1 интегрин) и CD11a + / CD18 (бета 2 интегрин), но не имели маркеров недавней активации.Часть циркулирующих CD8 Т-клеток также экспрессировала CD57 (Leu 7), но не другие маркеры естественных клеток-киллеров. Белки, кодируемые ВИЧ, были идентифицированы в тканевых макрофагах, расположенных в периацинарных областях слюнных желез. CD54 (молекула межклеточной адгезии-1), лиганд для интегрина CD11a, сильно экспрессировался на эндотелии посткапиллярной венулы в лимфоидных очагах, а молекулы HLA-DR были обнаружены на ограниченных участках эпителия протоков, прилегающих к лимфоидным агрегатам. Эти результаты предполагают, что (а) инфильтрация висцеральных лимфоцитов при синдроме диффузного инфильтративного лимфоцитоза является управляемым антигеном и определяемым MHC иммунным ответом хозяина на элемент, связанный с инфекцией ВИЧ-1, и (b) взаимодействие специфических адгезивных молекул опосредование притока клеток, а также последующее повреждение тканей отражают измененные паттерны экспрессии генов в тканях, подвергающихся иммунному ответу.

No related posts.