Коронавирус COVID-19 — Частный Доктор
В Клинике Частный доктор можно сдать анализы на COVID-19.
- Мазок из ротоглотки (зева) на COVID-19 методом ПЦР.
- Анализ крови на антитела, полуколичественный метод (производитель Евроиммун, Германия).
- Анализ крови на антитела, качественный метод (производитель Китай).
- Мазок из ротоглотки (зева) на COVID-19 методом ПЦР.
Характеристики метода:
- Тест система Amplisent. Степень чувствительности 10*3. Это означает, что при концентрации вируса 10*3 анализ будет положительным. Чтобы было понятно, чувствительность 10*3 отличается от чувствительности 10*4 в 10 раз, т.е. чувствительность 10*3 в 10 раз выше, чем чувствительность 10*4. На данный момент в мире нет более чувствительного метода, чем 10*3.
- Достоверность 99%.
- При сомнительном и положительном результате делается три перестановки (проводится три проверочных теста).
- Положительные результаты не требуют подтверждения в других лабораториях.
- Срок выполнения анализа 2-3 дня.
- Анализ проводится натощак (нельзя пить и принимать пищу за 4 часа до исследования).
- Анализ крови на антитела.
- Исследование на антитела к коронавирусу SARS-CoV-2 (антитела к возбудителю COVID-2019)
Антитела IgA к коронавирусу SARS-CoV-2
Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2
Характеристики метода. Метод: ИФА.
Производитель: «ЕВРОИММУН АГ», Германия.
Результаты исследований выдаются в значении КП (коэффициент позитивности), формат полуколичественный.
Срок выполнения исследования – 3 дня.
Материал для исследования – венозная
кровь. Можно сдать в течение дня, не ранее чем через 3 часа после необильного
приема пищи.
Клинико- лабораторная интерпретация результатов исследования
Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2
КП менее 0,8 — отрицательный результат
КП в интервале от 0,8 до 1,1 — пограничный результат
КП более 1,1 — положительный результат
Отрицательный результат: антитела класса IgG не выявлены. Это может быть в двух случаях:
1. Пациент не встречался с инфекционным агентом.
2. В случае острого заболевания или бессимптомного течения, в фазе иммунологического ответа, когда еще нет выработки антител класса IgG (первые 3-5 недель от контакта с возбудителем). При подозрении на возможную инфекцию целесообразно сдать мазок на выявление вируса и проверить наличие антител класса IgA.
Пограничный
результат: наиболее
вероятно, антитела класса IgG присутствуют в незначительном количестве, в этом случае
необходимо повторить исследование уровня антител через 10-14 дней.
- Начало инфекционного процесса, в этом случае могут быть обнаружены также антитела класса IgA или IgM и выявлен сам вирус методом ПЦР.
- Неспецифическая реакция компонентов крови пациента с тест- системой. В случае неспецифической реакции при повторном взятии крови через 2 недели антитела класса G не будут выявлены.
Положительный результат: антитела класса IgG обнаружены. Это возможно в двух случаях:
- При отсутствии антител класса IgA или IgM, а также отрицательном результате ПЦР мазка, обнаружение только антител класса IgG считается признаком перенесенного ранее заболевания.
- В случае сочетания с обнаружением антител класса IgA или IgM, может быть признаком текущей в настоящее время инфекции.
Клинико- лабораторная интерпретация результатов исследования
Антитела IgA к коронавирусу SARS-CoV-2
КП менее 0,8 — отрицательный результат
КП в интервале от 0,8 до 1,1 — пограничный результат
КП более 1,1 — положительный результат
Отрицательный результат: антитела класса IgA не выявлены.
Это может быть в двух случаях:
1. Пациент не встречался с инфекционным агентом.
2. В случае острого заболевания или бессимптомного течения, в фазе иммунологического ответа, когда нет выработки антител класса IgА. При подозрении на наличие инфекции целесообразно сдать мазок на выявление вируса методом ПЦР.
Пограничный результат: наиболее вероятно, антитела класса IgА присутствуют в незначительном количестве, в этом случае необходимо повторить исследование уровня антител через 10-14 дней. При клинических показаниях целесообразно проверить уровень антител класса IgG, сдать мазок на выявление вируса методом ПЦР.
Положительный результат: антитела класса IgA обнаружены, что является признаком текущей инфекции. Также при текущей инфекции возможно одновременное выявление антител класса IgA и антител класса IgG.
Анализ крови на антитела.Исследование на антитела к коронавирусу SARS-CoV-2 (антитела к возбудителю COVID-2019) Антитела IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2, ИХГА Метод: иммунохроматографический.![]() IgM – ОБНАРУЖЕНО; IgG – не обнаружено Выявление только антител класса IgM может быть как признаком начала заболевания, так и признаком неспецифической реакции иммунитета в связи с другими острыми или хроническими заболеваниями. При выявлении антител класса IgM целесообразно сдать мазок на выявление вируса методом ПЦР. В случае отсутствия каких-либо симптомов и отрицательного теста на наличие вируса (ПЦР) рекомендован повторный тест на антитела через 3-4 недели для оценки динамики иммунного ответа. IgM – ОБНАРУЖЕНО; IgG – ОБНАРУЖЕНО Выявление антител обоих классов — и IgG, и IgM, свидетельствует о текущей инфекции. Целесообразно дополнительно сдать мазок на выявление вируса методом ПЦР. IgM – не обнаружено; IgG – ОБНАРУЖЕНО |
Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 (COVID- 19) в крови
Коронавирусная инфекция COVID-19 (CoronaVirusDisease 2019) – острое респираторное заболевание, вызываемое новым коронавирусом SARS-CoV-2, который был выявлен в декабре 2019 года в городе Ухане провинции Хубэй центрального Китая.
В настоящее время доказана передача вируса SARS-CoV-2 от человека к человеку, преимущественно воздушно-капельным и контактным путями. Ведущим путем передачи SARS-CoV-2 является воздушно-капельный, который реализуется при кашле, чихании и близком общении инфицированного с окружающими.
COVID-19 может протекать как в бессимптомной и легкой клинических формах, так и в тяжелой с развитием внебольничной пневмонии, острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС) и дыхательной недостаточности. Осложнённое течение заболевания, как правило, происходит среди людей, которые находятся в группе повышенного риска. Это пожилые люди, беременные женщины, лица с сопутствующими патологическими состояниями, такими как сердечно-сосудистые заболевания, хронические респираторные заболевания, диабет и рак. Встречается и бессимптомное носительство вируса, носителями чаще всего становятся дети и молодые взрослые. Они могут передавать вирус другим людям при близком контакте, однако у них самих не развиваются симптомы заболевания.
Инкубационный период COVID-19 составляет от 2 до 14 дней, наиболее часто – 5-7 дней. Самыми распространенными клиническими симптомами инфекции являются высокая температура тела (выше 38°С), кашель (сухой или с небольшим количеством мокроты), одышка, боль в мышцах, утомляемость. Среди других симптомов отмечают насморк, потерю обоняния, головную боль, заложенность грудной клетки, диарею, тошноту и рвоту.
Инфекционный процесс сопровождается выработкой антител двух типов: IgM и IgG.
Антитела класса IgМ к SARS-CoV-2 появляются в крови приблизительно через 5-7 дней от начала клинических симптомов и достигают максимуму ко 2-3 неделе заболевания. В дальнейшем их концентрация в крови постепенно снижается.
Антитела класса IgG начинают вырабатываться через 10-14 дней от начала заболевания, достигая максимальной концентрации через месяц. Антитела класса IgG сохраняются в организме длительное время, обеспечивая специфический иммунный ответ к новой коронавирусной инфекции COVID-19. Однако, данные о том, насколько долго будет сохраняться иммунитет в отношении SARS-CoV-2, в настоящее время отсутствуют.
Динамика молекулярных и серологических маркеров SARS-CoV-2
Анализ крови на антитела IgG к вирусу SARS-CoV-2 – исследование, которое помогает проверить в крови наличие антител IgG к возбудителю новой коронавирусной инфекции COVID-19 и определить их количество.
Анализ проводится по тест-системе «SARS-CoV-2-IgG-ИФА-БЕСТ». Тест предназначен для выявления антител класса IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 в сыворотке или плазме крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа с возможностью определения титра антител (коэффициента позитивности) IgG в выявленных положительных образцах.
Принцип метода:
Метод определения основан на двухстадийном «непрямом» варианте твердофазного иммуноферментного анализа. На первой стадии анализа, содержащиеся в исследуемых образцах специфические антитела (в том числе IgG) связываются с иммобилизованным на поверхности лунок планшета рекомбинантным антигеном SARS-CoV-2. На второй стадии конъюгат моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой хрена взаимодействует с комплексами «антиген-IgG». При инкубации с раствором тетраметилбензидина происходит окрашивание раствора в лунках, содержащих образовавшиеся комплексы «антиген-IgG-конъюгат». Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации IgG к SARS-CoV-2 в анализируемом образце. После остановки реакции добавлением стоп-реагента результаты анализа регистрируются измерением оптической плотности в лунках планшета.
Интерпретация результатов
Референтный интервал | Интерпретация результата |
Результат исследования на IgG и IgM к SARS-CoV-2 выражается полуколичественно с указанием коэффициента позитивности — КП: Коэффициент позитивности (КП) — это отношение оптической плотности пробы пациента к пороговому значению. КП является универсальным показателем, применяемым в иммуноферментных тестах с полуколичественной оценкой результатов. КП характеризует степень позитивности исследуемой пробы и может быть полезен врачу для правильной интерпретации полученного результата, для динамического наблюдения за пациентами, в том числе контроля эффективности лечения. | Точный диагноз устанавливается врачом на основании клинического обследования, эпидемиологического анамнеза, результатов инструментальных и лабораторных исследований. Антитела класса IgG к SARS-CoV-2 |
Показания к назначению данного исследования:
1. Диагностика текущей инфекции COVID-19, в том числе бессимптомного течения заболевания;
2. Диагностика COVID-19 в поздней стадии инфекционного процесса, в том числе бессимптомного течения заболевания;
3. Дифференциальная диагностика заболеваний, клинически схожих с течением коронавирусной инфекции COVID-19;
4. Дополнительная диагностика COVID-19 в совокупности с методом ПЦР;
5. Оценка иммунного статуса в отношении SARS-CoV-2.
Подготовка
Рекомендуется сдавать натощак или не ранее, чем через 2-4 часа после приема пищи.
Тестирование на антитела к COVID-19 (IgM (S и N) и IgG)
Перейти к содержимомуЭти тесты предназначены для выявления антител (IgM и IgG), которые наша иммунная система вырабатывает против вируса SARS-CoV-2, вызывающего болезнь COVID-19. Они выполняются на образцах крови, собранных путем венепункции. Тесты на антитела IgM (против шиповидного белка или белка нуклеокапсида (N)) и тесты на антитела IgG можно заказать вместе или по отдельности.
Есть ли у вас нейтрализующие антитела к COVID-19?
Тест на антитела IgM – Серологический анализ на противовирусный иммуноглобулин-M (IgM) против шиповидного белка SARS-CoV-2 и тесты на белок нуклеокапсида (N)M (IgM) против COVID-19
Точно и надежно
Противовирусный иммуноглобулин-M (IgM) Против COVID-19 Тестирование Первыми антителами, вырабатываемыми иммунной системой во время вирусной инфекции, являются IgM. Положительный тест на антитела IgM указывает на то, что вирус может присутствовать и что ваш организм начал иммунный ответ. При обнаружении IgM вы можете быть инфицированы в настоящее время или недавно выздоровели от инфекции COVID-19. Наш анализ на антитела к противовирусному иммуноглобулину-М (IgM) может точно выявить «острую» инфекцию, анализируя иммунный ответ человека.
Когда проверять наличие IgM?
Как правило, появление симптомов начинается примерно на пятый день, и организм начинает вырабатывать антитела IgM примерно через 8 дней после заражения (по сравнению с антителами IgG, которые вырабатываются примерно через 14 дней после заражения).
Отрицательные результаты теста IgM не исключают инфицирования SARS-CoV-2, особенно для лиц, которые были в контакте с кем-то, у кого недавно был положительный результат теста на COVID-19. Последующее тестирование с молекулярной диагностикой (тест ОТ-ПЦР) следует рассматривать для окончательного исключения инфекции .
Для никогда не вакцинированных лиц:
Положительный результат теста на антитела против N, S или RBD указывает на предшествующую естественную инфекцию.
Для вакцинированных лиц:
Положительный результат теста на антитела к целевому антигену вакцины, такому как белок S, и отрицательный результат на другие антигены предполагает, что они выработали индуцированные вакциной антитела и что они никогда не были инфицированы SARS-CoV-2 .
Положительный результат теста на любое антитело, кроме антитела, индуцированного вакциной, такого как белок N, указывает на разрешение или разрешение инфекции SARS-CoV-2, которая могла возникнуть до или после вакцинации.
IgG Antibody Test – Serology-Based Assay for Antiviral Immunoglobulin-G (IgG) Against COVID-19 Serology-Based Assay for Antiviral Immunoglobulin-G (IgG) Against COVID-19Точный и надежный
Противовирусный иммуноглобулин-G (IgG) Против COVID-19 Тестирование Анализ на антитела к противовирусному иммуноглобулину-G (IgG) очень важен для определения того, кто уже был инфицирован и теперь может иметь иммунитет к COVID -19. Серологическое тестирование на SARS-CoV-2 пользуется повышенным спросом, чтобы лучше понять количество положительных случаев COVID-19, в том числе для тех, кто может быть бессимптомным или уже выздоровел.
Для чего нужны серологические тесты:
- Для оказания помощи в принятии решения о том, могут ли люди вернуться к работе.
- Чтобы определить, кто может претендовать на вакцинацию.
- Для выявления лиц, которые выздоровели, чтобы узнать, могут ли они стать донорами плазмы для лечения людей с тяжелыми формами COVID-19.
Идентификация целевых антител
Это важно для нацеливания Право , чтобы идентифицировать иммун-ответ против COVID-19:
- 899. Анализ CoV-2 IgG предназначен для нацеливания на антитела против шиповидного белка коронавируса, которые могут обеспечить иммунитет. Чтобы определить иммунный ответ против коронавируса SARS-CoV-2, важно нацелиться на ПРАВИЛЬНЫЕ антитела.
- Лабораторные исследования показывают, что анализ IgG SARS-CoV-2 выявляет антитела к рецептор-связывающему домену шиповидного белка, который важен для обеспечения иммунитета путем нейтрализации, а это означает, что эти белки являются эффективным способом измерения функции вашей иммунной системы, когда по сравнению с антителами против других вирусных белков SARS-CoV-2.
- .
Все тесты проводятся в Ayass BioScience, LLC. Ayass BioScience, LLC (DBA Ayass Laboratory, LLC) является сертифицированной лабораторией CLIA. Если у вас есть какие-либо вопросы о компании Ayass BioScience, LLC COVID-19Тестирование Позвоните на нашу горячую линию по телефону 469-415-1600 или заполните контактную форму внизу этой страницы. Мы ответим на любой ваш вопрос.
Область скользящей панели переключения
Тестирование на COVID-19. Центр сквозного тестирования на COVID-19. Тестирование на антитела к COVID-19.
Ayass BioScience, LLC
Ссылка для загрузки страницы Перейти к началуКлиническое значение теста IgM и IgG для диагностики подозрения на COVID-19 с высокой вероятностью
Введение
COVID-19 был назван Всемирной организацией здравоохранения 12 января 2020 г. , Коронавирусы — это большое семейство вирусов, вызывающих простуду и более серьезные заболевания (1). COVID-19вызывается новым штаммом коронавируса, ранее не встречавшимся у людей. Общие признаки инфекции включают респираторные симптомы, лихорадку, одышку и одышку. В тяжелых случаях инфекция может вызвать пневмонию, острый респираторный синдром, почечную недостаточность и даже смерть. В настоящее время не существует специфического лечения COVID-19 (2). Однако со многими симптомами можно справиться, и их необходимо лечить в соответствии с клинической ситуацией каждого пациента. Основные пути передачи COVID-19являются воздушно-капельным и контактным путем. Аэрозольный и фекально-оральный пути передачи требуют дальнейшего уточнения. Эпидемиологические исследования показали, что случаи заболевания можно проследить до тесного контакта с лицами с подтвержденной инфекцией (3, 4).
В соответствии с шестой редакцией диагностических критериев случаи COVID-19 делятся на две категории: подозрительные случаи и подтвержденные случаи. По состоянию на полночь 28 февраля 2021 г. в Китае было зарегистрировано 89 912 подтвержденных случаев заболевания; 85 066 случаев были вылечены, 4 636 человек умерли. COVID-19продемонстрировала внезапную вспышку во всем мире (5). Своевременная и точная диагностика имеет решающее значение для выявления и лечения пациента. Однако в клинической практике стандарты обнаружения изменились в связи с быстрым ростом осведомленности о COVID-19. Обнаружение нуклеиновых кислот, КТ органов грудной клетки, эпидемиологический анамнез и клинические проявления признаются диагностической основой (6, 7). Однако обнаружение нуклеиновых кислот имеет ограничения, связанные с ошибками оператора, временными затратами и склонностью к загрязнению. Специфичность результатов КТ также ограничена. Обнаружение антител IgM/IgG имеет то преимущество, что оно простое и легкое в выполнении, а также обладает высокой чувствительностью.
В нашем исследовании мы стремились предоставить быстрый, простой и точный метод диагностики путем оценки клинической значимости IgM и IgG для диагностики случаев с подозрением на COVID-19.
Материалы и методы
Всего наблюдалось 63 пациента с подозрением на COVID-19, 57 из которых были окончательно включены в исследование, в том числе 24 мужчины и 33 женщины в возрасте от 2 до 63 лет (8). Шесть пациентов были исключены из-за отсутствия образцов сыворотки. Характеристика пациентов представлена в таблице 1. Отбор проводился в соответствии с протоколом диагностики и лечения COVID-19.(пробное шестое издание), выпущенное Национальной комиссией здравоохранения Китайской Народной Республики. Пациенты, которые соответствовали стандартам для подозрения на COVID-19, были зачислены, а те, кто не соответствовал, были исключены. Случаи с подозрением на COVID-19 определялись в соответствии с наличием хотя бы одного из следующих четких эпидемиологических критериев в анамнезе: (1) история путешествий или проживания в Ухане или его окрестностях или в сообществах со случаями COVID-19 в течение 14 лет. дней до начала; (2) история контактов с людьми с COVID-19(положительный тест на нуклеиновые кислоты) в течение 14 дней до начала заболевания; (3) история контактов с пациентами, инфицированными COVID-19, из Уханя и прилегающих районов, или история контактов с людьми с лихорадкой или респираторными симптомами из сообществ с COVID-19; и (4) кластерное начало. Кроме того, у пациентов должны были быть следующие клинические проявления: (1) лихорадка и/или респираторные симптомы; (2) особенности визуализации COVID-19; и (3) нормальные или уменьшенные лейкоциты на ранних стадиях заболевания и уменьшенное количество лимфоцитов. Если не было четкого эпидемиологического анамнеза, для включения были необходимы три вышеуказанных клинических проявления. Это ретроспективное исследование, одобренное Комитетом по этике Шэньчжэньской больницы Южного медицинского университета (NYSZYYEC20200009).). Требование об информированном согласии было отменено, поскольку данные были анонимными. Участники исследования поделились результатами в строгом соответствии с правилами Комитета по этике Шэньчжэньской больницы Южного медицинского университета.
Таблица 1 . Характеристика и клинические особенности пациентов с подозрением на COVID-19.
Лабораторное исследование
Рутинные показатели крови определены на второй день госпитализации. Остальные образцы сыворотки использовали для обнаружения IgM и IgG. Первичный скрининг посредством амплификации нуклеиновых кислот из мазков из глотки был проведен с использованием двух наборов от шести компаний (DAAN, Sansure Biotech, BGI, ShangHai ZJ Biotech, Geneodx и Biogerm) примерно в 20 больницах Шэньчжэня. Время после воздействия SARS-CoV-2 тестами на амплификацию нуклеиновых кислот (МАНК) и серологическими тестами описано в таблице 29.0003
Таблица 2 . Время экспозиции для МАНК и серологических тестов.
Большинство образцов сыворотки было получено через 2 недели после контакта с вирусом; было только 1 за 6 дней и 4 за 2 недели. Остальные образцы сыворотки были получены между 14 и 39 днями, что является хорошим периодом окна обнаружения для IgM/IgG (9, 10). Набор антител COVID IgM/IgG, который был отправлен в BIMT (Пекинский институт тестирования медицинских устройств) для проверки продукта, использовался с анализатором иммунофлуоресценции с временным разрешением для проведения флуоресцентных иммунохроматографических анализов (Beijing Diagreat Biotechnologies Co. , Ltd., партия : 20200214, Пекин, Китай). Процедуры обнаружения нуклеиновых кислот, IgM и IgG проводились строго в соответствии с инструкцией производителя. Всего было протестировано 242 здоровых человека без сопутствующих заболеваний, и были измерены значения. 95% доверительные интервалы для IgM и IgG составляли 0,44–0,88 ЕД/л и 0,50–1,02 ЕД/л соответственно. Эти результаты, предоставленные компанией Beijing Diagreat Biotechnologies Co., Ltd., позволяют предположить, что пороговые значения для IgM и IgG составляют 0,88 и 1,02 ЕД/л.
Анализ данных
Статистический анализ был выполнен в программном обеспечении системы статистического анализа SPSS 19.0. Данные подсчета выражаются в процентах. Критерий нормальности Шапиро-Уилка использовался для оценки того, были ли данные распределены нормально. Нормально и ненормально распределенные данные представлены как среднее ± стандартное отклонение и медианы (25-й процентиль и 75-й процентиль). Непараметрические критерии и двусторонний χ 2 -тесты использовались для сравнения различий между группами, и P -значение <0,05 считалось статистически значимым.
Результаты
Клинические характеристики и тестирование нуклеиновых кислот COVID-19
В соответствии со стандартами диагностики при подозрении на COVID-19 в наше исследование было включено 57 пациентов. Все 57 пациентов прошли три теста на нуклеиновые кислоты, и каждый раз результаты подтверждались двумя наборами для тестирования нуклеиновых кислот COVID-19. Среди 57 пациентов у 24 пациентов был положительный тест на нуклеиновые кислоты, у 33 пациентов был отрицательный тест на нуклеиновые кислоты в первый раз, и у всех 57 пациентов был отрицательный тест на нуклеиновые кислоты во второй и третий раз. Уровень положительных результатов COVID-19Тестирование нуклеиновых кислот в 57 случаях с подозрением на COVID-19 составило 42,10%.
Однократное выявление IgM и IgG COVID-19
По результатам теста на нуклеиновые кислоты мы провели выявление IgM и IgG через компанию Diagreat. Как показано на рисунке 1А, среди 33 пациентов с отрицательными результатами нуклеиновой кислоты COVID-19 значение IgM у 20 пациентов было более 0,88 ЕД/л, а уровень положительных результатов составил 60,61%. Как показано на рисунке 1B, значение IgG у 15 пациентов было более 1,02 ЕД/л, а доля положительных результатов составила 45,45%. Как показано на рисунке 2А, среди 24 пациентов с положительным результатом на COVID-19нуклеиновых кислот, значение IgM у 19 пациентов было более 0,88 ЕД/л, а доля положительных результатов составила 79,17%. Как показано на рисунке 2B, уровень IgG у 16 пациентов был более 1,02 ЕД/л, а доля положительных результатов составила 66,67%.
Рисунок 1 . Обнаружение IgM и IgG среди 33 пациентов с отрицательными результатами нуклеиновой кислоты COVID-19. (A) Уровень IgM у 20 пациентов превышал 0,88 ЕД/л. (B) Уровень IgG у 15 пациентов превышал 1,02 ЕД/л.
Рисунок 2 . Выявление IgM и IgG среди 24 пациентов с положительным результатом на нуклеиновую кислоту COVID-19. (A) Уровень IgM у 19 пациентов превышал 0,88 ЕД/л. (B) Уровень IgG у 16 пациентов превышал 1,02 ЕД/л.
Сравнение времени экспозиции для МАНК и серологических тестов
Время от первого заражения до тестирования нуклеиновых кислот варьировалось от 1 до 34 дней. У одного пациента был отрицательный результат на нуклеиновые кислоты через 34 дня после воздействия; однако результат обнаружения IgM был положительным. Результаты частично отличались от нынешних представлений о том, что средний инкубационный период для COVID-19составляет 3 дня, минимум 0 дней и максимум 24 дня.
Сравнение времени воздействия МАНК и серологических тестов (рис. 3) не выявило статистически значимых различий во времени воздействия SARS-CoV-2 между группой с положительным результатом МАНК и группой с отрицательным результатом МАНК. Результаты были такими же, как и при серологических тестах.
Рисунок 3 . Сравнение времени экспозиции для МАНК и серологических тестов. (A) Время воздействия SARS-CoV-2 между положительной группой теста амплификации нуклеиновых кислот (МАНК) и отрицательной группой МАНК. (B) Время воздействия SARS-CoV-2 между группой с положительным серологическим тестом и группой с отрицательным серологическим тестом.
Комбинация IgM и IgG для выявления COVID-19
На рисунке 4A показано сочетание IgM и IgG для выявления COVID-19. Среди 33 пациентов с отрицательным результатом теста на нуклеиновые кислоты процент IgM(+)IgG(+), IgM(–)IgG(+), IgM(+)IgG(–) и IgM(–)IgG(– ) составили 36,37, 12,12, 24,24 и 27,27% соответственно. Положительная диагностическая частота при сочетании выявления IgM и IgG у 33 пациентов с отрицательным результатом на COVID-19.результаты теста на нуклеиновые кислоты составили 72,73%. По сравнению с отрицательным тестом на нуклеиновую кислоту и однократным обнаружением IgM и IgG, комбинация обнаружения IgM и IgG имела значительно более высокий уровень положительных результатов ( P < 0,01). Как показано на рисунке 4B, у 24 пациентов с положительным тестом на нуклеиновую кислоту комбинация IgM и IgG для обнаружения COVID-19 привела к процентам IgM(+)IgG(+), IgM(-)IgG(+), IgM(+)IgG(-) и IgM(-)IgG(-) 62,50, 8,33, 16,67 и 12,50% соответственно. Положительная диагностическая частота комбинации выявления IgM и IgG у 24 пациентов с COVID-19отрицательные результаты теста на нуклеиновые кислоты составили 87,50%. По сравнению с положительным тестом на нуклеиновую кислоту и однократным обнаружением IgM и IgG, комбинация IgM и IgG также имела значительно более высокий уровень положительных результатов ( P < 0,01).
Рисунок 4 . Комбинация IgM и IgG для выявления COVID-19. (A) Показатель положительной диагностики при сочетании выявления IgM и IgG у 33 пациентов с отрицательными результатами теста на нуклеиновые кислоты COVID-19 составил 72,73%. (Б) Показатель положительной диагностики при сочетании выявления IgM и IgG у 24 пациентов с положительными результатами теста на нуклеиновые кислоты COVID-19 составил 87,50%.
КТ двух особых пациентов
Пациент (номер 55, женщина, 62 года) поступил с жалобами на усталость и лихорадку 19 февраля 2020 г. Результаты обнаружения нуклеиновых кислот в мазках из зева 19 и 20 февраля были отрицательными. Сыворотка Результаты IgM и IgG были положительными, и значения составили 7,49 и 50,03 ЕД/л. Компьютерная томография грудной клетки (КТ) была выполнена 20 февраля 2020 г., и результаты показаны на рисунке 5А. Наблюдались характерные изменения положительных результатов визуализации. В нижней части обоих легких у этого пациента КТ показала большие нечеткие тени и непрозрачность по типу матового стекла (GGO), а также слегка веерообразное распределение. Клинические симптомы, серологические тесты и характерные изменения на КТ-изображениях этого пациента соответствовали друг другу.
Рисунок 5 . Случай пациента КТ. (A) Для пациента 55 результат обнаружения нуклеиновой кислоты был отрицательным, но результаты определения IgM и IgG были положительными. В нижних отделах обоих легких наблюдались крупные нечеткие тени, ГГО и слегка веерообразное распределение. (B) У пациента 19 результат обнаружения нуклеиновой кислоты был положительным, но результаты определения IgM и IgG были отрицательными, и в легких не было обнаружено явных поражений.
Другой пациент (номер 39, женщина, 35 лет) обратилась с кашлем и диареей 3 февраля 2020 г. Результаты обнаружения нуклеиновых кислот в мазках из зева были положительными 28 января 2020 г. Результаты сывороточных IgM и IgG были отрицательными, и значения составили 0,71 и 0,73 ЕД. /л. КТ-сканирование было выполнено 8 февраля 2020 г., и результаты показаны на рисунке 5B. Результаты КТ не показали явных поражений в обоих легких. Серологические тесты и характерные изменения на КТ у этого пациента были последовательными.
Ассоциация результатов КТ с результатами ПЦР и серологическими результатами
Компьютерная томография (КТ) органов грудной клетки пациентов была оценена в больнице. Характерные изменения положительных результатов визуализации включали следующее: множественные небольшие пятна и затемнение по типу матового стекла в обоих легких, а также инфильтрацию и консолидацию затемнения. Связи результатов КТ с результатами ПЦР и серологическими результатами показаны на рисунке 6. Мы не обнаружили статистически значимой разницы в доле положительных результатов МАНК между группами с положительными и отрицательными результатами КТ. Результаты были такими же, как и для серологических тестов.
Рисунок 6 . Связь результатов КТ с результатами ПЦР и с результатами серологических исследований. (A) Доля положительных результатов МАНК между группами положительных и отрицательных результатов КТ. (B) Серологические результаты между группами положительных и отрицательных результатов КТ.
Обсуждение
В нашем исследовании уровень положительных результатов по нуклеиновой кислоте COVID-19 в 57 случаях подозрения на COVID-19 составил 42,10%. Результаты теста на нуклеиновые кислоты могут быть ложноотрицательными или ложноположительными. В нашем исследовании были собраны образцы мазка из горла, и предыдущие исследования показали, что местонахождение образца является очень важным фактором при обнаружении нуклеиновых кислот. В одном исследовании исследователи проанализировали в общей сложности 72 мазка из носа и 72 мазка из горла и получили 9 мазков.последовательные образцы от каждого пациента; они обнаружили более высокую вирусную нагрузку вскоре после появления симптомов и обнаружили, что вирусная нагрузка в носу была выше, чем в горле (11). Исследования подтвердили, что образцы жидкости бронхоальвеолярного лаважа показывают самые высокие показатели положительных результатов (14 из 15; 93%), за ними следуют мокрота (72 из 104; 72%), мазки из носа (5 из 8; 63%), щеточные биопсии с помощью фибробронхоскопа (6 из 13; 46%), мазки из зева (126 из 398; 32%), фекалии (44 из 153; 29%) и кровь (3 из 307; 1%) (12, 13). Систематический обзор и метаанализ SARS-CoV-2 с использованием ОТ-ПЦР в различных типах клинических образцов также показали, что самый высокий уровень положительных результатов был в нижних дыхательных путях, затем ректальный мазок, затем мокрота (14). Для повышения точности обнаружения предлагается собирать один мазок из носоглотки и один мазок из ротоглотки в одну пробирку одновременно (15).
Кроме того, в клинической практике при заборе мазка из зева медицинский персонал должен носить защитную одежду. В этом исследовании сбор образцов осуществлялся разным медицинским персоналом, и эта процедура могла повлиять на результаты обнаружения нуклеиновых кислот. Операторы по сбору образцов должны быть обучены (15), и был предложен реагент для амплификации с «внутренним стандартом» для проверки качества образца (16). Как показано на Фигуре 5А, результаты обнаружения нуклеиновой кислоты для пациента 55 были отрицательными, но результаты определения IgM и IgG были положительными. Обнаружены характерные изменения положительных результатов КТ. Наконец, из-за потенциального лабораторного загрязнения положительные результаты могли быть ложноположительными. Как показано на Фигуре 5B, результат обнаружения нуклеиновой кислоты для пациента 19был положительным, но результаты IgM и IgG были отрицательными, а результаты КТ не показали явных поражений в обоих легких. В одном исследовании были проанализированы 126 граждан Германии, которые покинули Ухань и должны были пройти скрининг на наличие клинических признаков инфекции: тесты на нуклеиновые кислоты двух пассажиров после 14-дневного карантина были положительными, но у двух пациентов симптомы не развились.
Исследователи подтвердили результаты с помощью других методов. Результаты показали, что люди без лихорадки, без симптомов или только с легкими симптомами инфекции могут игнорировать их потенциальную заразность (17). Результаты лабораторных исследований на COVID-19Было обнаружено, что группа с положительной реакцией на нуклеиновую кислоту из 31 пациента и отрицательная группа из 23 пациентов в основном характеризуются сниженным количеством лимфоцитов и повышенным уровнем С-реактивного белка; за исключением одышки, наблюдались значительные различия в клинических характеристиках групп с отрицательным и положительным результатом на нуклеиновую кислоту COVID-19 (18). Исследования показали, что клинические признаки пациентов с положительной и отрицательной реакцией на нуклеиновую кислоту COVID-19 схожи (19). Мы также изучили ассоциации между результатами КТ, результатами ПЦР и серологическими результатами (рис. 6) и не обнаружили статистически значимой разницы в доле положительных результатов МАНК между группами положительных и отрицательных результатов КТ.
Результаты были такими же, как и для серологических тестов. Компьютерная томография для диагностики COVID-19отсутствие специфичности (20). Для диагностики COVID-19 срочно необходимы более быстрые и точные методы. Показатели положительной диагностики с комбинацией обнаружения IgM и IgG для пациентов с отрицательными и положительными тестами на нуклеиновые кислоты COVID-19 составили 72,73 и 87,50% соответственно. В течение 1 года применяется метод антител против SARS-CoV-2, включающий твердофазный иммуноферментный анализ, экспресс-иммунохроматографический анализ и иммунохемилюминесцентный анализ, и его клиническая ценность оценивается (21). Исследование показало, что обнаружение на основе IgM/IgG также может приводить к ложноположительным/ложноотрицательным результатам (22).
В нашем исследовании присутствуют некоторые ограничения. Во-первых, относительно небольшой размер выборки, различия в сайтах связывания антигенов IgM и IgG и различия в дизайне тестов на нуклеиновые кислоты COVID-19 могли привести к систематической ошибке в результатах. Во-вторых, на уровень положительных результатов тестов на IgM и IgG могло повлиять разное время между воздействием вируса и его обнаружением. Следует исследовать более ранние и другие сроки, а значения обнаружения IgM и IgG следует дополнительно подтверждать. В-третьих, значение обнаружения IgM и IgG следует уточнить в будущих исследованиях.
Заключение
По сравнению с обнаружением нуклеиновых кислот обнаружение IgM и IgG может обеспечить быстрый, простой и точный метод обнаружения случаев с подозрением на COVID-19. Обнаружение антител IgM и IgG может выявить подозрительные случаи с отрицательными тестами на нуклеиновые кислоты. Точность диагностики COVID-19 может быть повышена за счет тестирования нуклеиновых кислот у пациентов с эпидемическим заболеванием в анамнезе или с клиническими симптомами, а также при необходимости компьютерной томографии и тестирования сывороточных антител IgM и IgG после периода окна.
Заявление о доступности данных
Необработанные данные, подтверждающие выводы этой статьи, будут предоставлены авторами без неоправданных оговорок.
Заявление об этике
Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены Комитетом по этике Шэньчжэньской больницы Южного медицинского университета (NYSZYYEC20200009). Письменное информированное согласие на участие не было предоставлено законными опекунами/ближайшими родственниками участников, поскольку: это ретроспективное исследование, и данные были анонимными, поэтому требование информированного согласия было отменено.
Вклад авторов
XJ, YT, JunW, KH и YL внесли свой вклад в разработку дизайна исследования. JunlW и HZ внесли свой вклад в сбор данных. JL и HH участвовали в сборе клинических образцов. XJ, ZC и LZ внесли свой вклад в эксперименты и сбор данных. PZ внес свой вклад в анализ данных. XJ, PZ и YT внесли свой вклад в подготовку рукописи. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.
Конфликт интересов
Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.
Благодарности
Эта рукопись была выпущена в качестве препринта Jia et al. (8). Мы благодарим 57 пациентов, включенных в наше исследование. Мы благодарим профессора Фабао Гао из Западно-китайской больницы Сычуаньского университета и доктора Линьфэнь Чжао из больницы традиционной китайской медицины Уцзинь, филиала Нанкинского университета китайской медицины, за помощь в пересмотре английского описания компьютерной томографии. Мы благодарим International Science Editing (http://www.internationalscienceediting.com) за редактирование грамматики этой рукописи.
Ссылки
1. Малик Ю.С., Сиркар С., Бхат С., Шарун К., Дхама К., Дадар М. и др. Возникающий новый коронавирус (2019-nCoV) — текущий сценарий, эволюционная перспектива, основанная на анализе генома и последних разработках. Вет Q . (2020) 40: 68–76. doi: 10.1080/01652176.2020.1727993
CrossRef Полный текст | Google Scholar
2. Чжан Л., Лю Ю. Возможные вмешательства в связи с новым коронавирусом в Китае: систематический обзор. J Med Virol. (2020) 92: 479–90. doi: 10.1002/jmv.25707
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
3. Велаван Т.П., Мейер К.Г. Эпидемия COVID-19. Trop Med Int Health. (2020) 25: 278–80. doi: 10.1111/tmi.13383
Полный текст CrossRef | Google Scholar
4. Yu P, Zhu J, Zhang Z, Han Y, Huang L. Семейный кластер инфекции, связанный с новым коронавирусом 2019 года, что указывает на потенциальную передачу от человека к человеку в течение инкубационного периода. J заразить Dis. (2020) 221:1757–61. doi: 10.1093/infdis/jiaa077
Полный текст CrossRef | Google Scholar
5. Хабибзаде П., Стоунман Э.К. Новый коронавирус: взгляд с высоты птичьего полета. Int J Occup Environ Med. (2020) 11: 65–71. doi: 10.15171/ijoem.2020.1921
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
6. To KK, Tsang OT, Chik-Yan Yip C, Chan KH, Wu TC, Chan JMC и др. Последовательное обнаружение нового коронавируса 2019 года в слюне. Клин Инфекция Дис. (2020) 71:841–3. doi: 10.1093/cid/ciaa149
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
7. Zu ZY, Jiang MD, Xu PP, Chen W, Ni QQ, Lu GM и другие. Коронавирусная болезнь 2019 г. (COVID-19): взгляд из Китая. Радиология. (2020) 296: E15–25. doi: 10.1148/radiol.2020200490
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
8. Jia XW, Zhang PJ, Tian YP, Wang JL, Zeng HD, Wang J и др. Клиническая значимость теста IgM и IgG для диагностики подозрения на COVID-19 с высокой вероятностьюинфекционное заболевание. medRxiv [Препринт] . (2020). doi: 10.1101/2020.02.28.20029025
CrossRef Полный текст | Google Scholar
9. Liu R, Liu X, Yuan L, Han H, Shereen MA, Zhen J, et al. Анализ дополнительного серологического обнаружения к тесту на нуклеиновые кислоты для диагностики тяжелого острого респираторного синдрома, вызванного коронавирусом 2 (SARS-CoV-2). Int Immunopharmacol . (2020). 86:106746. doi: 10.1016/j.intimp.2020.106746
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google
10. Liu W, Liu L, Kou G, Zheng Y, Ding Y, Ni W, et al. Оценка иммуноферментных анализов на основе нуклеокапсида и шиповидного белка для выявления антител против SARS-CoV-2. Дж Клин Микробиол . (2020) 58:e00461–20. doi: 10.1128/JCM.00461-20
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
11. Zou L, Ruan F, Huang M, Liang L, Huang H, Hong Z и другие. Вирусная нагрузка SARS-CoV-2 в образцах верхних дыхательных путей инфицированных пациентов. N Engl J Med. (2020) 382:1177–9. doi: 10.1056/NEJMc2001737
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
12. Ван С., Хорби П.В., Хейден Ф.Г., Гао Г.Ф. Новая вспышка коронавируса, вызывающая глобальную озабоченность в области здравоохранения. Ланцет. (2020) 395:470–3. doi: 10.1016/S0140-6736(20)30185-9
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
13. Wang W, Xu YL, Gao RQ, Lu RJ, Han K, Wu G и другие. Обнаружение SARS-CoV-2 в различных типах клинических образцов. ЯМА. (2020) 323:1843–4. doi: 10.1001/jama.2020.3786
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
14. Bwire GM, Majigo MV, Njiro BJ, Mawazo A. Профиль обнаружения SARS-CoV-2 с помощью RT-PCR в различных типах клинических образцов: систематический обзор и метаанализ. Дж Мед Вирол . (2021) 93:719–25. doi: 10.1002/jmv.26349
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
15. Liu Z, Tong Y, Wu J, Du L, Wei C, Cui W, et al. (2020). Консенсус китайских экспертов по Nucleic19Кислотное обнаружение SARS-CoV-2. Энн Трансл Мед. 8:1631. doi: 10.21037/atm-20-4060
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
16. Yang Z, Wu J, Ye F, Zhu B, Guan W, Huang J и др. Лабораторное тестирование SARS-CoV-2 на основе консенсуса экспертов. J Грудной дис . (2020) 12:4378–90. doi: 10.21037/jtd-20-1928
Полный текст CrossRef | Google Scholar
17. Hoehl S, Berger A, Kortenbusch M, Cinatl J, Bojkova D, Rabenau H, et al. Доказательства инфекции SARS-CoV-2 у вернувшихся путешественников из Ухани, Китай. N Engl J Med. (2020) 382:1278–80. doi: 10.1056/NEJMc2001899
PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar
18. Li YY, Wang WN, Lei Y, Zhang B, Yang J, Hu JW и другие. Сравнение клинических характеристик РНК-положительных и РНК-отрицательных пациентов с клинически диагностированной новой коронавирусной пневмонией 2019 года. Чжунхуа Цзе Хе Хе Ху Си За Чжи. (2020) 43:E023. doi: 10.3760/cma.j.cn112147-20200214-00095
Полный текст CrossRef | Академия Google
19. Lang G, Su J, Wu W, Zhao H, Ying S, Lou H, et al. Клинико-рентгенологические проявления при коронавирусной болезни 2019 года с отрицательными результатами нуклеиновых кислот. Открытый форум Заразите Dis .