Грибковый кератит и другие виды заболевания

Проявляется заболевание в виде боли, покраснения, изъязвления и помутнения роговицы. Иногда у человека может отмечаться слезотечение, светобоязнь, блефораспазм (спазматическое смыкание век), ухудшение прозрачности роговицы или же ее изъязвление.

 

Причина кератита может быть самой разной. Симптомы этого заболевания, к примеру, проявляются у людей больных гриппом, у пациентов с острой аллергической реакцией или у людей, травмировавших глазное яблоко контактными линзами.

 

Грибковый кератит — форма заболевания, которая вызывается паразитирующими грибами — в таком случае у человека будет выражен корнеальный синдром — светобоязнь, блефораспазм, слезотечение и боль. При грибковом кератите роговице наносятся значительные повреждения, которые часто заканчиваются бельмом на глазу или значительной потерей зрения.

 

Аллергический кератит — заболевание, которое развивается в следствии тяжелой аллергии.

Симптомы — зуд, светобоязнь, слезотечение. Иногда у человека может быть отечность и гиперемию конъюнктивы, с образованием валика вокруг края роговицы.

Бактериальный кератит — заболевание. которое вызывается стафилакоками и синегнойной палочкой. Чаще всего возникает у носителей контактных линз из-за недостаточного уровня гигиены.

 

Герпетический кератит — заболевание, вызываемое вирусом герпеса. Чаще всего возникает у людей с ослабленным иммунитетом — такое наблюдается во время болезни, к примеру гриппом. Выражает в виде светобоязни, слезотечения, восполнении ближайших лимфоузлов. При этом роговица отекает. Выделяют две формы заболевания — первичную и вторичную. Вторичный (постпервичный) герпетический кератит — рецедивирующая форма заболевания, которая обусловленная постоянным наличием в организме вируса герпеса. Бывает поверхностным и глубоким. Поверхностный — встречается крайне редко. Характеризуется точечным помутнением глаз.

Глубокий — распространенная форма, при которой поражаются глубоки слои роговицы и образуется обширная язва.

 

Амебный кератит — заболевание, которое вызывают акантамебами.

Это один из самых серьезных видов заболевания. Чаще всего возникает у людей, которые пренебрегают гигиеной глаз при ношении контактных линз. Если не лечить, то может стать причиной слепоты. Симптомы схожи с герпетическим кератитом.

 

Паренхиматозный кератит — хроническое воспаление средних слоев роговицы.  Чаще всего возникает из-за инфекционного поражения. Симптомы схожи с другими видами кератита, однако в случае если источник заболевания бледная трепонема (бактерия, которая вызывает сифилис) отличительной особенностью заболевания будет роговица, которая приобрела вид мутного стекла, скрывающего радужку. При этом со стороны лимба (края) роговицы начинают прорастать новообразованные сосуды которые в глазу оранжево-красные зоны.

Причины травматического кератита могут быть самыми разными — начиная от поверхностных повреждений глаз и заканчивая дакрициститом. При поверхностных повреждениях возникает ползучая язва, гнойный кератит. При дакриоцистите повреждается кератит осложняется восполнением слезного мешка. Если лечение отсутствует возможно прободение (перфорация) роговицы.

Грибковый кератит — Fungal keratitis

Воспаление роговицы из-за грибковой инфекции

Грибковый кератит является воспалением роговицы , что приводит от инфекции в грибковом организме. Кератомикоз — это грибковая инфекция роговицы , передней части глаза, которая покрывает зрачок . Тем, кто испытывает эти симптомы, обычно рекомендуется немедленно обратиться к соответствующему офтальмологу .

Презентация

Симптомами грибкового кератита являются нечеткое зрение, красный и болезненный глаз, который не улучшается после снятия контактных линз или лечения антибиотиками, повышенная чувствительность к свету (светобоязнь) и чрезмерное слезотечение или выделения. Симптомы заметно меньше по сравнению с аналогичной бактериальной язвой.

Признаки: пораженные веки и придатки имеют отек и покраснение, конъюнктива подвергнута химиотерапии. Может присутствовать язва. Это сухая на вид язва роговицы со сателлитными поражениями окружающей роговицы. Обычно с грибковой язвой связан гипопион , который в большинстве случаев имеет белый пушистый вид. В редких случаях он может распространяться на задний сегмент и вызывать эндофтальмит на более поздних стадиях, что приводит к разрушению глаза. (Примечание: грибковый эндофтальмит встречается крайне редко)

Причины

Нитчатые грибы

Дрожжи

Fusarium spp. наиболее распространен, чем Aspergillus spp. и, в-третьих, грибковые грибки, вызывающие грибковый кератит в Индии.

Патофизиология

Причиной грибкового кератита является травма растительным / органическим веществом. Травма колючкой или у сельскохозяйственных рабочих травма пшеницы во время уборки урожая является типичным. Это имплантирует грибок прямо в роговицу. Грибок медленно растет в роговице и разрастается, поражая передний и задний слои стромы. Грибок может прорваться через мембрану десцемета и перейти в переднюю камеру. Через несколько дней или недель пациент поступает с грибковым кератитом.

Диагностика

Диагноз ставит офтальмолог / оптометрист, сравнивая типичный анамнез, симптомы и признаки. Часто это можно пропустить и ошибочно принять за бактериальную язву. Окончательный диагноз устанавливается только после положительного результата посева (лактофеноловый ватный синий, известково-фтористая среда), обычно через неделю после соскоба роговицы. Недавние успехи были достигнуты в области ПЦР [3] / иммунологических тестов, которые могут дать гораздо более быстрый результат.

Классификация

Инфекционный кератит может быть бактериальным, грибковым, вирусным или протозойным. Значительные различия в представлении пациента позволяют сделать предположительный диагноз офтальмологу, помогая в назначении соответствующей противоинфекционной терапии.

Профилактика

Предотвращение травм растительными / органическими веществами, особенно у сельскохозяйственных рабочих во время сбора урожая, может снизить заболеваемость грибковым кератитом. Людям из группы риска таких травм рекомендуется носить широкие защитные очки с боковыми щитками.

лечение

Предположительный диагноз грибкового кератита требует немедленной эмпирической терапии. Офтальмологическая суспензия натамицина является препаратом выбора для лечения мицелиальных грибковых инфекций. Офтальмологический раствор флуконазола рекомендуется при кандидозной инфекции роговицы. В случаях отсутствия ответа могут потребоваться глазные капли амфотерицина B , но они могут быть довольно токсичными и для приготовления требуется опытный фармацевт. Другие лекарства также были опробованы с умеренным успехом. В обновленном Кокрановском обзоре, опубликованном в 2015 году, в котором рассматривались лучшие методы лечения грибкового кератита, не удалось сделать никаких выводов, поскольку в исследованиях использовались различные лекарства. Обзор действительно обнаружил, что «люди, получавшие натамицин, с меньшей вероятностью разовьются в роговице и нуждаются в трансплантации».

В любом случае проконсультируйтесь со своим офтальмологом, так как у него будет лучшее лечение.

Прогноз

Инфекция обычно заживает долго, так как сам грибок растет медленно. Перфорация роговицы может возникнуть у пациентов с нелеченным или частично пролеченным инфекционным кератитом и требует хирургического вмешательства в виде трансплантации роговицы .

Эпидемиология

Это заболевание довольно распространено в тропиках и с большим аграрным населением. В Индии большое количество случаев грибкового кератита, но плохая система отчетности препятствует сбору точных данных. Флорида в США регулярно сообщает о случаях грибкового кератита, вызванного Aspergillus и Fusarium spp. как наиболее частые причины.

Социальное влияние

Потеря зрения при грибковом кератите может иметь серьезные экономические и социальные последствия. Многие люди заболевают грибковым кератитом на единственном глазу и поэтому слепнут из-за болезни. Очевидно, что их тяжелое положение вызвано отсутствием образования и надлежащей защиты глаз в таких случаях.

Известные случаи

Недавно один конкретный продукт, бренд мягких растворов для контактных линз ReNu с MoistureLoc, попал в заголовки в связи с отчетом Центров США по контролю и профилактике заболеваний, в котором говорится о повышенной заболеваемости определенным типом грибкового кератита ( Fusarium

keratitis) у людей, использующих Bausch & Продукция Lomb . Впоследствии компания Bausch & Lomb приостановила, а затем отозвала поставки одного конкретного продукта, ReNu с MoistureLoc.

Смотрите также

Ссылки

3. Использование ПЦР-нацеливания на внутренние транскрибируемые спейсерные области и анализ однонитевого конформационного полиморфизма вариации последовательностей в различных областях генов рРНК у грибов для быстрой диагностики грибкового кератита. Маниш Кумар и П.К. Шукла (2005). J. Clin. Microbiol. 43 (2), 662-668

внешняя ссылка

Кератит: фото, симптомы и лечение

Глаз человека – сбалансированная, но одновременно довольно хрупкая система. Одной из важнейших оптических структур глаза является роговица, постоянно подвергающаяся  воздействию внешней среды. Это нередко становится причиной заболеваний, в числе которых – кератит.

Что такое кератит и каковы его симптомы?

Кератит – воспаление роговицы глаза, сопровождающееся ее помутнением. Иногда это заболевание ошибочно принимают за аллергический конъюнктивит, однако кератит более опасен и может даже привести к потере зрения. Характерным признаком кератита является наличие воспалительных инфильтратов (уплотнений) в различных отделах роговицы, разнообразных по форме и глубине залегания.

Симптоматика может различаться в зависимости от вида заболевания, однако основные проявления кератитов являются схожими:

• светобоязнь;
• беспричинное слезотечение;
• раздражение роговицы;
• боль в области глазного яблока;
• блефароспазмы;
• отек и помутнение роговицы.

При отсутствии лечения кератит может приводить к переходу воспалительного процесса на другие оболочки глаза и стать причиной развития серьезных осложнений. Поэтому при проявлении вышеперечисленных симптомов следует обязательно обратиться за помощью к квалифицированному офтальмологу.

Классификация кератитов

В зависимости от различных критериев различают множество форм кератитов. Например, по характеру течения патологического процесса выделяют:

• Острый кератит – поверхностное воспаление обычно экзогенного характера;
• Подострый кератит;
• Хронический кератит – глубокое эндогенное поражение роговицы;
• Рецидивирующую форму болезни.

В зависимости от глубины распространения патологического процесса различают поверхностный и глубокий вид заболевания. Поверхностный кератит характеризуется вовлечением в воспалительный процесс трети толщины роговицы (эпителия и верхней части стромы). При глубоком кератите воспаление охватывает всю строму роговицы, поэтому этот вид заболевания также называется стромальным кератитом.

По причинам возникновения патологического процесса различают следующие виды кератитов:

• Травматический кератит;
• Аллергический кератит;
• Обменный кератит;
• Бактериальный кератит;
• Грибковый кератит;
• Вирусный кератит.

Вирусный кератит — причины, лечение

Вирусный кератит является одним из довольно частых проявлений общей вирусной инфекции. Патологический процесс при данной форме заболевания может затрагивать как только эпителий и верхние слои стромы (поверхностный), так и полностью всю строму (глубокий). Вирусный кератит также характеризуется снижением прозрачности роговицы и ухудшением остроты зрения. Причиной этой формы заболевания является аденовирусная, герпетическая инфекция, корь, ветряная оспа, эпидемический паротит и др. вирусные заболевания.

Комплексное лечение вирусного кератита направлено на уничтожение инфекции, стимуляцию иммунитета и регенерацию роговицы. Курс терапии включает в себя пероральный прием и инстилляции противовирусных препаратов, местное применение теброфеновой, бонафортовой и оксалиновой мазей, антигистаминные средства, мидриатики, антиоксиданты и витамины A, В, С, Е и PP. При отсутствии результатов терапии показано хирургическое вмешательство – кератопластика.

Клиника АРТОКС предлагает консультации офтальмологов и эффективное лечение любых форм кератитов по доступным и демократичным ценам. Современное оборудование и большой опыт наших специалистов помогут Вам увидеть мир новыми глазами.

Врачи-офтальмологи

Хирург-офтальмолог

врач-офтальмолог

Задать вопрос офтальмологу

Другие услуги клиники

лечение глаз, симптомы, признаки, причины, классификация, осложнения, последствия, прогноз

Слушать аудио

Воспроизведение данного аудиоформата не поддерживается вашим браузером.

Кератит — это воспаление роговицы, прозрачной ткани, которая покрывает зрачок и радужную оболочку. Он может возникнуть по разным причинам: от небольшой травмы до бактерий, вирусов или паразитов¹.

Кератит может привести к помутнению роговицы вплоть до развития бельма и других серьезных осложнений, которые могут навсегда повредить ваше зрение. Но в большинстве случаев при своевременном лечении заболевание заканчивается полным выздоровлением без потери зрения.

Виды заболевания

В зависимости от места локализации патологии, выделяют центральные и периферические кератиты. Также по причине появления кератиты делятся на инфекционные и неинфекционные.

Инфекционный кератит

Бактериальный кератит

Чаще всего наблюдается при травмах глаз или у пользователей контактных линз, нарушающих правила гигиены. Его возбудителем чаще всего является золотистый стафилококк.

Грибковый кератит

Вызывается аспергиллом, кандидой или фузарием. Обычно развивается на фоне массивной антибиотикотерапии, у лиц со сниженным иммунитетом или у тех, кто носит контактные линзы. Отличается сильным покраснением глаз и выраженными болевыми ощущениями.

Паразитарный кератит

Вызывается амебами рода Acanthamoeba. Часто встречается у людей, которые носят контактные линзы, а также этим кератитом можно заболеть после купания в озере или прогулки по лесу. В долгосрочной перспективе паразитарный кератит может привести к слепоте.

Вирусный кератит

Герпетический вирусный кератит может начаться при ослаблении иммунной защиты и носит хронический характер, а аденовирусный возникает как одно из осложнений простудных заболеваний. Их возбудителем может быть вирус герпеса или аденовирус.

Неинфекционный кератит

Аллергический кератит

К этой форме заболевания приводит глазная аллергия на пыльцу растений и/или наличие в слезной жидкости некоторых бактериальных токсинов.

Аутоиммунный кератит

Возникает в результате сложных нарушений в деятельности иммунной системы человека, в результате которых она начинает распознавать ткань роговицы как чужеродную и атаковать ее.

Фотокератит

Возникает из-за ожога роговицы и конъюнктивы в результате интенсивного воздействия ультрафиолета: при долгом пребывании на солнце или от сварочного аппарата.

 

 

Также неинфекционный кератит может быть вызван травмой глаза, например, царапиной, слишком долгим ношением контактных линз или ношением линз во время плавания.³

Кератиты могут протекать в тяжелой, умеренной или легкой форме. Иногда воспалительный процесс распространяется и на другие отделы глаза, приводя к развитию кератоконъюнктивита, кератоуевита и т. д.⁴

Если вы заметили у себя какие-либо симптомы кератита, немедленно запишитесь на прием ко врачу. Задержки в диагностике и лечении кератита могут привести к серьезным осложнениям, включая слепоту⁶.

Диагностика

Чтобы диагностировать кератит, врач сначала расспросит о ваших симптомах, а затем осмотрит ваши глаза. Если глаз закрыт от инфекции, вам помогут открыть его, чтобы провести полное обследование роговицы. Чтобы исключить инфекцию, офтальмолог может запросить лабораторное тестирование.
Он возьмёт мазок с роговицы или образец слезы, чтобы определить точную причину кератита⁷.

Для постановки такого диагноза, как кератит, применяют следующие методы диагностики:

визометрия

Определение остроты зрения при помощи проектора знаков или специальных таблиц

биомикроскопия

Осмотр глаза с помощью щелевой лампы

флюоресцииновый тест

⁸

Исследование роговицы с использованием специальных красителей

Если человек страдает от кератита и носит контактные линзы, он должен снять их, как только у него появятся какие-либо симптомы инфекции или раздражения. Контактные линзы не должны использоваться снова, пока заболевание не будет вылечено.

Грибковый кератит, симптомы и лечение заболевания

Кератитом в медицине называют воспаление роговицы глаза, проявляющее себя ее помутнением, покраснением, изъязвлением, а также болью в пораженном глазу. Данная патология может иметь как травматическое происхождение, так и инфекционное. Нас в данной статье интересует развитие грибкового кератита, его диагностика и лечение этого заболевания глаза. Важность лечения этой патологии заключается в том, что кератит может дать осложнение на зрение и привести к образованию бельма, а значит к данному заболевания нельзя относиться халатно.

Кератит грибкового вида вызывается дрожжевыми, лучистыми и плесневыми грибками, которые могут попасть на роговицу глаза при ее травмировании колоском, веточкой дерева, травинкой либо землей. Предрасполагающими к появлению кератита факторами являются воспалительные процессы в слезном мешке, слезных канальцах или конъюнктиве. Кроме прочего, развитию патологии способствует длительное применение кортикостероидов, антибиотиков, которые своим действием подавляют активность бактериальной микрофлоры.

Для любого вида кератита свойственен так называемый роговичный синдром (группа симпотомов). Он включает в себя – светобоязнь, слезотечение и блефароспазм. Снижается острота зрения. Наиболее характерным симптомом воспаления роговицы, заметным при осмотре с помощью щелевой лампы, является наличие инфильтрата с эндотелиальными бляшками. Прочие же поражения выражены слабо и лишь при большом очаге поражения наблюдается желтоватая либо белая окраска воспаленного участка, которая имеет четкие границы. Поверхность области поражения становится сухой, а зона инфильтрации творожистая или бугристая. Из–за проявления этих симптомов именно на поздних стадиях заболевания, диагностика кератита на ранних стадиях затруднена. Исходя из вышесказанного, при любых подозрениях на появление кератита некротический материал необходимо исследовать на наличие грибов. Причем если имеются подозрения на наличие грибковой инфекции, ни в коем случае нельзя применять стероидные препараты, которые активизируют рост грибов. Для диагностики заболевания делается соскоб с творожистого центрального участка воспаления, полученный материал изучается в лаборатории.

При лечении грибкового кератита врачи назначают неспецифические противогрибковые препараты, такие как Нистатин в каплях и мазях, Кетоконазол, Флуконазол или же медикамент Леворин. Но чаще всего назначают препарат Итраконазол 1 раз в сутки по 200 мг внутрь, на протяжении трех недель. Кроме того, местно могут применяться и нестероидные противовоспалительные медикаменты, к примеру, Униклофен, Дифталь, Индоколлир, и прочие. Эффективность данного лечения существенно возрастает в случае применения механического воздействия на инфильтрат: бриллиантовым зеленым, прижиганием эфиром, а также криокоагуляцией.

Что касается профилактики грибкового кератита, то прежде всего необходимо принимать меры по предупреждению травм глаза, а также своевременно диагностировать и лечить конъюнктивит, блефарит, дакриоцистит и прочие заболевания глаз, которые способны провоцировать данное заболевание. Коме прочего, необходимо поддерживать иммунную систему не давая ей ослабнуть и допустить развитие кератита. Берегите свои глаза!

Заболевания роговицы глаза

14 Ноября 2017

Кератиты

Роговица — часть наружной оболочки глазного яблока, поэтому она сильно подвержена воздействию внешней среды. Кератит – воспаление, которое проявляется помутнением, изъязвлением, болью и покраснением глаза.
Различные травмы, воспалительные заболевания вследствие попадания чужеродных тел, наличие микрофлоры в конъюнктивальной полости занимают значительную долю в патологии роговицы. Особенности дыхания и питания роговой оболочки также накладывают свой отпечаток на развитие воспалительного процесса. Последствия подобных заболеваний при неправильном лечении приводят к необратимым изменениям роговицы, единственным методом лечения которых является пересадка донорских роговых оболочек.

Этиология и классификация

Для определения причины очень важно понимать, какая инфекция вызвала кератит, и каким путем она попала на роговицу.
Кератиты может вызывать:

• бактериальная инфекция;
• вирусная инфекция;
• грибковая инфекция;
• паразитарная инфекция;
• неправильная очистка и/или уход за контактными линзами;
• слишком длительное ношение контактных линз;
• травматический;
• дефицит витамина А (в редких случаях).

По глубине поражения выделяют:

• краевые;
• поверхностные;
• глубокие;
• интрастромальные (более глубокое проникновение вируса внутрь роговицы).

Симптомы заболеваний роговицы включают:

• покраснение глаз;
• глазную боль;
• боль или раздражение, затрудняющие открытие век;
• резь, жжение, зуд, чувство «песка»;
• отек вокруг глаз;
• чувство инородного тела в глазу;
• нечеткое зрение;
• чувствительность к свету (светобоязнь).

Диагностика заболеваний роговицы

Для определения причины необходимо провести ряд общих и лабораторных исследований, а также детальный анализ данных анамнеза, так как кератиты могут являться симптомами общего заболевания.
Диагноз кератита ставят, основываясь на типичные клинические симптомы. Для поверхностного кератита свойственно наличие дефекта в поверхностных слоях роговицы с локальным отеком вокруг повреждения. Поражение внутренних слоев роговицы без расщепления ее ткани характерно для глубокого кератита.
Для правильной постановки диагноза необходима биомикроскопия роговицы – бесконтактная проверка структур глаза специальным оптически прибором — щелевой лампой. Поражения эпителия роговой оболочки хорошо видны после капельного введения 0,5% раствора флюоресцеина.
Если у пациента наблюдаются дистрофии (наследственные заболевания) роговицы, травматические эрозии, синдром сухого глаза, следует провести дифференциальный диагноз.
Первичные дистрофии роговой оболочки обычно двусторонние, для них характерно хроническое течение, медленное развитие, в редких случаях наблюдается светобоязнь и периодическое раздражение глаз, отсутствует васкуляризация (процесс врастания сосудов в роговую оболочку), снижена чувствительность роговицы.
Для травматической эрозии роговицы характерен дефект поверхностных слоев оболочки.

Лечение заболеваний роговицы глаза

В зависимости от глубины поражения роговицы лечение может меняться.
Для лечения поверхностных форм назначают антисептические капли, антибиотики в виде мази, препараты, стимулирующие регенерацию роговицы. Лечение пациентов с таким диагнозом проходит в условиях поликлиники.
В стационаре проходит лечение глубоких и интрастромальных форм, особенно в случаях острого протекания и гнойных кератитов. При выяснении этиологии, прежде всего, проводят лечение заболевания, которое привело к кератиту.
Пациентам с бактериальными кератитами и язвами роговой оболочки назначают курс антибиотиков широкого спектра действия в виде мази. Антибиотик определяется после проведения посева микрофлоры конъюнктивальной полости и выяснения её чувствительности к конкретному препарату.

Прогноз

Прогноз при кератитах зависит от этиологии заболевания, локализации, характера и течения инфильтрата (уплотнения, вызванного скоплением клеточных элементов, крови и лимфы). Как правило, если пациенту было проведено правильное и своевременное лечение, небольшие поверхностные инфильтраты рассасываются полностью или оставляют легкие «облаковидные» помутнения. Практика показывает, что глубокие и язвенные кератиты заканчиваются образованием более интенсивных помутнений роговицы и снижением остроты зрения, в случае центрального расположения очага. Однако, даже при глубоких рубцах роговицы (бельмах), возможно возращение зрения после успешной пересадки роговицы – кератопластики.

Аспергиллезные инфекции уха, глаз и ногтей

отомикоз

Отомикоз является грибковой инфекцией уха и наиболее часто встречающейся грибковой инфекцией в клиниках уха, горла и носа. Организмы, ответственные за отомикоз, обычно являются грибками из окружающей среды, чаще всего Aspergillus niger, Грибки обычно проникают в ткани, уже поврежденные бактериальными инфекциями, физическими травмами или избытком ушной серы.

Симптомы:

• Зуд, раздражение, дискомфорт или боль
• Небольшие количества разряда
• Ощущение закупорки в ухе

В редких случаях Aspergillus заражение уха может распространиться на кости и хрящи, вызывая тяжелое и опасное для жизни заболевание. Это чаще всего вызвано Aspergillus fumigatus чем Aspergillus nigerи связан с основной иммунокомпрометацией, сахарным диабетом или пациентами на диализе.

Диагноз отомикоз подтверждается путем удаления осколков из инфицированного уха, культивирования его на специальной чашке с агаром и использования микроскопии для установления возбудителя. Если инфекция глубокая, следует взять биопсию для посева и идентификации грибка. Если есть подозрение, что инфекция становится инвазивной, можно использовать компьютерную томографию и МРТ, чтобы увидеть, распространились ли грибы на какие-либо другие участки.

Лечение включает в себя тщательную сушку и очистку слухового прохода, используя микропосос. Следует избегать ушных спринцеваний, так как это может привести к вспышке инфекции в более глубоких местах уха. В зависимости от того, насколько сложна инфекция, вам может потребоваться дальнейшее лечение противогрибковыми препаратами, нанесенными на ухо. Лечение должно продолжаться в течение 1-3 недель, и пероральная противогрибковая терапия требуется только в том случае, если противогрибковые препараты, нанесенные на кожу, не работают или состояние инвазивное.

При хорошей очистке слухового прохода и противогрибковой терапии отомикоз обычно излечивается и не рецидивирует.

Нажмите здесь для получения дополнительной информации об отомикозе

Онихомикоз

Онихомикоз — грибковая инфекция ногтя, чаще всего ногтя. Грибковая инфекция ногтей часто встречается у взрослого населения с частотой около 5-25% и увеличением заболеваемости у пожилых людей. Онихомикоз составляет около 50% от всех заболеваний ногтей. Существует большое разнообразие грибков, которые могут вызвать онихомикоз, но Т. рубрум отвечает за около 80% случаев в Великобритании.  Виды Aspergillus, среди многих других грибов, может иногда вызывать онихомикоз. Некоторые инфекции вызваны более чем одним грибком

Симптомы инфекции могут варьироваться в зависимости от типа пораженного грибка, но часто встречаются утолщенные ногти и изменение цвета.

Некоторыми из факторов, вызывающих это заболевание, являются окклюзионная обувь, обширный контакт воды с ногтями, повторные травмы ногтей, генетическая предрасположенность и сопутствующие заболевания, такие как диабет, плохое периферическое кровообращение и ВИЧ-инфекция, а также другие формы иммуносупрессии.

Диагностика причинного грибка достигается путем соскабливания ногтя (материал под ногтем является наиболее полезным материалом). Маленькие кусочки этого затем исследуют под микроскопом и выращивают на специальных чашках с агаром, чтобы определить виды, ответственные за заболевание.

Лечение зависит от причинного вида и тяжести заболевания. Противогрибковый крем или мазь, нанесенная на пораженный ноготь, эффективна в некоторых более легких случаях. Может потребоваться пероральная противогрибковая терапия или операция по удалению ногтя. Лечение может длиться от 1 недели до 12+ месяцев, в зависимости от случая. Лечение возможно, но занимает много времени, так как рост ногтей идет медленно.

Складка ногтя также может заразиться — это называется паронихия и обычно вызывается грибковые микроорганизмы албиканс и другие Кандида виды.

Нажмите здесь для получения дополнительной информации об онихомикозе

Грибковый кератит

Грибковый кератит является грибковой инфекцией роговицы. Наиболее распространенными возбудителями являются Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Fusarium SPP. а также грибковые микроорганизмы албиканс, хотя другие грибки могут быть ответственны. Травма, особенно связанная с растительным материалом, является распространенным предшественником грибкового кератита. Жидкость для контактных линз, загрязненная грибами, также может вызывать грибковый кератит. Другие возможные факторы риска включают актуальные кортикостероиды, традиционные лекарства и более высокие внешние температуры и влажность. Бактериальный кератит чаще встречается у тех, кто носит контактные линзы, и в западном мире, тогда как в Индии, Непале и некоторых других странах грибковый кератит встречается по меньшей мере так же часто, как и бактериальный кератит. По оценкам, во всем мире ежегодно регистрируется более миллиона случаев грибкового кератита, в основном в тропических странах.

Симптомы обычно похожи на другие виды кератита, но, возможно, более продолжительны (5-10 дней):

• покраснение глаз
• боль
• лишние слезы или другие выделения из вашего глаза
• затруднение открытия века из-за боли или раздражения
• затуманенное зрение
• снижение зрения
• чувствительность к свету
• ощущение, что что-то в твоих глазах

Лучший способ диагностировать грибковый кератит — взять соскоб из роговицы. Любой грибковой агент в этом соскобе затем выращивают на специальной чашке с агаром для идентификации. Наряду с культивированием организма требуется микроскопия из-за большого разнообразия потенциальных причинных грибов.

Противогрибковые препараты, наносимые непосредственно на глаза в форме глазных капель, необходимы для лечения грибкового кератита. Частота их введения зависит от тяжести инфекции. В серьезных случаях это ежечасно и может быть уменьшено по частоте через 1 день, поскольку улучшение задокументировано. Местная противогрибковая терапия имеет частоту ответа 60% с сохранением зрения, если кератит тяжелый, и ответ 75%, если он мягче. При тяжелых инфекциях рекомендуется пероральная терапия. Противогрибковое лечение зависит от возбудителя. Терапия обычно продолжается не менее 14 дней. Хирургическая обработка необходима при тяжелых заболеваниях.

Грибковый кератит связан с ~ 5-кратным повышением риска последующей перфорации и необходимости пересадки роговицы, чем бактериальный кератит. Восстановление зрения выше, если диагноз поставлен рано.

Нажмите здесь для получения дополнительной информации о грибковом кератите

Для получения более подробной информации о типах аспергиллеза, их симптомах и лечении посетите следующие ссылки:

Решение проблемы грибкового кератита

Если послушать врачей, борьба с грибковым кератитом похожа на борьбу с медведем с одной рукой, связанной за спиной: грибковые инфекции, как известно, устойчивы к лечению, проникают глубоко в роговицу, на культивирование уходит дни и недели на лечение, а есть только один коммерчески доступное противогрибковое средство, а для производства остальных препаратов требуется аптека. Однако, несмотря на эти препятствия, своевременная диагностика и быстрое лечение могут дать хороший результат.В этой статье специалисты по роговице рассказывают, как на ранней стадии диагностировать грибковые инфекции и правильно их лечить.

Конец диагноза

Врачи говорят, что вы увеличиваете свои шансы на спасение роговицы, если рано поймаете грибок и сильно поразите его лекарствами. Вот их советы:

• Следите за факторами риска. «Основным фактором риска является место, где работает врач, и где пациент живет или недавно побывал», — говорит Фрэнсис Ма, доктор медицины, специалист по роговице в клинике Скриппса в Ла-Хойя, Калифорния.«Грибковые инфекции, в частности грибковый кератит, гораздо чаще встречаются в жарких и влажных регионах. Если пациент с язвой говорит, что он недавно ездил в Сингапур, например, это должно вызвать у вас подозрение на грибковую причину, поскольку это может быть регион, где она началась. Второй фактор, о котором нужно знать, — это история. В частности, распространенным фактором будут сельскохозяйственные причины или причины, связанные с травмой растений. Кроме того, частым фактором может быть использование или неправильное использование контактных линз ».

Пересадка роговицы в анамнезе, как и в этом случае, является фактором риска грибковой инфекции. (Изображение любезно предоставлено Садир Ханнуш, Мэриленд)

Грибок также может процветать в условиях пониженного иммунитета. «Фактором риска может быть иммунодефицит, связанный с биологическим раком, ВИЧ / СПИДом или диабетом, или из-за лекарств», — говорит Садир Ханнуш, доктор медицинских наук, лечащий хирург в отделении роговицы в Wills Eye Institute. «Причины приема лекарств могут возникать у пациентов с трансплантатами при иммуномодуляции в глазу или при системной иммуномодуляции таким агентом, как такролимус.”

Нестабильная глазная поверхность также может стать почвой для грибковой инфекции. «Другая клиническая ситуация, к которой следует относиться с осторожностью, включает роговицу, при которой глазное заболевание является хроническим, с измененными ощущениями, способствующими нездоровой глазной поверхности, что может способствовать заражению дрожжами, в частности Candida, или другими грибами», — утверждает Терренс О’Брайен, доктор медицины. , профессор офтальмологии Глазного института Баскома Палмера Медицинской школы Миллера Университета Майами. «Мы также наблюдали грибковый кератит после LASIK с созданием лоскута и связанной с этим денервацией, а также после трансплантации роговицы, при которой роговичные нервы пациента повреждены, присутствует инородный материал в виде швов и сопутствующее использование актуальный кортикостероид.”

• Грибковые признаки. Врачи говорят, что у грибковых инфекций есть некоторые особенности. «С бактериями и даже с Acanthamoeba это действительно острый процесс», — говорит д-р Ма. «Глаз сегодня будет нормальным, а на следующий день будет болезненным со значительным воспалением. Для роста грибов требуется время, поэтому, если пациент говорит, что его состояние улучшается в течение нескольких недель, это может вызвать у вас подозрение на грибок.

«При грибке вы увидите поражение спутника», — сказал д-р.Ма продолжает. «Это точечные участки инфекции на роговице. Тогда инфекция будет распространяться и проникать глубже, чем обычно проникают бактерии ». Врачи также советуют проявлять осторожность при язвах с перистыми краями, которые связаны с возникающими и исчезающими эндотелиальными дефектами. В некоторых случаях, говорят они, эпителий на самом деле не поврежден, а под ним растет грибковая язва. «Кроме того, — говорит доктор Ханнуш, — при грибковом кератите глаза часто намного тише, чем вы ожидали бы при бактериальной инфекции.Поэтому, если я вижу плотный инфильтрат, перистый или нет, с неповрежденным эпителием — или даже без неповрежденного эпителия — с относительно спокойным глазом, я сначала думаю об атипичном кератите, то есть небактериальном, а именно грибковом ».

Культуры, пятна и тесты

Специалисты по роговице утверждают, что для постановки окончательного диагноза до начала лечения необходимы анализы.

• Пятна. Для быстрого подтверждения возможны пятна. «Окрашивание по Граму, особенно окрашивание КОН, — это то, что я делаю специально для грибка, особенно когда я не уверен, что это за микроб, — говорит Коллин Халпенни, доктор медицины, доцент офтальмологии Медицинского колледжа Джефферсона в Филадельфии. Доктор О’Брайен добавляет, что можно использовать и другие диагностические красители. «Окрашивание по Гимзе может быть полезным для идентификации грибковых фрагментов гиф», — говорит он. «Кроме того, метенаминовое серебро Гомори — это краситель, который помогает визуализировать фрагменты гиф, а калькофлуор белый также можно использовать для выделения клеточной стенки грибов.”

• Культуры. Обычно легко получить образец для культивирования, если патогеном является грибок, говорят врачи. «Если эпителий не поврежден, вам придется сначала очистить его», — говорит доктор Ханнуш. «И вам придется довольно агрессивно царапать. Когда вы получаете образец, идеальной питательной средой является агар Сабуро, но грибок часто будет расти на тиоакрилатном бульоне или кровяном агаре ». Агар Сабуро является предпочтительным, поскольку он содержит антибактериальный агент и, таким образом, способствует росту грибков.

Возможны также случаи полимикробной инфекции. «В таких случаях вам необходимо поместить материал на несколько селективных питательных сред, таких как кровяной агар, шоколадный агар, агар Сабуро, инфузия мозг-сердце / гентамицин и тиоловый бульон», — говорит д-р О’Брайен.

Доктор Ма говорит, что ваша культура может повлиять на результаты. «Никогда не нужно культивировать самый центр язвы», — говорит он. «Это потому, что обычно все, что остается в центре, — это некротическая ткань, и на самом деле вы не получаете так много организма.Вместо этого вы хотите культивировать края язвы. По возможности возьмите немного жизнеспособного эпителия и положите его на чашку с культурой. Кроме того, не стоит приближаться к основанию язвы, потому что, если произойдет некоторое таяние, это может вызвать перфорацию роговицы ».

В случаях, когда эпителий не поврежден, некоторые клиницисты говорят, что вы все еще можете получить материал для культивирования, не очищая верхний слой роговицы. «Если поверхность не вовлечена, но есть разветвляющиеся нитчатые инфильтраты глубоко в роговице, может быть полезен один метод, связанный с проведением стерильного шва», — говорит д-р.О’Брайен. «Через роговицу на уровне предполагаемого инфильтрата можно провести шелковую нить 8-0. Затем вы можете осторожно удалить шовный материал, прошедший через зону подозрения, и с помощью стерильных ножниц отрезать его кусочки и поместить непосредственно на питательную среду для отправки в микробиологическую лабораторию ».

• Биопсия. В некоторых случаях, по словам специалистов по роговице, микробиологические культуры не дают результатов, и биопсия может помочь поставить диагноз.Доктор О’Брайен объясняет методы выполнения ручной биопсии. «Можно использовать одноразовый стерильный дерматологический пробойник для кожи определенного диаметра», — говорит он. «Пробойник используется для получения материала из роговицы, а затем его отправки на микробиологию, гистопатологию или даже молекулярную микробиологию с тестированием ПЦР. В других случаях вы можете использовать щипцы 0,12, чтобы захватить край инфильтрата, а затем использовать стерильное одноразовое лезвие Барда-Паркера № 11 для выполнения биопсии после бритья ».

Др.О’Брайен добавляет, что в последнее время можно использовать фемтосекундный лазер для точного, менее инвазивного и безопасного взятия пробы из определенной области роговицы для биопсии.

Лечение

Агент или агенты, используемые для устранения грибковой язвы, зависят от разновидности грибка, с которым вы имеете дело, говорят эксперты. Единственным коммерчески доступным агентом является натамицин (Natacyn, Alcon), а остальные должны быть смешаны. Вот советы по лечению.

• Лечебная терапия. «Для инфекции, которая не является нитчатой ​​или в основном дрожжевой, которая чаще всего является Candida, я выбрал бы местный амфотерицин 0,15%, который может приготовить большинство аптек», — говорит доктор Халфпенни. «Капсофунгин 0,5% для местного применения также может быть приготовлен в некоторых аптеках, если амфотерицин слишком токсичен. Однако капсофунгин дороже и его труднее достать ».

Поскольку грибковые инфекции имеют тенденцию к глубокому развитию, перфорация роговицы представляет собой постоянную угрозу. (Изображение любезно предоставлено Daljit Singh, MS, DSc.)

Врачи говорят, что в отношении мицелиальных грибов они сначала обращались к вориконазолу, но все это изменилось в результате недавнего многоцентрового исследования по лечению микотических язв. В испытании натамицин превзошел вориконазол, при этом пациенты с натамицином с меньшей вероятностью страдали перфорацией или нуждались в терапевтической проникающей кератопластике. ¹

«Для мицелиального грибка я выбрал бы 5% натамицин или 1% вориконазол», — говорит д-р.Полпенни. «Однако, поскольку результаты MUTT были опубликованы, я предпочитаю начинать с местного натамицина. Как для нитчатых, так и для нефиламентозных капель я обычно рекомендую использовать капли ежечасно круглосуточно в течение первой недели, а затем каждые два часа после этого, в зависимости от реакции пациента. Клиническое улучшение часто может занять несколько недель, поэтому я не спешу снижать дозу, если капли не проявляют значительной токсичности ».

Одной из проблем при лечении грибковых язв является эпителий, поскольку в некоторых случаях он может быть неповрежденным.«Ни натамицин, ни амфотерицин не проникают через роговицу», — говорит доктор Халфпенни. «Итак, если эпителий довольно хорошо зажил, когда вы видите пациента, но у него вырос грибок, я обычно соскребу покрывающий эпителий перед лечением. Но если у него есть дефект эпителия, я не буду царапать.

Другая проблема лечения заключается в том, что грибковые язвы часто бывают глубокими и могут потребовать двойного подхода к лечению. «Я обычно начинаю всех пациентов с более глубокими язвами принимать внутрь вориконазол в дозе 400 мг b.i.d., — говорит доктор Халфпенни. «Тем не менее, им необходимо сдавать функциональные пробы печени на исходном уровне и проверять их каждые две недели».

Наконец, при очень глубоких язвах некоторые врачи используют интрастромальную противогрибковую инъекцию. «Если инфекция очень глубокая и вы не думаете, что у вас хорошее местное проникновение, вы можете ввести интрастромальный вориконазол», — говорит доктор Халфпенни. «Это было показано, что это безопасно, но не намного эффективнее, чем местный вориконазол в очень небольших исследованиях». Эксперты по роговице говорят, что в целом они избегают использования стероидов для лечения грибковых язв, поскольку они, как было показано, снижают эффективность противогрибковой терапии.

Клиницисты говорят, что наблюдение за пациентом на терапии столь же интенсивно, как и сама терапия. «Одно из изречений в отношении терапии состоит в том, что она может ухудшиться прежде, чем станет на самом деле лучше», — говорит доктор О’Брайен. «Это потому, что когда лечение начинает убивать грибки, в роговице усиливается воспалительная реакция. На самом деле это признак некоторого улучшения — он просто более воспален, но вы не видите распространения грибка. Положительными признаками клинического ответа являются уплотнение инфильтрата, отсутствие признаков непрерывного распространения и контроль сателлитных поражений.”

Клиницисты говорят, что они будут наблюдать за пациентами ежедневно или через день, пока они получают почасовое лечение, распределяя посещения на еженедельные или раз в две недели, если язва реагирует на лечение и начинает консолидироваться. Лечение могло длиться месяцами.

• Лечебный трансплантат. Несмотря на все усилия офтальмолога, лечение оказывается неэффективным в 15–36% случаев. ^2,3 Когда это происходит, необходима терапевтическая кератопластика.Вот советы специалистов для специалистов по роговице, выполняющих один из таких трансплантатов.

Приближаясь к трансплантату, доктор Халфпенни имеет несколько соображений, которые она имеет в виду. «Старайтесь, чтобы трансплантат был как можно меньше, потому что вполне вероятно, что вам понадобится вторичный оптический трансплантат позже, и вы не хотите, чтобы эта область стала васкуляризованной и не позволяла вторичный трансплантат», — говорит она. «Вы должны обеспечить при трепанации свободный край не менее 1–1,5 мм и быть готовым при необходимости децентрировать трансплантат.Кроме того, вы хотите оставить факик пациента, даже если у него есть начало катаракты, чтобы создать барьер для дальнейшего проникновения грибка или эндофтальмита. После операции продолжайте пероральную или местную противогрибковую терапию и избегайте местных или пероральных стероидов в течение как минимум двух-трех дней. Вы также должны агрессивно контролировать внутриглазное давление с помощью лекарств в послеоперационный период, поскольку известно, что грибы разрушают ткань трабекулярной сети. В свете этого пациенту может потребоваться посещение специалиста по глаукоме или даже послеоперационная операция по поводу вторичной глаукомы.”

Д-р О’Брайен надеется, что в связи с пугающим течением грибковой инфекции глаза представляет собой глобальную угрозу здоровью роговицы, в скором времени будут достигнуты значительные успехи в этой области. «Мы отчаянно нуждаемся в более эффективных противогрибковых средствах, которые действуют быстрее, более эффективно проникают в ткани глаза и имеют меньше медицинских неудач», — говорит он. «Мы должны открывать и разрабатывать новые соединения с новыми механизмами действия, большей противогрибковой активностью и меньшей цитотоксичностью». РАССМОТРЕНИЕ

<sup>1.Праджня Н.В., Кришнан Т., Маскаренхас Дж. И др. Исследование лечения грибковой язвы: рандомизированное исследование, сравнивающее натамицин и вориконазол. JAMA Ophthalmol 2013; 131: 4: 422-29.
2. Анане С., Бен Айед Н., Малек И. и др. Кератомикоз в районе Туниса: эпидемиологические данные, методы диагностики и лечения [статья на французском языке]. Ann Biol Clin (Париж) 2010; 68: 4: 441-47.
3. Праджня Н.В., Маскаренхас Дж., Кришнан Т. и др. Сравнение натамицина и вориконазола для лечения грибкового кератита.Arch Ophthalmol 2010; 128: 6: 672-78.</sup>

Грибковый кератит: история вопроса, патофизиология, эпидемиология

Хейнс К.А., Вестерненг Т.Дж., Фелл Дж.В., Моенс В. Быстрое обнаружение и идентификация патогенных грибов путем амплификации большой субъединицы рибосомной ДНК с помощью полимеразной цепной реакции. J Med Vet Mycol . 1995 сентябрь-октябрь. 33 (5): 319-25. [Медлайн].

Ваддавалли П.К., Гарг П., Шарма С., Сангван В.С., Рао Г.Н., Томас Р. Роль конфокальной микроскопии в диагностике грибкового и акантамебного кератита. Офтальмология . 2011 января 118 (1): 29-35. [Медлайн].

Мацумото Ю., Мурат Д., Кодзима Т. , Шимазаки Дж., Цубота К. Сравнение местного местного применения микафунгина или флуконазола при лечении грибкового кератита Candida. Br J Офтальмол . 2011 Октябрь 95 (10): 1406-9. [Медлайн].

Accensi F J, Cano L, Figuera, ML Abarca и FJ. Cabañes. Новые методы ПЦР для дифференциации видов в агрегате Aspergillus niger. FEMS Microbiol. Lett . 1999. 180: 191–196.

Alexandrakis G, Jalali S, Gloor P. Диагностика фузариозного кератита на животной модели с использованием полимеразной цепной реакции. Br J Офтальмол . 1998 Март 82 (3): 306-11. [Медлайн].

Avunduk AM, Beuerman RW, Varnell ED, Kaufman HE. Конфокальная микроскопия кератита Aspergillus fumigatus. Br J Офтальмол . 2003 Апрель 87 (4): 409-10. [Медлайн].

Борн MJ, Elliott JH, O’Day DM. Лечение окулярным флуконазолом эндофтальмита Candida parapsilosis после неудачного интравитреального введения амфотерицина B. Arch Ophthalmol . 1993 Октябрь 111 (10): 1326-7. [Медлайн].

Chen YC, Eisner JD, Kattar MM, Rassoulian-Barrett SL, LaFe K, Yarfitz SL, et al. Идентификация важных с медицинской точки зрения дрожжей с использованием основанного на ПЦР обнаружения полиморфизмов последовательностей ДНК во внутренней транскрибируемой области спейсера 2 генов рРНК. Дж. Клин Микробиол . 2000 июн.38 (6): 2302-10. [Медлайн].

Чоудхари А., Сингх К. Спектр грибкового кератита в Северной Индии. Роговица . 2005 24 января (1): 8-15. [Медлайн].

Donnenfeld ED, Perry HD, Snyder RW, Moadel R, Elsky M, Jones H. Интракорнеальная, водянистая жидкость и проникновение в стекловидное тело местного и перорального офлоксацина. Арк офтальмол . 1997 Февраль 115 (2): 173-6. [Медлайн].

Driebe WT Jr, Mandelbaum S, Forster RK, Schwartz LK, Culbertson WW.Псевдофакический эндофтальмит. Диагностика и лечение. Офтальмология . 1986 апр. 93 (4): 442-8. [Медлайн].

Данлоп А.А., Райт Э.Д., Ховладер С.А., Назрул И., Хусейн Р., Макклеллан К. Гнойная язва роговицы в Бангладеш. Проведено исследование 142 случаев с изучением микробиологического диагноза, клинико-эпидемиологических особенностей бактериального и грибкового кератита. Aust N Z J Ophthalmol . 1994 Май. 22 (2): 105-10. [Медлайн].

Einsele H, Hebart H, Roller G, Löffler J, Rothenhofer I, Muller CA.Обнаружение и идентификация грибковых патогенов в крови с помощью молекулярных зондов. Дж. Клин Микробиол . 1997 июн. 35 (6): 1353-60. [Медлайн].

webmd.com»> Эстеве-Зарзосо Б., Беллох С., Урубуру Ф., Кверол А. Идентификация дрожжей с помощью ПДРФ-анализа гена 5.8S рРНК и двух рибосомных внутренних транскрибируемых спейсеров. Int J Syst Bacteriol . 1999, январь, 49, Pt 1: 329-37. [Медлайн].

Феррер С. С., Фрасес Ф, Колом, Дж. Л. Алио, Дж. Л. Абад и М. Э.Мулет. Молекулярная диагностика грибковых инфекций глаза на животной модели. Ред. Iberoam. Микол . 2000. 17: S134.

Florakis GJ, Moazami G, Schubert H, Koester CJ, Auran JD. Сканирующая щелевая конфокальная микроскопия грибкового кератита. Арк офтальмол . 1997 ноябрь 115 (11): 1461-3. [Медлайн].

Форстер Р.К., Эбботт Р.Л., Гелендер Х. Лечение инфекционного эндофтальмита. Офтальмология . 1980 апр. 87 (4): 313-9.[Медлайн].

webmd.com»> Гарг П., Махеш С., Бансал А.К., Гопинатан У., Рао Г.Н. Грибковая инфекция из самозаклеивающегося разреза без швов при хирургии катаракты. Офтальмология . 2003 ноябрь 110 (11): 2173-7. [Медлайн].

Guzek JP, Roosenberg JM, Gano DL, Wessels IF. Влияние носителя на проникновение в роговицу растертых в порошок кетоконазола и итраконазола. Лазеры офтальмологические . 1998 29 ноября (11): 926-9. [Медлайн].

Идальго Дж. А., Алангаден Дж. Дж., Элиотт Д., Акинс Р. А., Пуклин Дж., Абрамс Г.Диагностика грибкового эндофтальмита путем обнаружения ДНК Candida albicans во внутриглазной жидкости с использованием анализа видоспецифической полимеразной цепной реакции. Дж. Заражение Дис. . 2000 Март 181 (3): 1198-201. [Медлайн].

Джегер Е.Е., Кэрролл Н.М., Чоудхури С., Данлоп А.А., Таулер Н. М., Матесон М.М. и др. Быстрое обнаружение и идентификация видов Candida, Aspergillus и Fusarium в образцах глаз с помощью вложенной ПЦР. Дж. Клин Микробиол . 2000 августа 38 (8): 2902-8.[Медлайн].

Иордания JA. ПЦР-идентификация четырех важных с медицинской точки зрения видов Candida с использованием одной пары праймеров. Дж. Клин Микробиол . 1994 Декабрь 32 (12): 2962-7. [Медлайн].

Кауфман, Калифорния, Брэдли, С.Ф., Вайн, АК. Кандидозный эндофтальмит, связанный с имплантацией интраокулярных линз: эффективность терапии флуконазолом. Микозы . 1993 январь-февраль. 36 (1-2): 13-7. [Медлайн].

Кейхани К., Сеедор Дж. А., Шах М. К., Террачиано А. Дж., Риттербанд, округ Колумбия.Заболеваемость грибковым кератитом и эндофтальмитом после проникающей кератопластики. Роговица . 2005 24 апреля (3): 288-91. [Медлайн].

Knox CM, Cevellos V, Dean D. Типирование рибосомной ДНК 16S для идентификации патогенов у пациентов с бактериальным кератитом. Дж. Клин Микробиол . 1998 Декабрь 36 (12): 3492-6. [Медлайн].

Кумар М, Шукла ПК. Использование ПЦР нацеливания на внутренние транскрибируемые спейсерные области и анализ однонитевого конформационного полиморфизма вариации последовательностей в различных регионах генов рРНК у грибов для быстрой диагностики грибкового кератита. Дж. Клин Микробиол . 2005 Февраль 43 (2): 662-8. [Медлайн].

Lott TJ, Kuykendall RJ, Reiss E. Анализ нуклеотидной последовательности рДНК 5.8S и прилегающей области ITS2 Candida albicans и родственных видов. Дрожжи . 1993, 9 (11): 1199-206. [Медлайн].

webmd.com»> Мабон М. Грибковый кератит. Int Ophthalmol Clin . 1998. 38 (4): 115-23. [Медлайн].

Макимура К., Мураяма С.Ю., Ямагути Х.Обнаружение широкого спектра важных с медицинской точки зрения грибов с помощью полимеразной цепной реакции. J Med Microbiol . 1994 Май. 40 (5): 358-64. [Медлайн].

Miyakawa Y, Mabuchi T, Kagaya K, Fukazawa Y. Выделение и характеристика видоспецифического фрагмента ДНК для обнаружения Candida albicans с помощью полимеразной цепной реакции. Дж. Клин Микробиол . 1992, 30 апреля (4): 894-900. [Медлайн].

Охрави Н., Адамсон П., Мант Р., Матесон М.М., Мидгли Г., Таулер Х.М.Полимеразная цепная реакция и полиморфизм длины рестрикционных фрагментов опосредуют обнаружение и видообразование Candida spp, вызывающих внутриглазную инфекцию. Инвест офтальмол Vis Sci . 1998 Май. 39 (6): 859-66. [Медлайн].

Panda A, Sharma N, Das G, Kumar N, Satpathy G. Грибковый кератит у детей: эпидемиологическая и микробиологическая оценка. Роговица . 1997 Май. 16 (3): 295-9. [Медлайн].

Праджна Н.В., Джон Р.К., Нирмалан П.К., Лалита П., Шринивасан М.Рандомизированное клиническое испытание, сравнивающее 2% эконазол и 5% натамицин для лечения грибкового кератита. Br J Офтальмол . 2003 Октябрь 87 (10): 1235-7. [Медлайн].

Prajna NV, Nirmalan PK, Mahalakshmi R, Lalitha P, Srinivasan M. Одновременное использование 5% натамицина и 2% эконазола для лечения грибкового кератита. Роговица . 2004 23 ноября (8): 793-6. [Медлайн].

Reiss E, Tanaka K, Bruker G, Chazalet V, Coleman D, Debeaupuis JP.Молекулярная диагностика и эпидемиология грибковых инфекций. Med Mycol . 1998. 36 Suppl 1: 249-57. [Медлайн].

Riggsby WS, Торрес-Бауза LJ, Wills JW, Townes TM. Содержание ДНК, кинетическая сложность и вопрос плоидности Candida albicans. Mol Cell Biol . 2 июля 1982 г. (7): 853-62. [Медлайн].

Роза Р. Х. младший, Миллер Д., Альфонсо ЕС. Меняющийся спектр грибкового кератита на юге Флориды. Офтальмология .1994 июн.101 (6): 1005-13. [Медлайн].

Сринивасан М. Грибковый кератит. Curr Opin Ophthalmol . 2004 15 августа (4): 321-7. [Медлайн].

Tang CM, Holden DW, Aufauvre-Brown A, Cohen J. Обнаружение Aspergillus spp. полимеразной цепной реакцией и ее оценкой в ​​жидкости бронхоальвеолярного лаважа. Am Rev Respir Dis . 1993 ноябрь 148 (5): 1313-7. [Медлайн].

webmd.com»> Thomas PA. Грибковые инфекции роговицы. Глаз . 2003 17 ноября (8): 852-62. [Медлайн].

Упадхьяй М.П., ​​Кармачарья П.К., Коирала С., Туладхар Н.Р., Брайан Л.Е., Смолин Г. Эпидемиологические характеристики, предрасполагающие факторы и этиологический диагноз язвы роговицы в Непале. Ам Дж. Офтальмол . 1991 15 января. 111 (1): 92-9. [Медлайн].

Weissgold DJ, Orlin SE, Sulewski ME, Frayer WC, Eagle RC Jr. Грибковый кератит с отсроченным началом после эндофтальмита. Офтальмология .1998 Февраль 105 (2): 258-62. [Медлайн].

White TJ, Bruns T, Lee S, Tailor S. Амплификация и прямое секвенирование генов грибковой рибосомной РНК для филогенетики. Innins MA, Гельфанд DH, Sninsky JJ, White TJ, ред. Протоколы ПЦР. Руководство по методам и применению . Сан-Диего, Калифорния: Academic Press, Inc; 1990. 315-22.

Сочетание симптомов, анамнез указывает на диагноз грибкового кератита

01 сентября 2006 г.

Читать 7 мин.

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ ПО E-mail

Получать электронное письмо, когда новые статьи публикуются на

Укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать сообщения о публикации новых статей.Подписаться Нам не удалось обработать ваш запрос. Пожалуйста, повторите попытку позже. Если проблема не исчезнет, ​​обратитесь по адресу [email protected].

Вернуться в Хилио

Многие организмы обладают способностью инфицировать ткани человека. У некоторых из этих организмов развилась предрасположенность к тканям глаза. Бактерии, вирусы и, реже, грибки приводят к легким и тяжелым инфекциям, которые могут поражать придатки и поверхностную поверхность глаза, а также ткани заднего полюса.

Микозы , инфекции, вызываемые грибками, поражающими роговицу, в последнее время наблюдаются во все возрастающем количестве, вызывая обеспокоенность и повышая общую осведомленность об их признаках, симптомах и клинических навыках, необходимых для лечения этих потенциально опасных для зрения заболеваний.

Как представители королевства Монера, бактерии представляют собой прокариотические клетки, то есть клетки без ядер, которые обладают мембраносвязанными органеллами. Существенно различающееся и состоящее из более чем 100 000 видов, царство грибов — это эукариотические клетки — одноклеточные или многоклеточные организмы, клетки которых содержат отчетливое мембраносвязанное ядро.Хотя многие грибы способны вызывать глазные инфекции, общие представители принадлежат к типу или подразделению Ascomycota. Эти грибы ( Fusarium, Candida, Curvularia и Aspergillus ) обладают способностью вызывать вирулентные инфекции роговицы.

Подобно способу посева бактериальных глазных инфекций, грибковые инфекции могут передаваться травматическими событиями (когда организмы заражают непосредственно контактировавшую глазную ткань, которая находится в непосредственной близости с растениями или растительными веществами), глазными и / или системными заболеваниями, из-за вредных привычек, связанных с ношением контактных линз, или из-за повышенной восприимчивости хозяина в результате применения местных или пероральных кортикостероидов.

Фузариоз кератит: Инфильтраты роговицы, вызванные грибками, обычно имеют грязно-серый цвет с соответствующими гранулированными или перистыми инфильтратами, что придает поражению нечеткие края. Изображение: University of Iowa

Этиология инфекции

Дифференциация этиологии инфекции начинается с тщательного сбора анамнеза и также требует знания традиционных клинических проявлений. В случаях, связанных с неспецифическими клиническими признаками, даже перед лучшим клиницистом может возникнуть дилемма, когда для постановки диагноза будут использоваться только клинические данные.

Хотя грибковые инфекции протекают медленно и прогрессируют, они могут проявляться через 24–48 часов после первого контакта. Инфильтраты роговицы, вызванные грибками, обычно имеют грязно-серый цвет с соответствующими зернистыми или перистыми инфильтратами, из-за чего края поражения нечеткие. Минимальное воспаление стромы является отличительной чертой, но тяжелые инфекции могут нарушить это правило, нанеся достаточно повреждений, чтобы сделать роговицу полностью непрозрачной.Наличие реакции передней камеры или гипопиона также означает повышенный уровень вирулентности.

Лабораторные исследования, используемые для точного подтверждения диагноза глазной грибковой инфекции, включают окрашивание и посев. Окраски по Граму и Гимзе обычно используются для исключения грибковой инфекции глаза. Окрашивание метенамином серебра по Гомори и окрашивание периодической кислотой по Шиффу считаются необязательными. Культуральная среда может включать агар с декстрозой Сабуро без циклогексамида, кровяной агар при комнатной температуре или агар для инфузии мозга и сердца с добавлением гентамицина.

Следует отметить, что при подозрении на грибковую инфекцию роговицы необходимы соскоб из глубины основания язвы. Большинство грибковых организмов демонстрируют образец роста в течение недели после культивирования, но для некоторых грибов может потребоваться до 2 недель. Если лабораторные анализы отрицательны, несмотря на сильное подозрение на грибковую инфекцию, может быть показана биопсия роговицы.

Симптомы грибкового кератита

Общие симптомы у пациента с грибковым кератитом могут включать боль, светобоязнь, инъекцию в конъюнктиву, слезотечение, выделения (обычно слизисто-гнойные) и ощущение инородного тела.Кроме того, эти пациенты могут сообщать о стойких проблемах с роговицей, которые уже не помогли традиционным режимам лечения инфекциями. Эти данные в сочетании с дополнительными историческими и клиническими данными убедительно указывают на диагноз грибкового кератита.

Лечение грибкового кератита

При постановке диагноза грибкового кератита препаратом выбора при поражении передней стромы является Натацин (5% -ная офтальмологическая суспензия натамицина, Алкон) — единственный коммерчески доступный офтальмологический противогрибковый препарат.Обычная дозировка Natacyn составляет одну каплю каждый час в бодрствующем состоянии и каждые 2 часа ночью, пока не будет наблюдаться улучшение состояния поражения. В дополнение к противогрибковым препаратам, циклоплегия с использованием атропина 1%, гоматропина 5% или скополамина 0,25% помогает уменьшить боль.

В случае, если воспалительная реакция приводит к значительному повышению внутриглазного давления, для неотложной терапии рекомендуется местный бета-блокатор. Очень важно избегать использования местных стероидов при лечении грибкового кератита.Если пациент использует стероид для местного применения для лечения отдельного состояния глаз, прием этого лекарства следует резко уменьшить.

В случае обострения или стойкого грибкового кератита следует направить к специалисту по роговице для более агрессивного медикаментозного или хирургического лечения. Медикаментозная терапия является сложной задачей даже для самого опытного специалиста, поскольку организмы могут быть устойчивыми к рецептурным препаратам. Фактически, низкая растворимость этих препаратов в растворе снижает их способность проникать в ткани глаза.Важно отметить, что большинство препаратов вызывают местную глазную токсичность даже при консервативном применении.

Варианты лечения не по назначению

Парентеральным противогрибковым препаратом, который использовался для местной офтальмотерапии, является амфотерицин B. Хотя такое применение не по назначению, оно считается обычным и в рамках стандартов лечения. Обычно 0,15% раствор готовят из коммерческого препарата для внутривенного введения, предназначенного для системного применения. Амфотерицин, классифицируемый как полиен, нарушает функцию клеточной мембраны грибов и изменяет ее избирательную проницаемость, позволяя улетучиваться важным внутриклеточным компонентам.

Неотложная помощь с использованием 0,15% раствора обычно включает дозирование каждый час в бодрствующем состоянии и каждые 2–4 часа в течение ночи. Возможно, самым большим ограничением амфотерицина является то, что он имеет склонность вызывать токсичность на поверхности глаза из-за носителя, который поддерживает лекарство в растворе. Этот побочный эффект создает серьезные проблемы, когда требуется длительный период терапии (от 6 до 10 недель).

В дополнение к местному применению амфотерицина субконъюнктивальные инъекции также использовались не по назначению при лечении грибковых язв роговицы.Здесь основным побочным эффектом является то, что эти инъекции могут привести к стойкому пожелтению роговицы, а также появлению конъюнктивальных узелков цвета лосося в месте инъекции.

Миконазол использовался субконъюнктивально, внутривенно и в препаратах для местного применения от 0,1% до 1,0% для лечения не по прямому назначению инфекций роговицы, вызываемых Candida и Aspergillus . Противогрибковый механизм действия миконазола включает фунгистатический компонент, который изменяет проницаемость клеточной мембраны, наряду с фунгицидным действием, повреждающим клеточную мембрану.В отличие от амфотерицина, миконазол не вызывает серьезных побочных реакций со стороны глазной ткани.

Клотримазол также может быть приготовлен в виде раствора от 0,1% до 1,0% для лечения грибкового кератомикоза не по назначению. Считается достаточно эффективным для лечения инфекций, вызванных Aspergillus , клотримазол используется по одной капле каждый час во время бодрствования. Противогрибковые препараты нового поколения, которые рассматриваются для лечения грибковых инфекций роговицы, включают итраконазол, вориконазол и микафунгин.

Последний вариант: хирургия

Когда медицинское вмешательство не удается, хирургическим методом, используемым для сохранения зрения, является проникающая кератопластика. Вероятность успеха в этих случаях зависит от здоровья роговицы хозяина, неповрежденная инфраструктура которой необходима для поддержки трансплантата.

Грибковый кератит — это потенциально опасное для зрения заболевание, которое требует своевременной точной диагностики и активного лечения для ограничения осложнений. При правильной диагностике и лечении он поддается лечению местными методами; однако в сложных или упорных случаях его следует направить к специалисту по роговице, чтобы можно было изучить все варианты.

Для получения дополнительной информации:

• Эндрю С. Гурвуд, OD, FAAO, является доцентом клинических наук и лечащим врачом-оптометристом Глазного института Пенсильванского колледжа оптометрии. Он также является членом клинического персонала отделения офтальмологии Медицинского центра Альберта Эйнштейна в Филадельфии. В 1998 году Американская ассоциация оптометристов признала его молодым оптометристом года. С доктором Гурвудом можно связаться в колледже оптометрии Пенсильвании, 1200 West Godfrey Ave., Филадельфия, Пенсильвания, 19141; (215) 276-6134; факс: (215) 276-1329; электронная почта: Agurwood@pco. edu.
• Марк Д. Майерс, OD, FAAO, штатный оптометрист в южной части штата Нью-Джерси, занимается офтальмологической болезнью и практикует рефракционную хирургию. Он окончил ординатуру по оказанию первичной медицинской помощи в Глазном институте Пенсильванского колледжа оптометрии. С ним можно связаться по телефону (856) 691-8188. Доктора Гурвуд и Майерс не имеют прямого финансового интереса в продуктах, упомянутых в этой статье, и не являются оплачиваемыми консультантами для упомянутых компаний.

Рекомендуемая литература

• Аль-Мезейн Х., врач Вагонер, Исследовательская группа по пересадке роговицы офтальмологической больницы Короля Халеда. Повторная проникающая кератопластика: показания, выживаемость трансплантата и визуальный результат. Br J Офтальмол . 2006; 90 (3): 324-327.
• Бекингсейл П., Маврикакис I, Аль-Юсуф, Маврикакис Э., Дайя С.М. Проникающая кератопластика: результаты в отделении роговицы по сравнению с национальными данными. Br J Офтальмол . 2006; 90 (6): 728-731.
• Бхаратхи М.Дж., Рамакришнан Р., Васу С., Минакши Р., Паланиаппан Р. Эпидемиологические характеристики и лабораторная диагностика грибкового кератита. Трехлетнее исследование. Индийский J Ophthalmol . 2003; 51 (4): 315-321.
• Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC). Fusarium кератит — множественные состояния, 2006 г. MMWR Morb Mortal Wkly Rep . 2006; 55 (14): 400-401.
• Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC). Обновление: фузариозный кератит — США, 2005-2006 гг. MMWR Morb Mortal Wkly Rep . 2006; 55 (20): 563-564.
• Роговица: грибковый кератит. In: Kunimoto DY, Kunal D, Kunitkar KD, Makar M. The Wills Eye Manual: Office and Emergency Room Diagnosis and Treatment of Eye Disease , 4 ^th edition. Филадельфия, Пенсильвания: Липпинкотт Уильямс и Уилкинс; 2004: 57.
• Эллиот Д., Голламунди СР. Роговица: грибковый кератит. В: Варма Р. Основы ухода за глазами: Справочник Джона Хопкинса Уилмера . Филадельфия, Пенсильвания: Липпинкотт-Рэйвен; 1997: 177-178.
• Гарсия-Валенсуэла E, компакт-диск с песнями. Внутрироговая инъекция амфотерицина B при рецидивирующем грибковом кератите и эндофтальмите. Арочный офтальмол . 2005; 123 (12): 1721-1723.
• Kalavathy CM, Parmar P, Kaliamurthy J, et al. Сравнение местного применения итраконазола 1% и местного натамицина 5% для лечения мицелиального грибкового кератита. Роговица . 2005; 24 (4): 449-452.
• Кумари Н, Зесс А, Шахи СК. Исследование кератомикоза: наш опыт. Индийский Дж. Патол Микробиол .2002; 45 (3): 299-302.
• Лалита П., Праджна Н.В., Кабра А., Махадеван К., Сринивасан М. Факторы риска исходов лечения грибкового кератита. Офтальмология . 2006; 113 (4): 526-530.
• Мацумото Ю., Догру М., Гото Э., Фудзисима Х., Цубота К. Успешное местное применение нового противогрибкового средства, микафунгина, при лечении резистентных грибковых язв роговицы: отчет о трех случаях и обзор литературы. Роговица . 2005; 24 (6): 748-753.
• Микробиология и иммунология в Интернете, Медицинский факультет Университета Южной Каролины.Часть пятая: микология, главы с первой по пятую. Доступно по адресу http://pathmicro.med.sc.edu/book/welcome.htm.
• Мирза Ш., Харт, Калифорния. Грибковый кератит, вызванный fusarium solani. J Coll Physitors Surg Pak . 2005; 15 (9): 576-577.
• Mselle J. Использование местного клотримазола при кератомикозе человека. Офтальмология . 2001; 215 (5): 357-360.
• Ritterband DC, Seedor JA, Shah MK, Koplin RS, McCormick SA. Грибковый кератит в Нью-Йоркской больнице глаз и ушей. Роговица . 2006; 25 (3): 264-267.
• Сангван В.С., Рамамурти Б., Шах У, Гарг П., Шридхар М.С., Рао Г.Н. Исход отторжения трансплантата роговицы: 10-летнее исследование. Клинический Эксперимент Офтальмол . 2005; 33 (6): 623-627.
• Спонсель В., Чен Н., Данг Д. и др. Вориконазол для местного применения как новый метод лечения грибкового кератита. Противомикробные агенты Chemother . 2006; 50 (1): 262-268.
• Сринивасан М. Грибковый кератит. Curr Opin Ophthalmol. 2004; 15 (4): 321-327.
• Sukhija J, Jain AK. Результат терапевтической проникающей кератопластики при инфекционном кератите. Лазеры для офтальмологической хирургии. 2005; 36 (4): 303-309.
• Томас PA. Грибковые инфекции роговицы. Кембриджский офтальмологический симпозиум 2003; 17 (8): 852-862.

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ ПО E-mail

Получать электронное письмо, когда новые статьи публикуются на

Укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать сообщения о публикации новых статей.Подписаться Нам не удалось обработать ваш запрос. Пожалуйста, повторите попытку позже. Если проблема не исчезнет, ​​обратитесь по адресу customerservice@slackinc. com.

Вернуться в Хилио

Лечение проблемы: грибковый кератит

Продолжая колонку прошлого месяца «Грибковый кератит: извлеченные уроки» (ноябрь / декабрь 2011 г., Обзор роговицы и контактных линз), мы понимаем, что важно практиковать то, что мы проповедуем.Грибковый кератит — это состояние, к которому нельзя и не следует относиться легкомысленно — если не лечить, инфекция может привести к необратимой потере зрения. Поскольку инфекция очень быстро действует, даже в случаях, когда она точно диагностирована и лечится, многим пациентам может потребоваться терапевтическая проникающая кератопластика. В этой колонке будет представлен обзор текущих схем лечения и выделены возможные будущие методы лечения инфекционного заболевания.

Осведомленность — ключ к успеху

Хотя оптометристы не обязательно могут быть главными офтальмологами, лечащими грибковую инфекцию, способы предотвращения возникновения заболевания, зная образ жизни пациента, особенно в более тропическом или влажном климате, могут сыграть важную роль в борьбе с грибковыми инфекциями. кератит.Грибковый кератит часто лечат специалисты по роговице в центрах третичной медицинской помощи и глазных институтах, которые могут проводить посевы и использовать другие диагностические инструменты для проверки на грибковый кератит, такие как конфокальная микроскопия. Однако многие пациенты в сельской местности или из малообеспеченных слоев населения могут не иметь доступа к специалисту по роговице; поэтому знания оптометриста и его подозрения имеют решающее значение, поскольку они могут быть первыми, кто диагностирует заболевание. Учитывая, что случаи грибкового кератита обычно возникают у людей, носящих контактные линзы, оптометрист играет значительную роль, поскольку более 80 процентов пользователей контактных линз обращаются к окулисту за помощью.Свяжитесь с Lens Institute. Май 2003 г. Клиницисты, обследующие пользователей контактных линз с признаками грибкового кератита, должны искать тускло-серую роговицу; нагромождение эпителия; сухая, грубая текстура; и перистый ветвящийся узор. Если оптометрист подозревает грибковый кератит, он должен посоветовать своему пациенту немедленно прекратить ношение контактных линз и при необходимости направить пациента к офтальмологу. Знание того, когда следует направить пациента к офтальмологу или специалисту по роговице, является важным оружием в арсенале оптометриста, так же как и понимание объема доступных методов лечения.

Обычно грибки поражают здоровый глаз довольно редко. Но когда грибковые инфекции глаз действительно возникают, это может угрожать зрению. Ранняя диагностика важна для успешного лечения грибкового кератита. Необходимо подчеркнуть важность раннего выявления; Доказано, что лечение наиболее эффективно при его активном применении на ранних стадиях инфекции.

Текущее лечение

Подозрение — это один, если не самый важный аспект лечения и профилактики.Все врачи должны быть особенно внимательны к тем, кто носит контактные линзы. Медленное выявление и лечение болезни может резко ухудшить состояние пациента. В случаях грибкового кератита следует избегать системных и местных стероидов до тех пор, пока не станет абсолютным, что патоген исчез. На сегодняшнем рынке натамицин 5% является единственным коммерчески доступным местным агентом, показанным для лечения грибкового кератита, и широко используется при инфекциях мицелиальных грибов. Однако существуют и другие терапевтические методы лечения, которые включают как местные, так и пероральные противогрибковые препараты.Двумя наиболее часто назначаемыми противогрибковыми препаратами являются амфотерицин B, который обычно используется в основном для лечения патогенов Candida. Кроме того, флуцитозин может быть альтернативным лечением, используемым в сочетании с амфотерицином B или миконазолом.

Однако недавние исследования показали, что триазолы — и, в частности, вориконазол, противогрибковый агент широкого спектра действия, эффективный против дрожжей и плесени, — могут быть более эффективными, чем натамицин и амфотерицин B против грибов. Недавнее исследование Сиатири Х., Данешгар Ф., Сиатири Н., Ходабанде А.Эффекты интрастромальной инъекции вориконазола и местного вориконазола в лечении резистентного кератита Fusarium. Роговица. 2011 августа; 30 (8): 872-5. Комбинация вводимого и местного вориконазола показала эффективность в борьбе с инфекцией у пациентов с фузариозным кератитом. В серии случаев участвовали три пациента, у которых был устойчивый грибковый кератит, вызванный фузариозом, и каждому пациенту вводили раствор вориконазола путем интрастромальной инъекции, а также 5% натамицин для местного применения ежечасно и кетоконазол перорально дважды в день.У двух пациентов отмечалось значительное уменьшение размеров инфильтрации Fusarium.

Будущее лечения

Противогрибковые препараты часто могут плохо проникать через роговицу, поскольку их обычно вводят ежечасно в течение нескольких недель, днем ​​и ночью. Это может значительно увеличить несоблюдение режима лечения — фактор, который, как упоминалось выше, имеет решающее значение на этапах борьбы с грибковой инфекцией. Однако появляющиеся новые методы лечения направлены на изменение этого аспекта: одна из новых технологий — это контактные линзы, которые элюируют эконазол, противогрибковый препарат класса имидазолов.Чолино Дж. Б., Хадсон С. П., Моббс А. Н. и др. Прототип противогрибковой контактной линзы. Инвестируйте Ophthalmol Vis Sci. 2011 сентябрь; 52 (9): 6286-91. Линзы предназначены для лечения и профилактики грибковых инфекций глаза, и результаты показали, что высвобождение 16 мг эконазола убило 100% грибков в течение 21 дня. Противогрибковые контактные линзы обеспечивают одно-два удара, снижая нагрузку на лечение в дополнение к повышению приверженности пациента. Контактные линзы с эконазольным покрытием расширили бы набор инструментов офтальмолога для лечения грибкового кератита и последуют его примеру с новой волной комбинированных контактных линз и медикаментозного лечения, таких как K-линзы, контактные линзы с кетотифенированием, такие как анти- грибковые линзы, еще не утверждены FDA.

Обладание обширными знаниями в области профилактики, выявления и последовательного лечения заболеваний имеет неоценимое значение для офтальмолога. Оптометристы должны периодически получать информацию о различных заболеваниях, независимо от того, насколько они редки. Кроме того, о случаях фузариозного кератита следует сообщать в государственные и местные органы здравоохранения или непосредственно в Центры по контролю и профилактике заболеваний по телефону 800-893-0485.

Грибковый кератит — обзор

Кератит

Микотический кератит, или кератомикоз, представляет собой потенциально опасную для зрения грибковую инфекцию роговицы.В зависимости от исследуемой выборки было установлено, что грибы являются причиной 6–53% случаев язвенного кератита. Рассматриваемые как группа, дематиосные грибы следуют за видами Fusarium и Aspergillus среди наиболее распространенных этиологических агентов; Сообщалось, что кератит вызывают более 20 видов дематиосных из 11 родов. ¹⁵³

Случаи микотического кератита зарегистрированы во всем мире, но чаще встречаются в тропическом и субтропическом климате. Заболеваемость грибковым кератитом дематиас, по-видимому, носит сезонный характер, с пиком в теплые влажные месяцы в конце лета и начале осени. ¹⁵⁴ Большая часть пораженных людей выполняет сельскохозяйственные или другие работы на открытом воздухе, при этом среди грибковых кератитов, вызванных мицелиальными грибами, преобладают мужчины. Травма, во многих случаях кажущаяся незначительной, является основным предрасполагающим фактором. Чаще всего речь идет о растительных материалах, таких как ветви или листья (или предметы или механизмы, которые контактировали с почвой или растительностью).Другие механизмы травмы, такие как хирургические манипуляции или ссадины, вызванные контактными линзами, могут косвенно привести к грибковому кератиту, нарушая целостность эпителия роговицы. Использование антибактериальных средств или кортикостероидов может предрасполагать к грибковому кератиту или привести к худшему исходу в нераспознанных случаях. ¹⁵³

Пациенты с грибковым кератитом обычно обращаются за медицинской помощью в период от 1 до 21 дня заражения, в зависимости от организма, инокулята и иммунного статуса хозяина. Обычно они проявляются 5-10-дневной историей боли, светобоязнью, слезотечением и ощущением «инородного тела» в пораженном глазу. Кератит, вызванный более распространенными патогенами дематиас, обычно протекает слабо и медленно прогрессирует в течение нескольких недель. Однако заражение Lasiodiplodia theobromae обычно протекает гораздо более агрессивно.

Несмотря на вышеуказанные данные, клинически трудно различить бактериальный и грибковый кератит. По этой причине, а также из-за возможности развития угрожающих зрению осложнений, таких как эндофтальмит, очень важны ранняя диагностика под руководством офтальмолога и быстрое начало терапии.Лучший диагностический подход — получить соскоб с основания и краев язвы с помощью шпателя или хирургического лезвия для прямого микроскопического исследования и посева. Если получен неадекватный материал, биопсия роговицы может быть отправлена ​​на гистопатологию и посев. Препарат под микроскопом следует приготовить либо с 10–20% КОН, либо с одним из нескольких других красителей, включая калькофлуор белый, Гимза, периодическую кислоту Шиффа (PAS), гомори метенамин серебра (GMS) или лактофеноловый хлопковый синий, относительные достоинства из которых подробно обсуждаются Томасом. ¹⁵³ Пигментированные грибковые элементы должны быть очевидны в большинстве случаев грибкового кератита, вызванного дематиозными грибами. Подтверждение культуры обязательно; следует поддерживать высокий индекс подозрений в отношении возможных грибковых загрязнений. Значимые изоляты — это изоляты, обнаруженные на штриховых линиях, и их желательно изолировать более чем на одной чашке. К наиболее частым возбудителям кератита относятся Curvularia , Alternaria и Bipolaris видов и Lasiodiplodia theobromae .

Дематиозный грибковый кератит может поддаваться лечению только противогрибковой терапией, когда инфекция носит поверхностный характер. ¹⁵⁵ , но хирургическое вмешательство, включая кератопластику, часто требуется при более глубоких инфекциях. Противогрибковые препараты чаще всего назначают местно; из-за местной токсичности большинства препаратов субконъюнктивальные инъекции используются редко. Полиеновые препараты натамицин и амфотерицин B являются двумя наиболее часто используемыми агентами. 5% раствор натамицина считается препаратом выбора при грибковом кератите.Однако проникновение натамицина в ткани глаза является слабым, и поэтому он не рекомендуется при грибковых инфекциях глубоких глаз. Капли амфотерицина B (0,1–1%) можно приготовить из препарата для внутривенного введения, если коммерческий препарат недоступен. В случаях неэффективности лечения натамицином применялся амфотерицин B либо отдельно, либо в комбинации с 5-флуцитозином или азолом. Клинических испытаний, посвященных использованию комбинированной местной терапии, не проводилось.

Кинетика азольных соединений благоприятна в случаях более глубокого поражения глаз.Кетоконазол хорошо проникает через роговицу после перорального приема, и было показано, что комбинированное пероральное (600 мг / день) / местное (1%) введение является эффективным при лечении кератита Curvularia . Пероральный кетоконазол в сочетании с миконазолом местного применения был рекомендован в качестве возможного лечения первой линии при грибковом кератите. Пероральный итраконазол эффективен при лечении кератита Aspergillus , и имеется ограниченный опубликованный опыт применения итраконазола в отдельности или в комбинации с натамицином для лечения кератита, вызванного, в частности, дематиациновыми грибами.Флуконазол демонстрирует отличное проникновение в глаза (включая роговицу) при системном введении, но он имеет небольшую активность против дематиозных агентов, вызывающих глазные инфекции. Вориконазол хорошо проникает в глаза после местного и системного применения ¹⁵⁶ , и сообщалось об успешном лечении дематиозного грибкового кератита. ¹⁵⁷ Использование дополнительных местных кортикостероидов для предотвращения воспаления и сопутствующих рубцов было связано с плохими результатами и поэтому не рекомендуется. ¹⁵³

Эпидемиология, быстрое обнаружение и противогрибковая чувствительность к фузариозу и изолятам аспергилл из соскобов роговицы

Грибковая этиология кератита / язвы роговицы считается одной из ведущих причин заболеваний глаз, особенно в Индии, особенно в развивающихся странах. Что еще более важно, сообщается, что Fusarium и Aspergillus обычно связаны с язвой роговицы, и на этом фоне настоящая работа была предпринята для понимания текущей эпидемиологической тенденции этих двух грибковых кератитов.В течение периода реализации проекта у пациентов с подозрением на грибковый кератит было собрано 500 соскобов роговицы, из которых 411 (82,2%) оказались положительными на наличие бактерий, грибков и паразитов. Среди грибковых этиологий преимущественно определялись Fusarium (216, 52,5% от 411) и Aspergillus (68, 16,5% от 411). В то время как исследование выявило преобладание мужчин в отношении обоих грибковых кератитов, оно также показало, что полиеновые соединения (натамицин и амфотерицин B) и азолы были активны, соответственно, против Fusarium spp.и Aspergillus spp. Кроме того, 94,1% культур с подтвержденным кератитом Fusarium и, соответственно, 100% и 63,6% культур A. flavus и A. fumigatus были подтверждены мультиплексной ПЦР. Чувствительность ПЦР, использованной в настоящем исследовании, составила 10 фг / мк мкл, 1 пг / мк мкл и 300 мкг / мкл мкл ДНК соответственно для Fusarium , A .flavus, и A. fumigatus. Тревожным фактом было то, что Fusarium и Aspergillus на региональном уровне оставались частой причиной грибкового кератита, а изоляты Fusarium имели более высокую противогрибковую устойчивость, чем штаммы Aspergillus , по отношению к большинству тестируемых препаратов.

1. Введение

Слепота из-за инфекций роговицы является серьезной проблемой наряду с катарактой [1], а грибковые инфекции роговицы стали одним из основных заболеваний глаз во всем мире. Инфекция роговицы грибковой этиологии очень распространена и составляет не менее 50% всех положительных случаев посева в Индии [2]. Однако уровень распространенности варьируется от одной страны к другой, а также от одной популяции к другой в пределах одной страны [3, 4]. В Южной Индии преобладание грибкового кератита, особенно Fusarium и Aspergillus, , преобладает более десяти лет и зарегистрировано во многих литературных источниках [5–8].Виды Fusarium и Aspergillus широко распространены в природе, являясь возбудителями важных заболеваний основных сельскохозяйственных культур, а также людей с ослабленным иммунитетом [9] и считаются важными патогенами глазных инфекций, особенно кератита [2, 10]. В Индии из язв роговицы в большом количестве выделяются видов Fusarium и Aspergillus [6, 8, 11–14], независимо от географического положения.

Значение грибкового кератита возросло в 2005 году после вспышки грибкового кератита среди пользователей контактных линз во многих развитых странах [15, 16].Тот факт, что исход грибкового кератита хуже, чем исход бактериального кератита, должен быть подчеркнут [17] из-за плохого ответа на терапию, а также из-за ограниченной доступности противогрибковых средств [18]. Диагностика и лечение грибкового кератита — одна из самых сложных проблем, с которыми сталкиваются офтальмологи. Кроме того, прогноз грибкового кератита ухудшается при непреднамеренном приеме противогрибковых препаратов и тяжелом течении болезни [2]. Хотя вориконазол и другие триазолы обладают активностью широкого спектра действия против возбудителей грибковых изолятов, клинически не было обнаружено, что ни одно лекарство эффективно против грибкового кератита.Также Fusarium spp. полностью толерантны к итраконазолу и каспофунгину [19].

Точная идентификация этиологического агента грибкового кератита имеет большое значение для проведения соответствующего лечения [10, 20]. Хотя обычные методы культивирования часто бывают полезными, требуется больше времени для достаточного роста и последующей идентификации возбудителя [2]. Использование молекулярных методов позволяет значительно сократить время, необходимое для точной диагностики таких инфекций [20, 21].Кроме того, нехватка данных о региональной чувствительности к противогрибковым препаратам, ограниченная доступность коммерчески доступных противогрибковых препаратов и отсутствие ответа приводят к роговичной слепоте у большого числа инфицированных пациентов. Таким образом, в связи с размахом грибкового кератита в Тамилнаду, Индия, первостепенное значение имеет изучение местной картины восприимчивости к противогрибковым препаратам и поиск подходящего метода быстрой диагностики.

Таким образом, настоящее исследование было разработано для быстрого обнаружения грибковых патогенов, вызывающих кератит, с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР), а также для оценки эффективности мультиплексной ПЦР по сравнению с обычным методом культивирования.Кроме того, в исследовании также представлены данные о региональной распространенности грибкового кератита и значениях минимальной ингибирующей концентрации [4] обычно используемых противогрибковых средств против Fusarium и Aspergillus , выделенных из язв роговицы. В документе не только представлена ​​информация о текущей заболеваемости кератитом Fusarium / Aspergillus , но также дана ценная информация о лекарственной чувствительности, чтобы помочь офтальмологам назначить соответствующую противогрибковую терапию против грибкового кератита.

2. Материалы и методы

2.1. Пациенты. Фонд медицинских исследований Аравинд, Мадурай, Индия).

2.2. Сбор образцов

Соскоб роговицы был проведен офтальмологом в асептических условиях с использованием стерильного шпателя Кимуры, и часть была посеяна на 5% агар с овечьей кровью (SBA), шоколадный агар (CA) и агар с картофельной декстрозой (PDA).Кроме того, оставшийся образец намазывали на два прозрачных предметных стекла для микроскопического наблюдения за наличием грибковых нитей с использованием 10% влажного контура КОН и окрашивания по Граму. Для исследования учитывались соскобы роговицы, которые выявляли грибковые нити при прямой микроскопии. Повторный соскоб с роговицы проводился для сбора образца для ПЦР-анализа. Собранные образцы помещали в 400 мкл л буфера для лизиса (0,5 М Трис-HCL, 0,5 М ЭДТА, 3% SDS, 1% β -меркаптоэтанол) и хранили при -20 ° C до дальнейшей обработки.

2.3. Идентификация

Fusarium spp. и Aspergillus spp. методом культивирования

Все грибковые изоляты были идентифицированы на основе стандартных методов культивирования с последующей микроскопией после окрашивания лакто-феноловым хлопковым синим. Выявленные изоляты хранили в 0,85% физиологическом растворе при 4 ° C.

2.4. Определение минимальной ингибирующей концентрации (МИК)

МИК семи различных противогрибковых агентов, а именно амфотерицина В (Himedia, Мумбаи, Индия), итраконазола (Sigma-Aldrich, St.Луис, Миссури, США), натамицин (Сигма-Олдрич, Сент-Луис, Миссури, США), вориконазол (Ауролаб, Мадурай, Индия), кетоконазол (Химедиа, Мумбаи, Индия), эконазол (Ауролаб, Мадурай, Индия) и клотримазол. (Aurolab, Мадураи, Индия) были определены в соответствии с рекомендациями Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) [22]. Значения MIC определялись как самые низкие концентрации противомикробных препаратов, которые подавляют видимый рост изолята. Значения МИК ₅₀ и МИК ₉₀ были определены как МИК, необходимые для подавления роста 50% и 90% изолятов данного вида соответственно [23].

A. flavus ATCC 204304 был включен в качестве штамма контроля качества во все партии анализа MIC. Противогрибковые агенты были приготовлены для достижения диапазонов разведения порядка 8 мкг мкг / мл — 0,015 мкг мкг / мл (амфотерицин B, эконазол, вориконазол и клотримазол) 32 мк г / мл — 0,06 μ мкг / мл (итраконазол), 16 μ г / мл — 0,03 μ мкг / мл (кетоконазол) и 128 μ г / мл — 0.25 μ г / мл (натамицин).

2.5. Экстракция ДНК

ДНК экстрагировали из инфицированных сосков ткани роговицы с использованием набора для экстракции ДНК Qiagen (Hilden, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. Концентрацию экстрагированной ДНК определяли на нанофотометре (Implen, Мюнхен, Германия). ДНК хранили при -20 ° C (Sanyo, Осака, Япония) до дальнейшего использования.

2.6. Полимеразная цепная реакция

Экстрагированную ДНК сначала подвергали первому раунду ПЦР с использованием универсальных грибковых праймеров ( ITS1 и ITS4 , внутренняя транскрибируемая спейсерная область). Впоследствии ампликоны первого раунда подвергали мультиплексной ПЦР с использованием специфических праймеров Fusarium и Aspergillus [24].

Для каждой реакции в первом раунде ПЦР коктейль, содержащий 10 мкл мкл экстракта ДНК с 5 мкл мкл 10-кратного буфера для ПЦР (смешанного с 1,5 мМ хлорида магния), 1 мкл мкл смеси дНТФ (200 мкл, мкМ каждого dNTP), 20 пм / мкл мкл каждого праймера и 0,5 ед. ДНК-полимеразы Taq в общем объеме 50 мкл мкл.Использованные праймеры ITS (Sigma, St Louis, MO, USA) представляли собой 5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3 ‘(F) и 5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’ (R). Реакцию проводили в градиентном термоциклере (Eppendorf, Гамбург, Германия), включая начальную денатурацию при 95 ° C в течение 5 минут, затем 34 цикла последовательно денатурации при 95 ° C в течение 30 секунд, отжиг при 54 ° C в течение 1 минуты и удлинение. при 72 ° C в течение 1 мин, с последним этапом наращивания при 72 ° C в течение 6 мин и окончательной выдержкой при 4 ° C.

Коктейль мультиплексной ПЦР готовили, как описано выше.Специфические праймеры (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США), использованные для идентификации Fusarium spp., A. flavus, и A. fumigatus , были CAACTCCCAAACCCCTGTGA (F) и GCGACGATTACCAGTAACGA (R), CCGCCGACGA & TGGGCAGCAATGACGCTCGG (R) и TTGTGTGTTGGGCCCCCGTC (F) & AAAGTTGGGTGTCGGCTGGCG (R) соответственно. Ампликоны подвергали электрофорезу в агарозном геле в 1,5% агарозе (Sigma, Сент-Луис, Миссури, США) в течение 20-25 минут при 80 В (GeneI, Бангалор, Индия) вместе с 100 п.н. (Sigma, St.Луис, Миссури, США) молекулярный маркер. Полосы ДНК были визуализированы, проанализированы и задокументированы с использованием системы гель-документации (Vilber Lourmat, Франция).

3. Результаты

Из 500 соскобов роговицы, собранных в течение периода исследования, культура показала, что 411 (82,2% из 500) были положительными на грибки, бактерии и смешанную этиологию (Таблица 1). Из 402 образцов глаз (97,8% из 411), 6 (1,4% из 411) и 3 (0,72% из 411) были определены как связанные с грибковыми, бактериальными и сочетанием бактериальных и грибковых причин, соответственно. Кроме того, окрашивание 10% КОН и по Граму показало, что 96,1% (449 из 467) и 94,7% (473 из 499) коррелировали с результатами культивирования при обнаружении грибов в соскобах роговицы. Количество случаев кератита Fusarium (n = 216) было больше у мужчин (134, 62%), чем у женщин (82, 38%). Возрастная группа, пораженная кератитом Fusarium , варьировала от 21 до 70 лет, в частности, 66 пациентов (30,5% из 216) относились к возрасту 41-50 лет и 50 (23,1% из 216) относились к 51-60 годам.

900 . Грибки Заболеваемость Процент ( n = 411) 216 52,5 A. flavus 48 11,6 A. fumigatus 11 2,6 A. terreus 9050 A. terreus 9050 1,2 A. niger 3 0,7 A. tamarii 1 0,2 Bipolaris spp. 22 5,3 Curvularia spp. 12 2,9 Exserohilum spp. 11 2,6 Cladosporium spp. 4 0,9 Aureobasidium spp. 3 0,7 Exophiala spp. 2 0,4 Lasiodiplodia spp. 1 0,2 Pseudallescheria sp. 1 0,2 C. albicans 1 0,2 Alternaria sp. 1 0,2 Scedosporium spp. 1 0,2 S. apiospermum 1 0,2 Неидентифицированные дематиасовые грибы (UID) 21 5. 1 Неидентифицированные гиалиновые грибы (UIH) 37 9 Бактерии 0,2 Pseudomonas spp. 1 0,2 Nocardia spp. 1 0,2 CoNS 1 0.2 S. viridans 1 0,2 Citrobacter spp. 1 0,2 Смешанная инфекция CoNS + Fusarium spp . 1 0,2 S. pneumoniae + Bipolaris spp. 1 0,2 Citrobacter spp. + Bipolaris виды 1 0,2 Всего 411 100

CoNS38: коагулазо-отрицательный Stapcus

Аналогичным образом Aspergillus кератит был подтвержден преимущественно среди мужчин (55.8% из 68). Возрастная группа, пораженная кератитом Aspergillus , колебалась от 31 до 50 лет (31, 45,5% из 68). A. flavus (48, 11,6% из 411) был преобладающим видом среди идентифицированных Aspergillus , идентифицированных в течение периода исследования. Bipolaris spp. (22, 5,3% из 411), Curvularia spp. (12, 2,9% из 411) и Exserohilum spp. (11, 2,6% из 411) были другими грибами, изолированными в течение периода исследования.

3.1. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК)

В этом исследовании всего 200 изолятов Fusarium и 67 Aspergillus (47 A. flavus , 11 A. fumigatus , 5 A. terreus , 3 A. niger, и 1 A. tamarii ) были включены для определения минимальных ингибирующих концентраций / МИК ₅₀ и МИК ₉₀ обычных противогрибковых препаратов. В целом изоляты Fusarium spp. необходимы более высокие концентрации (таблицы 2 и 3) конкретного противогрибкового препарата, чем у Aspergillus spp. чтобы быть подавленным. Большинство изолятов Aspergillus ингибировалось амфотерицином-B в концентрации ≥ 1 мк мкг / мл.Что еще более интересно, натамицин действовал против 65% (130, n = 200) изолятов Fusarium в концентрации 16 мк мкг / мл, в то время как большинство изолятов Aspergillus spp. ингибировались при ≥ 32 мк мкг / мл. Примечательное наблюдение было связано с активностью итраконазола, когда 92,5% (185, n = 200) Fusarium spp. были восприимчивы только при концентрации ≥ 32 мк мкг / мл, в то время как 100% (n = 67) изолятов Aspergillus полностью ингибировались при ≤ 1 мк мкг / мл. Аналогичные характеристики МИК наблюдались для эконазола, клотримазола и кетоконазола, где изоляты Fusarium имели более высокие МИК по сравнению с Aspergillus spp.

1 90 ≥8 мкм 90 438 г / мл Амфотерицин B Диапазон МИК ≤0,5 мк 4 г / мл MIC 50 MIC 90 8-0.125 77 (38,5%) 123 (61,5%) 1 1 Натамицин Диапазон МИК ≤8 μ г / мл ≥16 μ г / мл MIC 50 MIC 90 64-2 70 (35%) 130 (65%) 16 32 Итраконазол Диапазон МИК ≤16 мкм г / мл ≥32 мкм г / мл МИК 50 МИК 900 32 — 4 15 (7. 5%) 185 (92,5%) 32 32 Вориконазол Диапазон МИК ≤4 мк г / мл ≥8 мк г / мл MIC 50 MIC 90 8 — 1 101 (50,5%) 99 (49,5%) 4 8 Эконазол Диапазон МИК ≤4 мк г / мл ≥8 мк г / мл МИК 50 МИК 90 8 38 (19%) 162 (81%) 8 8 Клотримазол Диапазон МИК ≤4 μ г / мл MIC 50 MIC 90 8-0. 5 145 (72,5%) 55 (27,5%) 4 8 Кетоконазол Диапазон МПК ≤8 мк г / мл 900 ≥16 μ г / мл MIC 50 MIC 90 16-2 35 (17,5%) 165 (82,5%) 16 16

≤0.5 μ г / мл 905 μ г / мл Амфотерицин B ≥1 μ г / мл MIC 50 MIC 90 A. flavus ( n = 47) 8 — 0,25 21 (44,7%) 26 (53,4%) 1 2 A. fumigatus ( n = 11) 4 — 0,25 5 ( 45,4%) 6 (54,5%) 1 4 A.terreus ( n = 5) 2 — 0,5 2 (40%) 3 (60%) 1 2 A. niger ( n = 3) 0,5 — 0,25 3 (100%) — 0,5 0,5 A. tamarii ( n = 1) NA 1 (100%) — NA NA Натамицин Изоляты Диапазон МИК ≤16 μ г / мл г / мл MIC 50 MIC 90 A.flavus ( n = 47) 64-16 18 (38,2%) 29 (61,7%) 32 64 A. fumigatus ( n = 11) 64–16 7 (63,6%) 4 (36,3%) 16 32 A. terreus ( n = 5) 32–16 1 ( 20%) 4 (80%) 32 32 A.niger ( n = 3) 32-8 2 (66,7%) 1 (33,4%) 16 32 A. tamarii ( n = 1) NA — 1 (100%) NA NA Итраконазол Диапазон изолятов 900 0.25 μ г / мл ≥0,5 μ г / мл MIC 50 MIC 90 A. flavus ( n = 47) 1 — 0,25 25 (53,1%) 22 (46,8%) 0,25 0,5 A. fumigatus ( n = 11) 0,5 — 0,25 5 ( 45,4%) 6 (54,5%) 0.5 0,5 A. terreus ( n = 5) NA — 5 (100%) 0,5 0,5 A. niger ( n = 3) 0,5 — 0,25 2 (66,7%) 1 (33,4%) 0,25 0,5 A. tamarii ( n = 1) NA 1 (100%) — NA NA Вориконазол Изоляты Диапазон МИК ≤ ≥1 μ г / мл MIC 50 MIC 90 A. flavus ( n = 47) 4 — 0,25 37 (78,7%) 10 (21,2%) 0,5 1 A. fumigatus ( n = 11) 4 — 0,25 6 ( 54,5%) 5 (45,4%) 0,5 1 A.terreus ( n = 5) 1 — 0,5 3 (60%) 2 (40%) 0,5 1 A. niger ( n = 3) 1 — 0,25 2 (66,7%) 1 (33,4%) 0,5 1 A. tamarii ( n = 1) NA — 1 (100%) NA NA Эконазол Изоляты Диапазон MIC ≤0.5 μ г / мл ≥1 μ г / мл MIC 50 MIC 90 A. flavus ( n = 47) 2 — 0,25 37 (78,7%) 10 (21,2%) 0,5 1 A. fumigatus ( n = 11) 1 — 0,25 5 ( 45,4%) 6 (54,5%) 1 1 A.terreus ( n = 5) 1 — 0,5 2 (40%) 3 (60%) 0,5 1 A. niger ( n = 3) 2 — 0,25 1 (33,4%) 2 (66,7%) 2 2 A. tamarii ( n = 1) NA — 1 (100%) NA NA Клотримазол Изоляты Диапазон MIC ≤0.5 μ г / мл ≥1 μ г / мл MIC 50 MIC 90 A. flavus ( n = 47) 1 — 0,125 31 (65,9%) 16 (34%) 0,5 1 A. fumigatus ( n = 11) 1 — 0,125 8 ( 72,7%) 3 (27,2%) 0,5 1 A.terreus ( n = 5) 1 — 0,5 1 (20%) 4 (80%) 1 1 A. niger ( n = 3) 1 — 0,5 1 (33,4%) 2 (66,7%) 1 1 A. tamarii ( n = 1) NA 1 (100% ) — NA NA Кетоконазол Изоляты Диапазон MIC ≤0.5 μ г / мл ≥1 μ г / мл MIC 50 MIC 90 A. flavus ( n = 47) 8 — 0,5 14 (29,7%) 33 (70,2%) 1 4 A. fumigatus ( n = 11) 4 — 0,125 4 ( 36,3%) 7 (63,6%) 1 2 A.terreus ( n = 5) 4-1 — 5 (100%) 2 4 A. niger ( n = 3) 4 — 0,5 1 (33,4%) 2 (66,7%) 1 4 A. tamarii ( n = 1) NA — 1 (100%) NA NA

NA: не применимо.

3.2. ПЦР-исследование

Всего 473 соскоба роговицы, которые дали положительный результат на культуру Fusarium spp. (205), A. flavus (46), A. fumigatus (11), A. terreus (4), A. tamarii (1), Bipolaris spp. (22), Exserohilum spp. (10), Curvularia spp. (12), Cladosporium spp. (4), Aureobasidium spp. (3), Exophiala spp.(2), Lasiodiplodia sp. (1), Pseudallescheria sp. (1), Alternaria sp. (1), Scedosporium spp. (2), UID (20) и UIH (36) были включены для ПЦР. Кроме того, для ПЦР-анализа были включены 86 образцов соскобов роговицы с отрицательными посевами, а также 2 образца со смешанными инфекциями и 4 бактериально-положительных образца.

Все праймеры специфически амплифицировали целевую область. Специфические праймеры для ITS 1 и 4 (1-й этап), Fusarium spp., A. flavus и A. fumigatus после ПЦР и после электрофореза продуцировали ампликоны приблизительно 600 п.н., 400 п.н., 250 п.н. и 150 п.н., соответственно (Рисунок 1 (а)). Кроме того, другие соскобы роговицы, положительные на культуру грибов, такие как Bipolaris, Curvularia, Exserohilum, и т. Д., Не могли быть амплифицированы во 2-м раунде мультиплексной ПЦР (рис. 1 (b)). Все положительные образцы ПЦР ( Fusarium, A. flavus, A. fumigatus ) были дополнительно подтверждены идентификацией культур для обеспечения специфичности.

3.3. Чувствительность ПЦР

Чтобы определить минимальное количество грибковой ДНК, которое может быть обнаружено с помощью установленного анализа ПЦР, различные количества (от 10 нг / мкл л до 300 фг / мкл л) Fusarium и Геномная ДНК Aspergillus была использована в качестве ДНК-матрицы (рис. 2 (а)), и было обнаружено, что наилучшие оптимизированные условия ПЦР могут амплифицировать ДНК Fusarium менее 10 фг / мкг мкл (рис. 2 (b)). . Аналогично A.flavus ДНК может быть амплифицирована до 1 пг / мк мкг. Однако было отмечено, что ПЦР менее чувствительна к обнаружению ДНК A. fumigatus , так как для амплификации и обнаружения требуется минимальная концентрация ДНК не менее 300 пг / мкл мкл (рис. 3).

3.4. ПЦР-Первый раунд амплификации с праймерами ITS

В 1 раунде амплификации ПЦР 1 с использованием универсальных грибковых праймеров (ITS1 и ITS4) продукты ПЦР (550-600 п. н.) были получены из 347 (73.3%) образцы роговицы. Из 347 образцов 337 (97,1%) уже были подтверждены как положительные на культуру грибов. Увеличение общего числа положительных случаев за счет применения ПЦР в рамках проекта указывает на очевидную и неизбежную потребность в таких методах в рутинных диагностических процедурах. Кроме того, точность обнаружения ПЦР была выше, поскольку большинство (16%, 76 из 473) случаев ПЦР-отрицания (ITS1 и ITS4) также были отрицательными в первую очередь для традиционной культуры. Однако ДНК из 50 (10.5% из 473) соскобов роговицы, которые были фактически определены как положительные на культуру, не смогли амплифицировать ITS 1 и 4 с помощью ПЦР.

3.5. ПЦР-второй раунд амплификации с праймерами, специфичными для грибковых видов

Результаты второго раунда амплификации с использованием эксклюзивных праймеров для каждого рода / вида были разнообразными. Из 205 соскобов роговицы, положительных на Fusarium spp. культуре только 193 (94,1% из 205) были подтверждены как Fusarium spp. (Рисунок 1 (б)).Аналогичным образом 46 (100%) A. flavus и 7 (63,6% из 11) A. fumigatus были подтверждены с помощью ПЦР. Не наблюдали амплификации ДНК других грибов, для которых не использовались специфические праймеры (но их ДНК можно было амплифицировать в первом цикле с использованием универсальных праймеров грибов для ITS). Что еще более примечательно, из 86 соскобов роговицы с отрицательными посевами 9 (10,4% из 86) показали положительные результаты на Fusarium spp. в ПЦР, которая показала, что праймеры ПЦР могут идентифицировать даже те образцы / случаи, которые, как сообщалось, были отрицательными в культуре, и что праймеры могут также амплифицировать минимальное количество ДНК Fusarium в отрицательных случаях культивирования.

4. Обсуждение

Быстрая идентификация грибковых патогенов и введение соответствующих противогрибковых агентов являются ключевыми факторами успешного лечения грибкового кератита, и настоящее исследование сосредоточено на этих двух особенностях с особым упором на Fusarium spp. и Aspergillus spp. В исследование были включены только положительные на грибок образцы, идентифицированные с помощью прямой микроскопии, чтобы оценить специфичность ПЦР быстрого обнаружения. Заболеваемость грибковым кератитом сильно различалась в штатах Индии: на юге и западе Индии — 36.7% [8] и 36,3% [8, 25], северная (7,3%), северо-восточная (25,6%) и восточная Индия (26,4%) [26–28]. Настоящее исследование показало прямую микроскопическую чувствительность 10% КОН и окраски по Граму 96,1% и 94,7% соответственно, от соскобов роговицы, что соответствует Bibhudutta et al ., 2011 [28]. Точно так же Bharathi et al. [8] сообщил о чувствительности 99,23% и 88,73% для мокрого образца КОН и окрашивания по Граму, соответственно. В другом исследовании окрашивание по Гимзе (75%) и окрашивание по Граму (55.5%) были использованы для обнаружения грибковых филаментов [29].

Как и в других исследованиях [8, 30], пациенты мужского пола (60,5%) преобладали с кератитом Fusarium и Aspergillus , чем женщины (39,4%). Gonzales et al. [31] и Srinivasan et al. [6] сообщил, что соотношение мужчин и женщин с язвой роговицы составляет 1,6 к 1. Кератиты Fusarium и Aspergillus были в основном (94%) подтверждены у лиц среднего возраста (21-70 лет) с целевым преобладанием у 41 -50 лет (28.8%).

Было отмечено, что средняя возрастная группа очень уязвима для грибкового кератита в регионе Мадурай [6] с 31–60 лет и в Непале [32] с 21–50 лет. В этом исследовании пациенты мужского пола были подвержены более высокому риску (55,8%) кератита Aspergillus , хотя наша предыдущая оценка [23] выявила 60% с соотношением мужчин и женщин 1,5: 1. В этом исследовании Fusarium spp. (52,5%), за которыми следуют Aspergillus spp. (16,5%) были преимущественно ответственны за грибковый кератит. Подобные результаты наблюдались в других частях южной Индии [6, 8], западной Индии [25, 30] и восточной Индии [28].Кроме того, было обнаружено, что распространенность кератита Aspergillus согласуется с нашими предыдущими данными [23]. Однако Aspergillus spp. была доминирующей этиологией грибкового кератита, за которым следовали Fusarium spp. в некоторых частях северной [26] и восточной Индии [4]. Кроме того, этиология грибкового кератита сильно различалась от страны к стране [10]. Candida spp. с частотой 60,6% и 32,7% наблюдались в Лондоне [33] и Мельбурне [18] соответственно. Acremonium spp. (40%) были наиболее распространенным изолятом грибка в Парагвае [34]. Тестирование на чувствительность к противогрибковым препаратам и процедуры определения МПК играют очень важную роль с точки зрения успешного ведения пациентов с грибковым кератитом. Однако ограниченная доступность коммерческих противогрибковых средств, особенно в форме глазных капель, усложняла терапию [10]. В этом исследовании Fusarium spp. требуется более высокая концентрация противогрибковых агентов для подавления роста по сравнению с Aspergillus spp.за исключением амфотерицина B и натамицина. В аналогичном исследовании сообщалось, что амфотерицин-B и натамицин обладают значительной активностью против Fusarium spp. [35]. Ровно 90% из Fusarium spp. были чувствительны при 1 мк мкг / мл, в то время как 90% из A. flavus, A. fumigatus, A. terreus, и A. niger были чувствительны при 2, 4, 2 и 0,5 мк г / мл соответственно [36]. Однако оценка Lalitha et al. [19] и Isabel et al. [35] сообщил о MIC ₉₀ при 4 мк мкг / мл и 4,62 мк мкг / мл, соответственно, против Fusarium spp. с амфотерицином-В. МИК ₉₀ из Aspergillus spp. наблюдаемое в настоящем исследовании было аналогично исследованию Lalitha et al. [19]. Натамицин, хотя и является препаратом выбора против мицелиальных грибов [37], из-за его плохой проницаемости, эффективен только при нетяжелом поверхностном кератите [13]. Fusarium spp.были более чувствительны к натамицину, чем Aspergillus spp. В этом исследовании 90% штаммов Fusarium и Aspergillus были ингибированы при 32 мк мкг / мл и 64 мк мкг / мл соответственно, и результаты были аналогичны предыдущим оценкам [19]. Образец устойчивости Fusarium spp. против итраконазола в этом исследовании было ясно видно из других отчетов [19, 35], хотя значения МИК показали вариации. Напротив, Aspergillus был значительно чувствителен к итраконазолу, что соответствует результатам нашей предыдущей работы [23], а также результатов других исследователей [19, 38].Подобно итраконазолу, другие агенты, такие как вориконазол, эконазол, клотримазол и кетоконазол, были относительно эффективными против Aspergillus spp. Аналогичным образом, для ингибирования Fusarium spp. Требовались более высокие концентрации лекарственного средства. что указывает на неэффективность испытанных азольных препаратов. Эдуардо и др. 2008 [39] и Lalitha et al. 2007 [19] сообщил о МИК ₉₀ вориконазола как 4 мк мкг / мл, и аналогичный диапазон был обнаружен в настоящем исследовании (8 мк мкг / мл).Эдуардо и др. пришел к выводу, что F. solani имеет тенденцию быть более устойчивым к определенным азолам [39]. Однако в случае Aspergillus spp. Наибольшая МИК была отмечена против вориконазола (1 мкг мкг / мл), что было аналогично данным, опубликованным ранее [19, 23]. В случае кетоконазола, MIC ₉₀ и MIC ₅₀ для Fusarium spp. были отмечены как 16 μ мкг / мл, а среди Aspergillus spp. A. flavus, A.terreus и A. niger имел самый высокий MIC ₉₀ , равный 4 мк мкг / мл. Isabel et al. 1997 [35] сообщил о более высоком МИК ₉₀ (> 51,20 мг / л) по сравнению с Fusarium. Напротив, Theresa et al. 2006 [36] сообщил о более высоком процентиле МИК кетоконазола у A. niger и A. terreus по сравнению с другими мицелиальными грибами. В целом изоляты Fusarium spp. показали большую устойчивость, чем Aspergillus spp.Большинство изолятов Fusarium требовали более высоких концентраций лекарств для ингибирования. Кроме того, большинство изолятов Aspergillus были чувствительны к амфотерицину-B.

Все тестовые праймеры для ПЦР (ITS 1 и 4) амплифицировали целевую область Fusarium spp., A. flavus и A. fumigatus , представляющих 600, 400, 250 и 150 пар оснований, соответственно, после фракционирования и были подтверждены подходящим положительным результатом (положительный результат по грибковой культуре при соскобе роговицы с использованием Bipolaris spp., Curvularia spp., Exserohilum spp. И т. Д.) И отрицательные контроли. ПЦР идентифицировала Fusarium, A. flavus, и A. fumigatus , которые впоследствии были определены как положительные по культуре. Хотя быстрое выявление возбудителя грибка является наиболее важной задачей любого успешного лечения грибкового кератита, проблема так и не была решена полностью. Препятствия для быстрой идентификации могут быть связаны с меньшим, чем минимальное количество образцов, и перекрестным заражением конъюнктивальной флорой.Поэтому исследования по быстрой идентификации грибков непосредственно со соскобов роговицы очень ограничены. Таким образом, в настоящем исследовании оценивалась прямая идентификация основных грибковых агентов, таких как Fusarium и Aspergillus , непосредственно при соскобе роговицы с использованием мультиплексной ПЦР. Специфичность праймеров для ПЦР определяли путем оценки положительного контроля с использованием известных грибковых изолятов и отрицательного контроля (бактериальная ДНК) и последующего наблюдения за положительными случаями культивирования. ПЦР подтвердила положительный результат для всех образцов положительного контроля, в то время как полосы отрицательного контроля отсутствовали.Положительные образцы на Fusarium spp. и Aspergillus spp. в ПЦР-анализах также были определены положительные посевы в соответствующих микробиологических средах.

Феррер и др. 2001 [21] сообщил о высокой специфичности ПЦР при амплификации ITS генома гриба, выделенного из глазной инфекции, когда ДНК, выделенная из лейкоцитов человека, и бактериальная ДНК использовались в качестве отрицательного контроля. Zunaina et al. 2008 [40] использовали сегмент 18S рРНК для прямой идентификации грибковых патогенов из соскобов роговицы, у которых специфичность (94.7%) было подтверждено секвенированием амплифицированного фрагмента ДНК. Чувствительность ПЦР настоящего исследования для видов Fusarium , A. flavus, и A. fumigatus составляла 10 фг, 1 пг и 300 пг / мкл ДНК соответственно. Другие исследователи сообщили о чувствительности генома A. versicolor к 100 фг [40]. В значительном отличии от наших результатов, чувствительность A. fumigatus также наблюдалась до 1 фг при полугнездовой ПЦР [21]. О положительном ПЦР-обнаружении грибковых патогенов сообщили Emma et al.2000 [41] от одного пациента с отрицательной культурой. Однако в настоящем исследовании ПЦР выявила и амплифицировала ДНК грибов у 10 пациентов. Феррер и др. 2011 [42] утверждал, что грибковая ПЦР должна быть добавлена ​​в качестве скринингового диагноза, поскольку ПЦР не только оказалась эффективным быстрым методом диагностики грибкового кератита, но также оказалась чувствительной по сравнению с методами исследования окрашивания и культивирования. Насколько я знаю, данное исследование было первой попыткой идентифицировать виды Fusarium и Aspergillus непосредственно из соскобов роговицы при культурально подтвержденных случаях грибкового кератита.Результаты предварительной оценки были высокоспецифичными и чувствительными при обнаружении Fusarium и Aspergillus . Предлагается расширенная научная оценка и оптимизация для применения анализов PCR in vitro как для рутинных, так и для быстрой диагностики.

Доступность данных

Данные, использованные для подтверждения результатов этого исследования, включены в статью.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов в отношении публикации данной статьи.

Благодарности

Это исследование было поддержано Индийским советом медицинских исследований (IRIS ID: 2008-03140), Нью-Дели, Индия. Авторы этого исследования также были поддержаны деканом научных исследований Университета Маджмаах, Королевство Саудовская Аравия, в рамках проекта № 38/128.

Грибковый кератит | Колумбийская офтальмология

Грибковый кератит | Колумбийская офтальмология

Перейти к навигации

Вы находитесь здесь

1. Домашняя страница ›
2. Образование›
3. Цифровой справочник по офтальмологии ›
4. Роговица и внешние заболевания›
5. Инфекционные ›

• Редко, но всегда следует учитывать, если в анамнезе имеется травма, связанная с растениями или растительными веществами, или у пациента с ослабленным иммунитетом.
• Этиология: Fusarium solani, Aspergillus sp., Curvularia sp., Candida albicans и редкие диморфные грибы (Histoplasma, Sporothrix и др.).

Клинические характеристики:

• Симптомы: ощущение инородного тела, снижение зрения, боль в глазах, светобоязнь, красные глаза и водянистые выделения.
• Знаков:
  • Тонкий или крупнозернистый инфильтрат в эпителии и передней строме
  • Серо-белый цвет, сухая и шероховатая поверхность роговицы, которая может казаться приподнятой
  • Типичный инфильтрат неправильной формы с перистыми краями
  • Белое кольцо в роговице и поражение сателлитов у края первичного очага инфекции
  • Заблаговременно: гнойный стромальный кератит, связанный с гиперемией конъюнктивы, воспалением передней камеры, гипопионом, иритом, эндотелиальной бляшкой или возможной перфорацией роговицы.

Работа до:

• Мазки роговицы на дрожжевые, гифы и псевдогифы.
• Цитологическое, гистологическое исследование, посев и биопсия роговицы для диагностики, подтверждения и лечения.

Управление:

• Длительный курс противогрибковых средств системного и местного действия.
• Частое соскабливание или локальная обработка раны для удаления поверхностных некротических тканей роговицы.

  No related posts.