Воспаление лимфатических сосудов: Лимфангит:Причины,Симптомы,Лечение | doc.ua

alexxlab Сосуд

Содержание

Лимфангит:Причины,Симптомы,Лечение | doc.ua

Учитывая характер и интенсивность выражения, лимфангит, лечение которого является длительным процессом, подразделяется на серозный (или простой) и гнойный. Учитывая глубину расположения, различают поверхностный и глубокий лимфангиты.

Разновидности

Лимфангит имеет две формы – это ретикулярный (сетчатый) и трункулярный лимфангиты. При ретикулярном лимфангите большое количество поверхностных лимфатических капилляров вовлекается в воспалительный процесс. Воспаление лимфатических сосудов (одного или нескольких) наблюдается при трункулярном лимфангите.

По клиническому протеканию заболеванию различается острый и хронический лимфангиты.

Причины

Острым лимфангитам свойственна инфекционная природа. Ранее инфицированные раны, ссадины, абсцессы и флегмоны могут стать очагом развития первичной инфекции. Осложнение других гнойно-воспалительных процессов связано с большой частотой микроповреждений кожи, обилием патогенной микрофлоры (чаще на ногах) и особенностями обращения лимфы в данном участке тела. Пользуясь током лимфатической жидкости, стрептококки и стафилококки попадают в межтканевое пространство в более глубокие отрезки сосудов. В процесс воспаления вовлекается вся стенка лимфатического сосуда, иногда переходит на кожу или подкожную клетчатку. Тромбы, которые образуются в просветах между сосудами, могут перерасти в обширный тромбоз лимфатических сосудов, сопровождающийся стойким лимфостазом. Во время развития поверхностного лимфангита или после него проявляется поражение глубоких лимфатических путей. Воспаления либо уменьшаются, либо перерастают в нагноения, которые проявляются по лимфатическим путям. Могут развиться подфасциальные флегмоны. При игнорировании лечения или несвоевременном вмешательстве это заболевание может привести к появлению сепсиса.

Хронические лимфангиты проявляются из-за воздействия слабовирулентных возбудителей на организм. Этот процесс вызывает закупорку глубоких лимфатических сосудов из-за стаза лимфы. Симптомы хронических лимфангитов обычно сопровождаются длительными отеками из-за закупорки глубоких лимфатических стволов и лимфостаза.

Симптомы

Острый лимфангит — воспаляется только лишь капиллярная лимфатическая система либо крупные лимфатические сосуды.

При ретикулярном лимфангите в области воспаления проявляется сплошное или пятнистое покраснение, которое не имеет резких границ в отличие от рожистого воспаления.

Узкие красноватые полосы характеризуют трункулярный лимфангит. Эти полосы начинаются в воспаленной зоне и идут к региональным лимфатическим узлам, вызывая региональный лимфангит. При прощупывании по этим полоскам, местами отмечаются болезненные уплотнения. Замечается появление отеков и напряжений на прилегающих тканях. Покраснение увеличивается, когда воспалительная область увеличивает свои размеры и затрагивает окружающую клетчатку.

Параллельно с остальными процессами происходит и повышение температуры тела, есть вероятность озноба, наблюдается общая слабость организма, слабое ощущение жжения. Почти во всех случаях припухают лимфатические узлы.

Локальная гиперемия не наблюдается при глубоком лимфангите, но быстро усиливается боль и увеличивается отечность. При глубоком прощупывании проявляется резкая и сильная боль.

Хронический лимфангит сопровождается закупоркой протоков лимфатических сосудов, образовываются отеки. Хронический лимфангит может соединиться с рожистым воспалением, варикозным воспалением или иметь туберкулезную этиологию.

Хронический лимфангит является причиной нарушения циркуляции лимфы по организму, образования отеков и слоновости. Пациенты, страдающие от застоя лимфы, должны пройти консультацию у хирурга.

Диагностика

Для диагностирования острого ретикулярного лимфангита, как правило, достаточно простого осмотра, но его следует отделять от рожистого воспаления и поверхностного флебита. Очень важно правильно установить первичный очаг воспаления.

Острый трункулярный лимфангит дифференцируется от поверхностного тромбофлебита.

Глубокий лимфангит вызывает затруднения с диагностированием заболевания. Для его определения проводится комплексное обследование.

Лечение

Лимфангит, симптомы которого зависят от формы заболевания, имеет лечение, которое разнится также от формы и вида протекания болезни. При остром лимфангите первоначально необходимо уделить внимание первичному очагу заболевания, которое стало причиной воспаления лимфатической системы. В обязательном порядке проводится антибактериальная обработка зараженных ран, необходимо произвести вскрытие абсцессов, флегмон, выполнить дренирование и санацию. При остром лимфангите необходимо создать полностью спокойную обстановку и улучшить кровообращение в больной конечности. Рекомендуется соблюдать постельный режим и обездвижить конечности. В острой фазе для противовоспалительного лечения применяется охлаждение на необходимом участке. По назначению врача выписывается рецепт на противовоспалительные и антигистаминные медикаменты.

Чтобы найти и забронировать нужное лекарство, перейдите в раздел Аптека и введите название препарата в поисковую строку.

Хирургический стационар показан при остром глубоком лимфангите.

После окончания острой фазы следует проводить тепловые процедуры, применять согревающие компрессы и использовать мазевые повязки.

Если у больного наблюдается хронический медленно протекающий лимфангит, то ему назначаются мазевые повязки местного применения, полуспиртовые компрессы или содержащие диметилсульфоксид, которые оказывают прогревающее действие. Применяются лечебные грязи и физиотерапия. При неутихающем воспалении назначается рентгенотерапия.

симптомы и лечение у взрослых. МЦ «Здоровье» в Москве ЮАО (Варшавская и Аннино), ЦАО (Краснопресненская и Рижская).

Лимфангит — острое, очень опасное заболевание, воспаление сосудов, по которым движется лимфа. Его причиной чаще всего становятся: инфицированная рана, карбункул, фурункул, содержимое которых попало в кровь и лимфу.

Лимфангит — воспаление сосудов, по которым идёт лимфоток. Развивается из-за различного рода патогенных микроорганизмов — чаще всего это стрептококки и стафилококки.

Симптомы лимфангита

Патология может быть острой или хронической. Первый вариант характеризуется общими симптомами воспалительных процессов: повышенной температурой, нарушениями сна и аппетита, ознобом, головными болями.

Если поражены маленькие сосуды, расположенные близко к поверхности кожи, речь идёт о сетчатом лимфадените. Он проявляется отёком, инфильтрацией в виде полос до лимфоузлов и покраснением кожи. Узлы при этом увеличены в размерах.

При воспалении глубоких сосудов появляется стволовой лимфангит — на коже появляются несколько болезненных полос, идущих к лимфоузлам. Есть признаки воспаления тканей, которые окружают узел.

Хроническая форма болезни — это недолеченный острый вариант. Практически не беспокоит пациента, проявляется синеватой инфильтрацией.

Лечение лимфангита

При лечении лимфангита первоочередной задачей становится проведение дифференциальной диагностики. Симптоматика этой патологии очень схожа с характерными проявлениями тромбофлебита и флебита вен шеи и лица, а также с рожистым воспалительным процессом. Основное отличие заключается в выраженности симптомов: у перечисленных заболеваний они проявляются более ярко, чем у лимфангита.

После того, как точный диагноз установлен, нужно устранить первичный очаг инфекционного поражения — тот, который привёл к возникновению заболевания. Если гнойный процесс прогрессирует, необходимо вскрыть гнойный очаг, обеспечить отток гноя. После этого проводится терапия, для неё используют антибиотики.

Позаботьтесь о своём здоровье: обратитесь в сеть МЦ «Здоровье» при первых признаках лимфангита. У нас работают аккуратные врачи, которые сделают все необходимые манипуляции и вылечат болезнь.

>

Симптомы и формы лимфангита, общие принципы лечения — клиника «Добробут»

Причины, симптомы и лечение лимфангита

Хроническое воспаление лимфатических сосудов разного размера и локализации в медицине называется лимфангитом. Данная патология является вторичной и может протекать в острой или хронической форме. Для лечения лимфангита может понадобиться госпитализация пациента, если необходимым будет хирургическое вмешательство.

Формы лимфангита

В медицине выделяют разные формы лимфангита:

  • по типу процесса – гнойный и серозный;
  • по глубине расположения пораженных сосудов – поверхностный и глубокий;
  • по форме течения – острый и хронический.

По диаметру пораженных сосудов различают такие формы лимфангита, как ретикулярная (поражаются капилляры) и трункулярная (патологии подвержены крупные лимфатические сосуды). Также выделяют злокачественный лимфангит – в этом случае развитие патологического процесса происходит на фоне злокачественной опухоли.

Лимфангит в хирургии рассматривается как заболевание с благоприятным прогнозом, но только в том случае, если его диагностика и лечение были проведены своевременно. Важно обратиться за квалифицированной медицинской помощью на ранней стадии развития патологического процесса.

Как проявляется заболевание

Наблюдаются следующие симптомы лимфангита:

  • повышение температуры тела – нередко до критических отметок;
  • чрезмерная потливость;
  • озноб;
  • острая головная боль, переходящая в ноющую, постоянную;
  • общая слабость;
  • апатия;
  • отказ от пищи.

При лимфангите также могут проявляться следующие симптомы:

  • при поражении капилляров (ретикулярная форма) отмечаются покраснение кожных покровов в проекции патологического очага, выраженный сетчатый рисунок, жжение в этих местах;
  • при поражении крупных сосудов на коже появляются красные полосы, отмечаются напряжение и болезненность соседних мягких тканей.

Лимфангит, диагностика которого не была проведена вовремя, чреват прогрессированием – в частности, распространением на окружающие мягкие ткани и формированием абсцесса. Опасным является состояние, когда абсцесс самостоятельно вскрывается, и гнойное содержимое попадает в ткани – при этом возникает риск возникновения сепсиса.

Лечение лимфангита

Любые лечебные мероприятия рассматриваемого заболевания начинаются с устранения основного очага инфекции. При нагноении лечение проводится в условиях стационара, нагноившийся лимфатический узел вскрывают. Если диагностируют лимфангит конечностей, то нужно обеспечить их неподвижность – рука или нога должны быть зафиксированы в приподнятом положении, что позволяет обеспечить полноценный отток лимфы. Пациенту рекомендуется малоподвижный режим, обязательно назначается лекарственная терапия:

  • антибиотики;
  • цефалоспорины;
  • аминогликозиды;
  • антигистаминные препараты.

Для облегчения состояния пациента на фоне общей интоксикации организма проводят инфузионную терапию. Если патология протекает в хронической форме с размытой клинической картиной (этим отличается, например, лимфангит легких), то эффективными будут компрессы с диметилсульфоксидом, физиотерапевтические процедуры – грязелечение, облучение ультрафиолетовыми лучами.

Особого внимания требует поражение полового члена. В случае невенерического происхождения специфического лечения не требуется, но в течение 2-3 дней рекомендовано не вступать в половые отношения и избегать травмирования. Если же лимфангит полового члена диагностирован на фоне прогрессирующей венерической инфекции, то проводится ее лечение.

Более подробно о патологии и о том, что такое эпизоотический лимфангит, можно узнать на страницах нашего сайта https://www.dobrobut.com/.

Лимфангоит — это… Что такое Лимфангоит?

  • лимфангоит — [лимфа + гр. сосуд] – мед. воспаление лимфатических сосудов. Большой словарь иностранных слов. Издательство «ИДДК», 2007 …   Словарь иностранных слов русского языка

  • лимфангоит — сущ., кол во синонимов: 3 • болезнь (995) • воспаление (320) • лимфангит (4) С …   Словарь синонимов

  • ЛИМФАНГОИТ — ЛИМФАНГОИТ, лимфангит, ангиолейцит (lymphangoitis, lymphangitis, angioleucitis), воспаление лимф, сосудов. Вызывается обычно проникновением в лимф, русло и стенку сосуда через ничтожные часто повреждения кожи или слизистой различных бактерий и их …   Большая медицинская энциклопедия

  • лимфангоит — ЛИМФАНГИТ а, м. ЛИМФАНГОИТ а, м. limphangite <гр. lympha влага + angeion сосуд. мед. Воспаление лимфатических сосудов. Крысин 1998. Лекс. СИС 1954: лимфанги/т, лимангои/т …   Исторический словарь галлицизмов русского языка

  • лимфангоит — (нрк; лимфанги + ит) см. Лимфангиит …   Большой медицинский словарь

  • лимфангоит — лимфангоит, лимфангоиты, лимфангоита, лимфангоитов, лимфангоиту, лимфангоитам, лимфангоит, лимфангоиты, лимфангоитом, лимфангоитами, лимфангоите, лимфангоитах (Источник: «Полная акцентуированная парадигма по А. А. Зализняку») …   Формы слов

  • ЭПИЗООТИЧЕСКИЙ ЛИМФАНГОИТ — (lymphangoitis epizootica), эпизоотический лимфангоит л., ослов и мулов, вызываемая грибками криптококками. Характеризуется поражением лимфатич. сосудов кожи и подкожной клетчатки с образованием узлов и гнойных язв. От кожной формы сапа… …   Справочник по коневодству

  • ЛИМФАНГИТ, ЛИМФАНГОИТ — [см. лимфа греч. angeion сосуд ит] воспаление лимфатических сосудов …   Психомоторика: cловарь-справочник

  • ПНЕВМОНИЯ — ПНЕВМОНИЯ. Содержание: I. Крупозная пневмония Этиология……………….. ей Эпидемиология……………… 615 . Пат. анатомия…… ………… 622 Патогенез……………….. 628 Клиника . ……………….. 6S1 II. Бронхопневмония… …   Большая медицинская энциклопедия

  • РОЖА — РОЖА, erysipelas (от греч. erythros красный и pella кожа), прогрессирующее воспаление кожи и слизистых, в особенности же тончайших лимфатических путей кожи (капиляр * ный лимфангоит кожи Dieulafoy), вызываемое стрептококками, другими словами… …   Большая медицинская энциклопедия

  • причины, симптомы, диагностика и лечение

    Лимфангит – это острое или хроническое воспаление лимфатических стволов и капилляров, возникающее вторично, на фоне гнойно-воспалительных процессов. Лимфангит сопровождается гиперемией и болезненной припухлостью по ходу воспаленных лимфатических сосудов, отеками, регионарным лимфаденитом, высокой температурой тела (39—40°С), ознобами, слабостью. Диагностика лимфангита осуществляется на основе ультразвукового ангиосканирования, компьютерного термосканирования, выделения возбудителя из первичного гнойного очага. Лечение лимфангита включает санацию первичного очага, антибиотикотерапию, иммобилизацию конечности, вскрытие сформировавшихся абсцессов и флегмон.

    Общие сведения

    При лимфангите (лимфангоите, лимфангиите) могут поражаться лимфатические сосуды различного калибра и глубины локализации. Лимфология и флебология чаще сталкивается с лимфангитом конечностей, что обусловлено их частым микротравмированием, обилием микробных патогенов и характером лимфообращения. Лимфангит обычно протекает с явлениями вторичного лимфаденита. Развитие лимфангита свидетельствует о прогрессировании первичной патологии и усугубляет ее течение.

    Лимфангит

    Причины лимфангита

    Лимфангит развивается вторично, на фоне имеющегося поверхностного или глубокого гнойно-воспалительного очага — инфицированной ссадины или раны, фурункула, абсцесса, карбункула, флегмоны. Основными патогенами при лимфангите выступают золотистый стафилококк, бета-гемолитический стрептококк, реже — кишечная палочка и протей, а также другая аэробная флора в виде монокультуры или в ассоциациях. Специфические лимфангиты чаще связаны с наличием у пациента туберкулеза.

    Вероятность развития лимфангита зависит от локализации, размеров первичного инфекционного очага, вирулентности микрофлоры, особенностей лимфообращения в данной анатомической зоне.

    Микробные агенты и их токсины попадают из очага воспаления в межтканевое пространство, затем в лимфатические капилляры, двигаясь по ним в направлении тока лимфы к более крупным сосудам и лимфоузлам. Реактивное воспаление сосудистой стенки выражается в набухании эндотелия, повышении ее проницаемости, развитии экссудации, выпадения сгустков фибрина, внутрисосудистого тромбообразования. Данные изменения приводят к расстройствам местного лимфообращения — лимфостазу. При дальнейшем прогрессировании воспаления может развиваться гнойный лимфангит и гнойное расплавление тромбов.

    В случае распространения воспаления на окружающие ткани развивается перилимфангит, при котором могут поражаться кровеносные сосуды, суставы, мышцы и т. д. Восходящим путем воспаление может распространяться до грудного лимфатического протока. В клинической практике чаще диагностируется лимфангит нижних конечностей, который возникает вследствие потертостей, микротравм, расчесов, трофических язв, панарициев.

    В андрологии иногда встречается состояние, расцениваемое как невенерический лимфангит полового члена: его причинами могут служить травмирование тканей пениса при частой мастурбации и затяжных половых актах. Специфический венерический лимфангит может развиваться при первичном сифилисе, генитальном герпесе, уретрите, обусловленном половой инфекцией.

    Классификация

    С учетом характера и выраженности воспаления лимфангит может быть серозным (простым) и гнойным; по клиническому течению — острым или хроническим; по глубине расположения пораженных сосудов — поверхностным либо глубоким.

    В зависимости от калибра воспаленных лимфатических сосудов лимфангиты подразделяются на капиллярные (ретикулярные или сетчатые) и стволовые (трункулярные). При ретикулярном лимфангите в воспаление вовлекается множество поверхностных лимфатических капилляров; при стволовом — воспаляется один или несколько крупных сосудов.

    Симптомы лимфангита

    При лимфангоите всегда в значительной степени выражена общая интоксикация, сопровождающая тяжелый гнойно-воспалительный процесс. Отмечается высокая температура (до 39-40°С), ознобы, потливость, слабость, головная боль. Ретикулярный лимфангит начинается с появления выраженной поверхностной гиперемии вокруг очага инфекции (раны, абсцесса и т. д.) с усиленным сетчатым (мраморным) рисунком на фоне интенсивной эритемы. По клинической картине сетчатый лимфангит напоминает рожу, однако гиперемия имеет расплывчатые границы, нехарактерные для рожистого воспаления.

    Локальным проявлением стволового лимфангита служит наличие на коже узких красных полос по ходу воспаленных лимфатических сосудов, тянущихся к регионарным лимфоузлам. Быстро развивается припухлость, уплотнение и болезненность тяжей, отечность и напряженность окружающих тканей, регионарный лимфаденит. Пальпация по ходу сосудов выявляет болезненные уплотнения по типу шнура или четок.

    При глубоком лимфангите локальной гиперемии не наблюдается, однако быстро нарастает отек и боль в конечности; при глубокой пальпации отмечается резкая болезненность, рано развивается лимфедема. В случае перилимфангита участки воспаленных окружающих тканей могут трансформироваться в абсцесс или подфасциальную флегмону, несвоевременное вскрытие которых чревато развитием сепсиса.

    Симптоматика хронических лимфангитов стерта и обычно характеризуется стойкими отеками вследствие закупорки глубоких лимфатических стволов и лимфостаза. При невенерическом лимфангите вдоль ствола или венечной борозды полового члена появляется безболезненный уплотненный тяж, который может сохраняться в течение нескольких часов или дней, после чего самопроизвольно исчезает.

    Диагностика

    Ретикулярный лимфангит может быть легко диагностирован лимфологом уже в ходе визуального осмотра, однако его следует дифференцировать от рожистого воспаления и поверхностного флебита. В установлении диагноза помогает выявление первичного воспалительного очага.

    Распознавание глубокого лимфангита может вызывать затруднения. В этом случае учитываются клинико-анамнестические данные, результаты инструментальных и лабораторных исследований. При лимфангите в периферической крови наблюдается выраженный лейкоцитоз. При УЗДГ и дуплексном сканировании визуализируются изменения лимфатических сосудов по типу неоднородности структуры, сужения просвета, наличия гиперэхогенного ободка вокруг сосуда, реактивные изменения в соответствующих лимфоузлах.

    Оценка выраженности, распространенности и глубины лимфангита осуществляется с помощью компьютерной термографии. Комплекс исследований позволяет отличить глубокий лимфангит от флегмоны мягких тканей, тромбофлебита глубоких вен, остеомиелита. Определение возбудителя лимфангита проводится путем бактериологического посева отделяемого гнойной раны. При осложненном лимфангите выполняется исследование крови на стерильность.

    Лечение лимфангита

    В первую очередь, при остром лимфангите необходима ликвидация первичного очага, поддерживающего воспаление в лимфатических сосудах. Производится обработка инфицированных ран, вскрытие абсцессов, флегмон, панарициев, их дренирование и санация. Пораженная конечность фиксируется в приподнятом положении; пациенту рекомендуется двигательный покой. При лимфангите недопустимы массаж и самостоятельное прогревание участка воспаления, втирание мазей. Медикаментозное лечение включает антибиотики (полусинтетические пенициллины, цефалоспорины 1-2-го поколения, аминогликозиды, линкозамиды), противовоспалительные и антигистаминные препараты, проведение инфузионной терапии, лазерное (ВЛОК) или ультрафиолетовое облучение крови (УФОК).

    В случае хронического вялотекущего лимфангита назначаются местные мазевые повязки, компрессы полуспиртовые или с диметилсульфоксидом, грязелечение, УФО; при упорном течении воспаления показана рентгенотерапия. Лечения невенерического лимфангита полового члена не требуется. При лимфангите, вызванном ЗППП, проводят терапию основной инфекции.

    Прогноз и профилактика

    Предупреждение лимфангита заключается в своевременной первичной хирургической обработке ран, санации гнойничковых заболеваний, вскрытии сформировавшихся гнойных очагов, адекватной антибиотикотерапии. Длительное хроническое течение лимфангита может привести к облитерации лимфатических сосудов, расстройству лимфообращения, развитию лимфостаза и слоновости. В случае своевременно начатой терапии лимфангит поддается стойкому излечению.

    Публикации в СМИ

    Лимфангиит — воспаление лимфатических сосудов.
    Этиология • -Гемолитический стрептококк • Стафилококк • Другие бактерии.
    Патогенез • Возбудители проникают через повреждённую кожную поверхность • Острый лимфангиит возникает вблизи поверхностного очага гнойного воспаления, характеризуется быстрым нарастанием патологических изменений • Хронический лимфангиит протекает длительно, характеризуется закупоркой глубоких лимфатических сосудов с развитием отёков, обусловливает возникновение слоновости.

    Патоморфология • Серозный лимфангиит — серозное пропитывание тканей по ходу поражённого сосуда • Гнойный лимфангиит — гнойное расплавление поражённого лимфатического сосуда, образование по его ходу абсцессов или флегмоны • Сетчатый лимфангиит — поражены мелкие сосуды, резкая гиперемия кожи иногда с сетчатым рисунком • Стволовой лимфангиит — поражены крупные сосуды, гиперемия кожи в виде полос, идущих от очага воспаления к регионарным лимфатическим узлам.

    Классификация • По характеру воспаления: серозный, гнойный • По течению: острый, хронический • По калибру поражённых сосудов: сетчатый (капиллярный, ретикулярный), стволовой (трункулярный).

    Клиническая картина • Обычно поражены конечности • Боль в поражённой конечности, отёк, раннее появление слоновости • Температура тела повышена, возможен озноб • При сетчатом лимфангиите — выраженная гиперемия без чётких границ с сетчатым рисунком • Гиперемированные, болезненные при пальпации полосы (при глубоком лимфангиите), идущие от первичного очага инфекции к регионарным лимфатическим узлам, которые практически всегда вовлечены в воспалительный процесс • Движения поражённой конечности болезненны, способствуют продвижению бактерий по лимфатическим путям, отягощая состояние • Перилимфангиит проявляется участками уплотнения мягких тканей по ходу лимфатических сосудов • Иногда по ходу крупных лимфатических сосудов возникают инфильтраты и гнойники (гнойный лимфангиит).

    Лабораторные исследования • Лейкоцитоз со сдвигом лейкоцитарной формулы влево • Бактериологическое исследование отделяемого первичного очага с определением чувствительности микрофлоры.

    Дифференциальная диагностика • Мигрирующий тромбангит • Тромбофлебит поверхностных вен • Рожа.

    Лечение • Диета. Ограничение поваренной соли до 6 г/сут • Вскрытие и дренирование очага инфекции • Покой (иммобилизация конечности), т.к. двигательная активность способствует распространению инфекции по лимфатическим путям • Антибиотики в соответствии с чувствительностью микрофлоры.

    Осложнения • Сепсис • Флегмона • Абсцесс • Тромбофлебит.
    Течение и прогноз • Обычно острое, рецидивирующее • Повторные атаки возможны при вторичной хронической лимфедеме • Прогноз в большинстве случаев благоприятный.
    Профилактика. Тщательная и своевременная хирургической обработке ран, вскрытие и дренировании абсцессов, флегмон.

    МКБ-10 • I89.1 Лимфангиит.

    9. Лимфангит – острое воспаление лимфатических сосудов.

    Не является самостоятельным заболеванием, а лишь спутником других форм острой гнойной хирургической инфекции. Возможны варианты, когда первичный очаг поражения практически излечен, поэтому лимфангит может представляться самостоятельным заболеванием.

    Этиология и патогенез:

    Заболевание вызывается стафилококком. Лимфангит развивается из-за повреждения эндотелия лимфатических сосудов микроорганизмами, приводящего к отеку стенки сосуда и инфильтрации окружающих тканей лимфоцитами (паралимфангит).

    При хронических очагах инфекции лимфангит может рецидивировать, приводя к облитерации лимфатических сосудов с постепенным развитием слоновости.

    Классификация:

        • Сетчатый лимфангит – повреждаются самые мелкие лимфатические сосуды в области первичного очага.

        • Стволовой лимфангит – воспаление захватывает ствол лимфатического сосуда.

    • Глубокий лимфангит – длительное время остается не распознанным, сопровождается свертыванием лимфы и образованием пробок, препятствующих нормальному току лимфы.

    Клиника:

    Присоединение лимфангита всегда отягощает течение основного заболевания. При сетчатом лимфангите наблюдается выраженная гиперемия кожи, которая не имеет четких границ, или определяется сетчатый рисунок в зоне гиперемии. При стволовом лимфангите гиперемия имеет вид отдельных полос, идущих от очага воспаления к регионарному лимфатическому узлу. Кожа над воспаленным лимфатическим сосудом отечная, уплотнена в виде шнуров. При глубоком лимфангите гиперемия кожи отсутствует, присутствует боль в конечности, отек, раннее присоединение лимфаденита.

    Лечение:

    • Постельный режим и энергичная санация первичного очага является залогом успешного лечения лимфангита.

    • Антибиотикотерапия препаратами широкого спектра действия для предупреждения развития сепсиса.

    10. Лимфаденит – острое воспаление лимфатических узлов.

    Этиология и патогенез:

    Возбудители заболевания различные гноеродные микроорганизмы. Лимфатические узлы являются своеобразным барьером между межклеточной средой организма и системой кровообращения. Задерживая микроорганизмы, они обеспечивают нейтрализацию их, отвечая той или иной степенью воспалительной реакции на их присутствие. Воспалительный процесс начинается с серозного отека, который может перейти в гнойный, и исходом в аденофлегмону.

    К моменту возникновения лимфаденита первичный очаг может подвергнуться полностью обратному развитию.

    Клиника:

    I Общие симптомы интоксикации – головная боль, слабость, повышение температуры тела.

    II Местные симптомы:

    • При серозном лимфадените – увеличиваются лимфатические узлы, в их зоне характерны тупые боли. Они плотные, не спаяны с окружающими тканями, кожа над ними не изменена.

    • При гнойном лимфадените – боль усиливается, лимфатические узлы сливаются между собой и окружающими тканями. Кожа над ними гиперемирована. По появлению размягчения в инфильтрате можно судить о развитие аденофлегмоны.

    Воспаление и лимфатическая функция — PMC

    Front Immunol. 2019; 10: 308.

    Институт фармацевтических наук, Швейцарский федеральный технологический институт, ETH Zurich, Zurich, Switzerland

    Под редакцией: Beth Ann Tamburini, Университет Колорадо Денвер, США

    Рецензирование: Sophia Ran, Университет Южного Иллинойса Школа медицины, США; Гирдхари Лал, Национальный центр клеточных исследований (NCCS), Индия

    Эта статья была отправлена ​​в раздел журнала Frontiers in Immunology «Иммунологическая толерантность и регулирование»

    Поступила в редакцию 1 ноября 2018 г.; Принято 6 февраля 2019 г.

    Это статья с открытым доступом, распространяемая на условиях лицензии Creative Commons Attribution License (CC BY). Использование, распространение или воспроизведение на других форумах разрешено при условии указания оригинального автора(ов) и владельца(ей) авторских прав и при условии цитирования оригинальной публикации в этом журнале в соответствии с общепринятой академической практикой. Запрещается использование, распространение или воспроизведение без соблюдения этих условий.

    Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

    Abstract

    Лимфатическая сосудистая сеть играет решающую роль в регуляции воспалительной реакции, влияя на дренирование внесосудистой жидкости, медиаторов воспаления и лейкоцитов. Лимфатические сосуды претерпевают выраженное расширение в воспаленной ткани и проявляют повышенную проницаемость, что указывает на снижение функциональности. Вмешательство в лимфатическую экспансию путем блокирования сигнальной оси фактора роста эндотелия сосудов С (VEGF-C)/рецептора фактора роста эндотелия сосудов 3 (VEGFR-3) усугубляет воспаление при различных моделях заболеваний, включая воспалительное заболевание кишечника (ВЗК), ревматоидный артрит. и воспаление кожи.Напротив, было показано, что стимуляция лимфатических сосудов, например, трансгенной или вирусной гиперэкспрессией, а также локальными инъекциями VEGF-C, снижает тяжесть воспаления на моделях ревматоидного артрита, воспаления кожи и ВЗК. Поразительно, индуцированное расширение лимфатических сосудов улучшает лимфатическую функцию, что оценивается по дренированию красителей, флуоресцентных индикаторов или воспалительных клеток и меченых антигенов. На эффективность дренажа лимфатических сосудов влияет проницаемость сосудов и насосная активность, на которые влияет передача сигналов VEGF-C/VEGFR-3, а также несколько медиаторов воспаления, включая TNF-α, IL-1β и оксид азота.Учитывая благоприятные эффекты активации лимфатических сосудов при воспалении, введение пролимфангиогенных факторов, таких как VEGF-C, предпочтительно целенаправленно, в зависимости от места воспаления, представляет собой многообещающий терапевтический подход при воспалительных патологиях.

    Ключевые слова: лимфатические сосуды, лимфангиогенез, воспаление, воспалительные заболевания кишечника, артрит, псориаз, кожа, медиаторы воспаления.Он характеризуется пятью основными симптомами: рубор (покраснение), жар (повышенный жар), опухоль (опухоль), болезненность (боль) и функциолаеза (нарушение функции), которые в основном опосредованы расширением и активацией кровеносных сосудов. . Воспаление обычно связано с образованием новых кровеносных (ангиогенез) и лимфатических (лимфангиогенез) сосудов из ранее существовавших сосудистых сетей. Интересно, что в то время как активация кровеносных сосудов, как сообщается, усугубляет тяжесть воспаления в различных моделях заболеваний (1–3), лимфатические сосуды, как правило, оказывают благотворное влияние, возможно, за счет улучшения клиренса внесосудистой жидкости, тем самым уменьшая образование отека. и уровни провоспалительных медиаторов, а также количество иммунных клеток.

    В этом обзоре представлен обзор исследований, изучающих роль лимфатического расширения и функции при распространенных воспалительных заболеваниях, таких как воспаление кожи, воспалительное заболевание кишечника (ВЗК) и ревматоидный артрит (РА). Кроме того, описаны известные эффекты медиаторов воспаления на лимфатические сосуды и широко используемые мышиные модели.

    Лимфатическая сосудистая сеть представляет собой иерархически структурированную одностороннюю цепь, состоящую из начальных капилляров, у которых отсутствует сплошная базальная мембрана и покрытие гладкомышечными клетками, впадающих в более крупные коллекторы, покрытые гладкомышечными клетками, и, в конечном счете, в лимфатические узлы.В условиях воспаления лимфатическая система имеет решающее значение, так как она необходима для обеспечения гомеостаза тканевой жидкости за счет дренирования большего количества внесосудистой жидкости, происходящей из все более проницаемых, воспаленных кровеносных сосудов. Действительно, было обнаружено, что повышенное давление интерстициальной жидкости приводит к расширению начальных лимфатических сосудов, что облегчает попадание жидкости и воспалительных клеток в лимфатические сосуды и, таким образом, их удаление из воспаленной ткани (4).Кроме того, лимфатические сосуды имеют решающее значение для иммунного надзора, поскольку они служат основными путями транспорта клеток и медиаторов воспаления в лимфатические узлы, где формируются иммунные реакции.

    Наиболее тщательно охарактеризованная сигнальная ось, участвующая в лимфатической экспансии и развитии, состоит из рецептора фактора роста эндотелия сосудов 3 (VEGFR-3) и его лигандов VEGF-C и VEGF-D. VEGFR-3 является частью семейства рецепторных тирозинкиназ и широко экспрессируется в эндотелиальных клетках сосудов во время эмбрионального развития, но в физиологических условиях во взрослом организме сильно ограничивается лимфатическими эндотелиальными клетками (LEC) (5).

    VEGF-C является основным лигандом VEGFR-3 и индуцирует пролиферацию и миграцию эндотелиальных клеток (6, 7). Он подвергается интенсивному посттрансляционному протеолитическому процессингу, который также регулирует связывающие свойства молекулы. Полностью процессированный VEGF-C связывает VEGFR-3 и, хотя и с меньшей аффинностью, VEGFR-2 (8). Мутированная форма VEGF-C, в которой цистеин 156 заменен серином (VEGF-C156Ser), избирательно связывает VEGFR-3 (9).

    Сообщалось, что VEGF-D индуцирует пролиферацию эндотелиальных клеток (10).У мышей VEGF-D связывает исключительно VEGFR-3, в то время как полностью процессированный человеческий VEGF-D также может связывать VEGFR-2 (11).

    Для изучения роли лимфатических сосудов при различных патологиях были созданы различные линии мышей с модифицированной сигнальной осью VEGFR-3. У мышей K14-VEGF-C избыточная экспрессия VEGF-C происходит под контролем промотора кератина-14, что приводит к повышенным уровням фактора роста в коже и расширению кожной лимфатической сосудистой сети (12). Подобная лимфатическая гиперплазия наблюдалась у мышей, трансгенных по VEGF-D (K14-VEGF-D) (13).Напротив, у мышей со сверхэкспрессией растворимой формы VEGFR-3 в коже (мыши K14-VEGFR-3-Ig) отсутствуют кожные лимфатические сосуды и развиваются отеки стоп и кожи (14).

    Помимо стимуляции или ингибирования расширения лимфатических сосудов, клиренсная способность лимфатических сосудов регулируется различными сигналами. На эффективность дренажа влияет проницаемость сосудов и насосная активность лимфатических сосудов. Медиаторы, индуцирующие повышенную проницаемость лимфатических сосудов, включают TNF-α, IL-1β, гистамин и ось VEGF-C/VEGFR-3 (15–17).Лимфатические сокращения и, следовательно, насосная функция отрицательно регулируются различными медиаторами воспаления, включая простагландины, гистамин и оксид азота (NO), в то время как VEGF-C оказывает усиливающее действие (18–21). NO регулирует функцию лимфатических сосудов, воздействуя на гладкомышечные клетки лимфы, что приводит к вазодилатации. Он продуцируется эндотелиальной синтазой оксида азота (eNOS) в физиологических условиях. Однако при воспалении его уровни повышаются из-за более высокой экспрессии индуцибельной синтазы оксида азота (iNOS) на иммунных клетках и воспаленном эндотелии, что связано со снижением частоты лимфатических сокращений (22).

    Лимфатическая сосудистая система при воспалительных заболеваниях

    Воспаление кожи

    Широкий спектр кожных патологий, включая псориаз, атопический дерматит, розацеа и УФ-повреждения, характеризуется выраженным и часто длительным воспалением. Лимфатическая сосудистая сеть часто аберрантна в воспаленной коже; например, в псориатических бляшках человека лимфатические сосуды расширены и извиты (23–25). Тем не менее, лимфатическая дисрегуляция при заболеваниях человека привлекла сравнительно мало внимания.

    Для облегчения изучения этих заболеваний в целом и роли лимфатических сосудов в частности было создано несколько моделей мышей. Общепринятой моделью являются трансгенные мыши K14-VEGF-A, которые сверхэкспрессируют VEGF-A под контролем промотора кератина-14, что приводит к хронически повышенным уровням указанного фактора роста в коже и сопутствующему расширению, проницаемости кровеносных сосудов. У гомозиготных мышей спонтанно развивается хроническое воспаление кожи в возрасте 6 месяцев (26).У гемизиготных мышей контактный сенсибилизатор (например, оксазолон) может быть использован для запуска реакции контактной гиперчувствительности (CHS), приводящей к аналогичному хроническому воспалительному заболеванию кожи (24).

    У мышей дикого типа воспаление кожи может быть вызвано индуцированием CHS, воздействием УФ-В излучения, инъекцией бактериальных антигенов, таких как LPS, или применением провоспалительных средств, таких как тетрадеканоилфорболацетат (ТРА) или имихимод (27).

    С помощью этих моделей было тщательно изучено воспаление кожи на мышах, и было показано, что лимфатические сосуды функционально затруднены в облученной УФ-В хронически воспаленной коже уха.Синий Эванс, введенный в воспаленную кожу, окрашивал сильно расширенные лимфатические сосуды, которые были чрезвычайно протекающими, что указывало на снижение дренажной способности (1).

    Стимуляция лимфатических сосудов при воспалении кожи

    Активация лимфатических сосудов при воспалении кожи связана со снижением тяжести заболевания (обобщено в ). У мышей K14-VEGF-A, которые были скрещены с мышами K14-VEGF-C и подвергались хроническому ХС кожи уха, лимфатические сосуды были расширены, а воспаление оценивалось по образованию отека, инфильтрации воспалительных клеток и измененному эпидермису. пролиферация или дифференцировка, была значительно снижена по сравнению с контрольными мышами K14-VEGF-A с воспалением.Поразительно, расширение сосудов сопровождалось улучшением функции лимфатического клиренса. Местные инъекции VEGF-C156Ser оказывали аналогичные эффекты облегчения заболевания, что указывает на то, что за наблюдаемые противовоспалительные эффекты в основном отвечает VEGFR-3, а не VEGFR-2-опосредованная передача сигналов (28). В соответствии с этим наблюдением, местные инъекции VEGF-C156Ser также вызывали сильную лимфангиогенную реакцию и уменьшали воспалительный отек уха и инфильтрацию CD11b-позитивных иммунных клеток при воспалении кожи уха, облученном УФ-В (32).

    Таблица 1

    Эффекты стимуляции лимфатических сосудов при воспалительных заболеваниях.

    Эффекты

    0

    0

    0

    0

    0 064

    0
    модели животных воспалительный стимул Метод лимфатической активации сосудистой Ссылки
    ВОСПАЛЕНИЕ КОЖИ
    K14- Мыши VEGF-A Оксазолон Трансгенная доставка VEGF-C (скрещивание с мышами K14-VEGF-C) Уменьшение воспалительного отека и клеточной инфильтрации
    Расширение лимфатических сосудов кожи
    Нормализация кровеносных сосудов кожи, эпидермальная дифференцировка и пролиферация
    Улучшение Функция лимфатического дренажа
    (28) (28)
    Снижение воспаления Снижение воспалительного импульса Увеличенная кожная лимфатическая сосудистая сосудистая
    Нормализация сосудистой крови кожи
    Снижение инфильтрации воспалительных клеток
    Мыши K14-VEGF-C Инъекции LPS или LTA и MDP Трансгенная доставка VEGF-C Расширение лимфатических сосудов кожи и лимфатических узлов
    Увеличение миграции воспалительных клеток в лимфатические узлы
    Уменьшение воспалительного отека и эритемы 902er 9010
    . (31) (31)
    Оксазолон Снижение воспалительного отека и эпидермальное утолщение
    расширенная лимфатическая сосудистая сосудистая
    более низкие уровни IL-1β и VEGF-A
    K14-VEGF-D MICE UVB облучение Доставка трансгенного VEGF-D Уменьшение воспаления тори отек и утолщение эпидермиса
    Expanded лимфатических сосудов
    Улучшенная лимфатический дренаж функция
    (31)
    оксазолоном Снижение воспалительного отека и утолщение эпидермиса
    Expanded лимфатической васкулатура
    мышей дикого типа УФВ облучения Местная инъекция рекомбинантных VEGF-C156SER Снижение воспалительного отека и клеточной инфильтрации (32)
    Wildtype Mice DSS Adenoviral Доставка VEGF C Уменьшение тяжести колита и воспалительной клеточной инфильтрации
    Увеличение плотности и пролиферации лимфатических сосудов
    Улучшение функции лимфодренажа
    Увеличение миграции воспалительных клеток в лимфатические узлы
    (33)
    Мыши с нокаутом IL-10 90 092 Отсутствие противовоспалительного IL-10
    Rhumatoid Arthrititis
    TNF-α Трансгенные мыши TNF-α Переместимость Вирусная доставка адено, связанная адено VEGF-C Lymphatic Vasculature
    Снижение синовиального объема, кости и хрящей эрозии и остеокластные номера
    Улучшенное совместное движение и лимфатическое зазор
    (34)
    Ингибирование INOS Улучшена функция лимфатического зазора

    2 восстановленных лимфатических сокращений

    (35)

    Эти результаты согласуются с результатами другого исследования, изучающего роль макрофагов и лимфатических сосудов в воспалении кожи.У мышей K14-VEGF-C, подвергшихся воспалению кожи, индуцированному липополисахаридом (LPS) или липотейхоевой кислотой (LTA)/мурамилдипептидом (MDP), наблюдалось расширение лимфатических сосудов кожи и лимфатических узлов. Кроме того, уменьшались воспалительный отек тканей и покраснение кожи. Хотя разницы в клиренсе FITC-декстрана обнаружено не было, миграция воспалительных клеток в дренирующие лимфатические узлы и дренаж флуоресцентно меченого антигена значительно ускорялись у мышей K14-VEGF-C.Эти эффекты, по-видимому, зависят от макрофагов, поскольку клодронат-опосредованное истощение этих клеток снижает лимфангиогенез и замедляет разрешение воспаления (29). В других исследованиях также сообщалось об усилении лимфодренажной функции из-за стимуляции лимфатической системы, например, после многократного нанесения ТРА на кожу спины трансгенных мышей K14-VEGF-C, у которых удалялся специфический для лимфатической системы индикатор ближнего инфракрасного диапазона. быстрее, чем у мышей дикого типа (30). Аналогичным образом, в исследовании острого кожного воспаления у трансгенных мышей как K14-VEGF-C, так и, в меньшей степени, K14-VEGF-D было улучшено удаление синего Эванса из кожи уха, облученной УФ-В (31).Кроме того, у этих мышей также наблюдался меньший воспалительный отек и меньшее утолщение эпидермиса при воспалении кожи, вызванном оксазолоном и УФ-В. Уменьшение воспаления в целом было более выраженным у мышей, трансгенных по VEGF-C, чем у животных, трансгенных по VEGF-D, что указывает на более сильные противовоспалительные эффекты VEGF-C (31).

    Ингибирование лимфатических сосудов при воспалении кожи

    В отличие от стимуляции лимфатических сосудов ингибирование лимфатических сосудов, как было показано в нескольких исследованиях, усугубляет воспаление кожи (обобщено в ).Опосредованное антителами блокирование VEGFR-3 поразительно уменьшало количество лимфатических сосудов в воспаленной коже уха мышей K14-VEGF-A во время реакции CHS. В то же время отек тканей, утолщение эпидермиса, пролиферация кератиноцитов и количество CD8- и CD11b-позитивных клеток были значительно увеличены, что свидетельствует о более тяжелом воспалительном фенотипе. Интересно, что блокирование VEGFR-2 отдельно или в сочетании с VEGFR-3 облегчало воспаление, что указывает на то, что опосредованное VEGFR-2 ингибирование кровеносных сосудов полезно при воспалении кожи и перевешивает пагубные эффекты ингибирования VEGFR-3 (28).Аналогично, аденовирусная избыточная экспрессия растворимого VEGFR-3 сильно снижала лимфангиогенез у мышей, подвергшихся воспалению кожи, индуцированному LPS или LTA/MDP, что приводило к задержке разрешения воспаления, более медленному клиренсу FITC-декстрана, а также FITC-меченого LPS и уменьшению миграция воспалительных клеток из кожи в дренирующие лимфатические узлы (29). Системное, опосредованное антителами ингибирование VEGFR-3 также приводило к увеличению образования отека и числа CD11b-позитивных клеток в коже уха, облученной УФ-В (36).

    Таблица 2

    Эффекты ингибирования лимфатических сосудов при воспалительных заболеваниях.

    Эффекты Увеличенные лимфатические сосуды
    модели животных воспалительный стимул Способ ингибирования лимфатической сосудистой Ссылки
    ВОСПАЛЕНИЕ КОЖИ
    K14- VEGF-A Mice Oxazolone Блокировка антитела к VEGFR-3 снижение лимфатической сосудистой сосудистой Увеличение воспалительного отека и эпидермальное утолщение (28) Mice-Tyce
    Увеличение диких типов Инъекции LPS или LTA и MDP Adenoviral Vegfr-3 Переключение Отсроченное воспаление Разрешение Снижение лимфатического дренажа и воспалительного ячейки (29)
    UVB Облучение Блокировка антитела до VEGFR-3 Увеличение воспалительного отека и воспалительного инвентаря (36)
    Micetytype Mice DSS Блокировка антитела до VEGFR-3 Увеличение тяжести колита
    Снижение плотности судна, пролиферации LV, функция лимфатического дренажа и миграция клеток в LN
    33 к ln (33) (33)

    0
    Увеличение колита тяжести и отека (37)
    ревматоидный артрит
    TNF-α Трансгенные мыши TNF-α сверхэкспрессия Блокирующие антитела к VEGFR-3 Уменьшение лимфатических сосудов l числа и лимфодренаж
    Меньшие дренирующие ЛУ
    Повышенное воспаление суставов
    (38)

    Воспалительное заболевание кишечника

    Термин воспалительное заболевание кишечника (ВЗК) включает болезнь Крона (БК) и язвенный колит (ЯК), которые характеризуются хроническим воспалением желудочно-кишечного тракта.В то время как ЯК обычно поражает толстую кишку и проявляется поверхностными изъязвлениями слизистой и подслизистой оболочек, БК может возникать в любом месте желудочно-кишечного тракта и часто вызывает трансмуральное воспаление. Как и в случае воспаления кожи, исследования долгое время были сосредоточены на изменениях в кровеносных сосудах, и VEGF-A был предложен в качестве важного медиатора ВЗК (39, 40).

    У людей, страдающих ВЗК, обычно наблюдаются лимфангиогенез, обструкция лимфатических сосудов, дилатация и отек подслизистой оболочки (41–44), а аномалии в лимфатических сосудах уже были распознаны во время первоначальной характеристики БК (45).В дополнение к морфологическим изменениям снижается функциональность связанных с ВЗК лимфатических сосудов. В исследовании у пациентов с БК применялись инъекции красителя патентованного синего V, окрашивающего лимфатические сосуды, в воспаленную толстую кишку, и были продемонстрированы морфологические аберрации и функциональные нарушения лимфатических сосудов, которые могут быть связаны с тяжестью заболевания. Поразительно, но после хирургического вмешательства и регрессии воспаления внешний вид лимфатических сосудов вернулся к норме, что указывает на то, что функция лимфатических сосудов может быть вовлечена в патогенез ВЗК у людей (46).В соответствии с этим более низкая плотность лимфатических сосудов может быть связана с повышенным риском рецидива БК (47).

    Было проведено множество исследований на мышах с ВЗК, две из которых наиболее часто используются для мышей с нокаутом IL-10 и колита, вызванного декстрансульфатом натрия (DSS). У мышей с дефицитом ИЛ-10 спонтанно развивается колит в возрасте 10–12 недель, скорее всего, из-за отсутствия противовоспалительной и иммунодепрессивной активности ИЛ-10 (48, 49).

    Колит, вызванный DSS, зависит от введения детергента DSS в питьевой воде, который повреждает кишечный эпителий, наиболее сильно в дистальном отделе толстой кишки, и нарушает его барьерную функцию, делая подлежащие ткани доступными для бактерий и связанных с ними веществ.Чтобы смоделировать острое воспаление, мышам обычно дают DSS в течение определенного периода времени (например, в течение недели), при хроническом воспалении мышам дают несколько циклов DSS и периодическую обычную питьевую воду (50, 51).

    Стимуляция лимфатических сосудов при воспалительном заболевании кишечника

    Подобно воспалению кожи, индуцирование лимфатических сосудов обычно коррелирует со снижением тяжести воспаления (резюмировано в ).

    У мышей с нокаутом IL-10, а также у животных, перенесших DSS-индуцированный колит, аденовирусная доставка VEGF-C значительно увеличивала плотность лимфатических сосудов и была связана со снижением потери массы тела и тяжести заболевания, что оценивалось по консистенции стула и наличию или отсутствие крови в кале.Более того, гистологический анализ выявил уменьшение отека подслизистой оболочки и воспалительной клеточной инфильтрации, в то время как пролиферация LEC значительно увеличилась. Количественная оценка клиренса синего Эванса из воспаленной ткани дистального отдела толстой кишки выявила усиленную лимфодренажную функцию, что также отражалось в улучшенном клиренсе шариков, покрытых флуоресцентно меченым антигеном, и усиленной миграции воспалительных клеток из воспаленной ткани в дренирующие лимфатические узлы. Подобно наблюдениям при воспалении кожи, истощение макрофагов клодронатом в значительной степени устраняло защитные эффекты VEGF-C (33).Было высказано предположение, что VEGF-C может влиять на баланс цитокинов в воспаленной толстой кишке. Действительно, экспериментов in vitro показали, что VEGF-C индуцирует активацию IL-10 макрофагами, происходящими из костного мозга (33). В соответствии с этим сообщалось о повышенных уровнях ИЛ-10 в сочетании со снижением ИЛ-9, что связано с нарушением кишечного барьера, при лечении аденовирусно доставляемым VEGF-C у мышей, перенесших DSS-индуцированный колит (52, 53).

    Ингибирование лимфатических сосудов при воспалительном заболевании кишечника

    Блокирование VEGFR-3 приводило к ухудшению колита у мышей с нокаутом IL-10, а также у животных, получавших DSS, с точки зрения гистологической оценки (обобщено в ).У животных обеих моделей наблюдалось сильное снижение плотности лимфатических сосудов и пролиферация LEC при ингибировании VEGFR-3. В то же время лимфатический клиренс синего Эванса и бактериального антигена, а также мобилизация воспалительных клеток в дренирующие лимфатические узлы были значительно снижены (33).

    В другом независимом исследовании мышей с нокаутом IL-10 лечили блокирующим антителом к ​​VEGFR-3. Это привело к расширению и извитости лимфатических сосудов в толстой кишке, усилению подслизистого отека и более высокой лейкоцитарной инфильтрации в воспаленной ткани, а также к более высокой степени тяжести заболевания (37).

    Ревматоидный артрит

    Ревматоидный артрит (РА) представляет собой хроническое воспалительное заболевание, поражающее суставы и характеризующееся эпизодическими обострениями (54). В своей хронической стадии РА обычно сопровождается лимфаденопатией и снижением функции лимфодренажа, как показано, например, при отслеживании дренажа внутрикожно введенного радиоактивно меченного альбумина из предплечья (55). Лимфангиогенез также обычно наблюдается в суставах людей, больных РА, и был воспроизведен на мышиных моделях заболевания (56, 57).

    Обычно используемые мышиные модели ревматоидного артрита включают трансгенных мышей TNF-α и мышей K/B × N. Первые сверхэкспрессируют человеческий TNF-α и спонтанно развивают хроническое прогрессирующее воспаление суставов в возрасте ~4 недель (58). Мыши K / B × N моделируют аутоиммунный аспект РА и основаны на линии мышей, трансгенных по Т-клеточному рецептору, специфичному для бычьей рибонуклеазы. После размножения на фоне NOD случайное распознавание антигена, полученного из NOD, вызывает начало воспаления суставов через 4 недели после рождения (59).

    Функция лимфатической системы в основном изучалась у этих животных, и была предложена двухфазная модель [рассмотрено в (60)]. В начальной фазе «расширения» при воспалении суставов лимфангиогенез и увеличение подколенных лимфатических узлов с или без усиления сокращений лимфатических сосудов ограничивают воспалительную реакцию (57, 61, 62). Во время следующей фазы «коллапса» подколенные лимфатические узлы сморщиваются, сокращения лимфатических сосудов и функция лимфодренажа значительно снижаются.В то же время воспаление суставов усиливается (61, 63–65). Блокирование передачи сигналов TNF-α приводило к усилению лимфатических сокращений и уменьшению воспаления суставов (66).

    Подобные изменения в характеристиках лимфатических узлов также были зарегистрированы у пациентов-людей, где гипертрофия лимфатических узлов наблюдалась у подавляющего большинства пациентов, страдающих активным РА, в то время как у здоровых людей и пациентов в стадии ремиссии изменений в лимфатических узлах не наблюдалось (67).

    Стимуляция лимфатических сосудов при ревматоидном артрите

    Стимуляция лимфатических сосудов была связана со снижением тяжести заболевания в моделях РА на животных (обобщено в ).Аденоассоциированная вирусная (AAV) доставка VEGF-C в воспаленные голеностопные суставы 6-недельных трансгенных мышей TNF-α частично обращала вспять связанное с воспалением увеличение синовиального объема и значительно улучшала подвижность ног. Гистологический анализ показал, что у мышей, получавших VEGF-C, наблюдалось меньшее разрушение хрящей и костей, чем у животных, которым вводили контрольный вектор. При хроническом артрите (у мышей в возрасте 5 месяцев) лимфатический дренаж индоцианина зеленого (ICG) из подушечки лапы был сильно снижен у трансгенных по TNF-α мышей по сравнению с мышами дикого типа.AAV-опосредованная доставка VEGF-C значительно улучшала клиренс ICG из лап и увеличивала количество лимфатических сосудов в паннусе воспаленного сустава (34).

    В альтернативном подходе, основанном на наблюдении, что повышенные уровни NO при воспалении снижают лимфатическую прокачку, изучалась функция лимфатических сосудов с использованием ингибирования NOS. Местное применение L-N6-(1-иминоэтил)лизин 5-тетразоламида (L-NIL), умеренно селективного ингибитора iNOS (68), у трансгенных по TNF-α мышей с коллапсом лимфатических узлов восстановило лимфатические сокращения и значительно улучшило Транспорт ICG от подушечек стопы к подколенным лимфатическим узлам, в то время как метиловый эфир Nω-нитро-l-аргинина (L-NAME), неспецифический ингибитор как eNOS, так и iNOS, не был связан с полезными эффектами (35).Хотя влияние на тяжесть заболевания у этих мышей в исследовании не оценивалось, оно свидетельствует о том, что селективное ингибирование iNOS может предложить альтернативный и клинически значимый подход к терапии РА.

    Ингибирование лимфатических сосудов при ревматоидном артрите

    Ингибирование лимфатических сосудов приводило к ухудшению воспаления в мышиных моделях артрита (резюмировано в ). Инъекция трансгенным мышам TNF-α, у которых развилось воспаление суставов, с помощью антитела, блокирующего VEGFR-3, в течение 2 месяцев значительно уменьшала количество лимфатических капилляров в дренирующих подколенных лимфатических узлах и воспаленных лодыжках.Блокирование VEGFR-3 также усугубляло воспаление коленных и голеностопных суставов, поскольку увеличение объема синовиальной оболочки с течением времени, а также ее абсолютный размер были выше у этих животных по сравнению с контрольной группой, получавшей IgG. Точно так же гистологический анализ срезов, окрашенных гематоксилином-эозином, выявил обострение воспаления после ингибирования VEGFR-3. Подобно эффектам, наблюдаемым при хроническом воспалении кожи, блокирование VEGFR-2 было связано со снижением воспалительной реакции, что оценивалось по объему синовиальной оболочки и гистологической оценке.Лимфодренажная функция, оцениваемая по отслеживанию сигнала ICG в лапах и дренированию подколенных лимфатических узлов после инъекции в подушечку лапы, резко снижалась при блокировании VEGFR-3 (38).

    Влияние медиаторов воспаления на лимфатические сосуды

    Воспалительный лимфангиогенез в основном опосредован VEGF-A и VEGF-C, которые продуцируются кератиноцитами и стромальными клетками, такими как фибробласты, а также иммунными клетками, в первую очередь макрофагами (69–71) . Действительно, было обнаружено, что несколько медиаторов воспаления индуцируют транскрипцию VEGF-C (72–74).

    Макрофаги имеют решающее значение, как показано на модели ВЗК и воспаления кожи, вызванного ЛПС, где истощение макрофагов усугубляет воспаление (29, 33). Хотя VEGF важны для индуцированного воспалением лимфангиогенеза, существует множество дополнительных факторов. Например, было показано, что IL-17, важнейший цитокин в патогенезе псориаза, индуцирует лимфангиогенез in vitro и в анализах микрокарманов роговицы (75), а IL-8 способствует лимфангиогенезу в экспериментах на клеточных культурах и на животных моделях псориаза. лимфедема (76).Сходным образом ингибирование TGF-β, которое опосредует противовоспалительные эффекты, поддерживает лимфангиогенез в мышиной модели перитонита и лимфедемы (77, 78). В соответствии с этим цитокины, характерные для клеток T H 2, такие как IL-4 и IL-13, которые часто связаны с разрешением воспаления, ингибируют лимфангиогенез (79). Интересно, что некоторые медиаторы воспаления обладают антилимфангиогенной активностью. Интерферон-γ (IFN-γ), продуцируемый активированными Т-клетками, уменьшал образование лимфатических сосудов как человеческих, так и мышиных лимфатических эндотелиальных клеток in vitro , а также в лимфатических узлах мыши (15, 80).Точно так же TNF-α ингибировал образование капилляров и пролиферацию LEC мыши, в то время как IL-1β не оказывал последовательного влияния на пролиферацию, но снижал барьерную функцию LEC (15). Действительно, медиаторы воспаления не только влияют на лимфангиогенез, но и более непосредственно воздействуют на лимфатическую функцию. Простагландины, IL-1β, IL-6 и TNF-α уменьшали частоту лимфатической прокачки (81, 82). Точно так же медиаторы воспаления влияют на проницаемость лимфатических сосудов, что было продемонстрировано in vitro путем оценки влияния широкого спектра медиаторов воспаления на монослои лимфатических эндотелиальных клеток крыс, где IL-6, TNF-α и IFN-γ поразительно увеличивали проницаемость. , вероятно, за счет снижения экспрессии сосудистого эндотелия (VE)-кадгерина (83).В нескольких исследованиях изучалась проницаемость лимфатических сосудов in vivo , но результаты тех, которые показали нарушение барьерной функции, а также выраженную проницаемость и сообщали о VEGF-A как важном медиаторе этих эффектов, возможно, путем передачи сигнала через VEGFR-2 (1, 84 ).

    Важно учитывать, что цитокины и факторы роста часто обладают плейотропными эффектами, что затрудняет различие между прямыми и непрямыми механизмами. Например, сообщалось, что IL-17 индуцирует экспрессию VEGF-D, тем самым косвенно запуская лимфангиогенез (75).Широкий спектр сигнальных молекул, участвующих в воспалении, а также их различные и часто плейотропные эффекты на лимфатические сосуды приводят к очень сложной сети сигналов, которая до сих пор не полностью изучена.

    Выводы

    Лимфатическая сосудистая сеть представляет собой решающую, хотя часто недооцениваемую роль в воспалении. Лимфатические сосуды служат основным транспортным путем для медиаторов воспаления, жидкости, антигенов и иммунных клеток, таким образом, играя ключевую роль в инициации и разрешении воспаления.Действительно, остается спорным, способствует ли разрастание лимфатического эндотелия воспалению, облегчая транспорт лейкоцитов в лимфатические узлы и усиливая иммунный ответ, или же лимфатические сосуды способствуют разрешению воспаления путем дренирования медиаторов воспаления и клеток из очага воспаления. Тем не менее, в последние годы в ряде исследований, описанных выше, сообщалось об уменьшении тяжести воспаления после активации и/или расширения лимфатических сосудов (показано для воспаления кожи на рис. терапевтический подход.Однако следует учитывать, что передача сигналов VEGF-C/VEGFR-3 сама по себе может также объяснять некоторые противовоспалительные эффекты, наблюдаемые у трансгенных мышей VEGF-C, поскольку было показано, что она снижает выработку провоспалительных цитокинов. и защитить мышей от септического шока (85).

    Влияние стимуляции или торможения лимфатических сосудов на воспаление кожи. Воспаленная кожа проявляется утолщением эпидермиса, отеком и инфильтрацией воспалительными лейкоцитами (например, CD8-позитивными клетками или макрофагами и гранулоцитами).Стимуляция лимфатических сосудов облегчает воспаление, уменьшает отек, утолщение эпидермиса и воспалительную инфильтрацию, улучшая лимфодренаж, тем самым снижая количество воспалительных клеток в воспаленной коже. Ингибирование лимфатических сосудов усугубляет воспаление и снижает лимфатический клиренс.

    Интересно, что на лимфатические сосуды также влияют установленные стандартные методы лечения, используемые для лечения воспалительных заболеваний, например, при РА, где блокирование TNF-α приводило к усилению лимфангиогенного ответа и усилению лимфатических сокращений в воспаленной ткани (66, 86). ).Другие методы лечения, направленные на блокирование некоторых цитокинов (например, IL-17 при псориазе), также могут частично оказывать противовоспалительное действие за счет модуляции лимфатических сосудов. Любопытно, что некоторые противовоспалительные средства связаны с антилимфангиогенной активностью. Глюкокортикоиды уменьшали лимфангиогенез при воспалении роговицы и хроническом воспалении дыхательных путей, опосредованном инфекцией M. pulmonis (87, 88). Кроме того, сообщалось, что простагландин Е2, биосинтез которого ингибируется блокирующими циклооксигеназу (ЦОГ) нестероидными противовоспалительными препаратами (НПВП), индуцирует экспрессию VEGF-C и лимфангиогенез при раке легкого (73).Когерентно, ингибирование ЦОГ-2 снижает индуцированный опухолью лимфангиогенез (89). Возможным объяснением этих результатов может быть то, что сильнодействующие терапевтические агенты достаточно сильно ингибируют воспаление, чтобы также уменьшить сопутствующий индуцированный воспалением лимфангиогенез. Более того, в то время как простагландин E2 препятствует лимфатической экспансии, также сообщалось, что он ингибирует лимфатическую функцию (81). Следовательно, глюкокортикоиды и НПВП могут улучшать лимфатический клиренс, несмотря на снижение лимфангиогенеза.Однако для тщательного изучения этих возможностей необходимы дальнейшие исследования.

    Важно учитывать, что иммуномодулирующие свойства лимфатического эндотелия, которым в последнее десятилетие уделяется все больше внимания, могут, по крайней мере, частично объяснить наблюдаемые противовоспалительные эффекты индукции лимфатических сосудов. Хорошим примером является рецептор D6, который в высокой степени экспрессируется лимфатическими эндотелиальными клетками и улавливает воспалительные цитокины. Мыши с дефицитом D6 страдали более тяжелым воспалением кожи и колитом по сравнению с животными дикого типа (90, 91), следовательно, лимфатическая экспансия может повышать уровни D6 и, соответственно, снижать уровни медиаторов воспаления в воспаленной ткани, что приводит к снижению тяжести заболевания.Однако иммуномодулирующая роль лимфатических сосудов выходит за рамки данного обзора.

    Хотя VEGF-C ассоциируется с противовоспалительным действием при различных заболеваниях, как описано выше, его биологическая роль очень сложна и может зависеть от органов и заболеваний. Например, в условиях экспериментального ожирения трансгенно сверхэкспрессированный VEGF-C индуцировал провоспалительный хемотаксис макрофагов, увеличение веса и ухудшение метаболических параметров, таких как резистентность к инсулину (92).Напротив, блокада VEGF-C и VEGF-D путем избыточной экспрессии растворимой формы VEGFR-3 уменьшала инфильтрацию макрофагов и улучшала чувствительность к инсулину при ожирении, вызванном диетой (93). Аналогично, в исследованиях опухолей сообщалось, что VEGF-C индуцирует опухолевый лимфангиогенез и стимулирует миграцию макрофагов (94), что может объяснить наблюдаемое увеличение метастазирования опухоли у мышей, трансгенных VEGF-C (95).

    Применение VEGF-C при этих заболеваниях может быть контрпродуктивным, поэтому эти результаты подчеркивают сложность биологии VEGF-C и подчеркивают необходимость тщательной оценки возможных полезных и вредных эффектов VEGF-C при отдельных патологиях.

    Принимая во внимание все имеющиеся данные, индукция лимфангиогенеза и активация лимфатических сосудов в условиях воспаления представляют собой мощный терапевтический подход. Поэтому поразительно, что эта стратегия не была изучена более тщательно, не говоря уже о клиническом использовании. Основным препятствием было отсутствие клинически осуществимых систем доставки лимфангиогенных факторов. Однако в недавнем исследовании был охарактеризован направленный слитый белок F8-VEGF-C, который специфически накапливается в воспаленной ткани, и было показано, что он уменьшает воспаление на двух моделях воспаления кожи у мышей, возможно, заполняя этот терапевтический пробел (96).

    Вклад автора

    С.С. разработал и написал рукопись. MD разработал и отредактировал рукопись.

    Заявление о конфликте интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Сноски

    Финансирование. Работа в лаборатории авторов была поддержана грантом Швейцарского национального научного фонда 310030_166490 и грантом Европейского исследовательского совета LYVICAM.

    Ссылки

    1. Kajiya K, Hirakawa S, Detmar M. Фактор роста эндотелия сосудов-A опосредует индуцированное ультрафиолетом B нарушение функции лимфатических сосудов. Ам Джей Патол. (2006) 169:1496–503. 10.2353/ajpath.2006.060197 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]2. Чидлоу Дж. Х., Лэнгстон В., Грир Дж. Дж. М., Останин Д., Абдельбаки М., Хоутон Дж. и др. . Дифференциальная ангиогенная регуляция экспериментального колита. Ам Джей Патол. (2006) 169:2014–30. 10.2353/ajpath.2006.051021 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]3.Эльшабрави Х.А., Чен З., Волин М.В., Равелла С., Вирупаннавар С., Шахрара С. Патогенная роль ангиогенеза при ревматоидном артрите. Ангиогенез (2015) 18:433–48. 10.1007/s10456-015-9477-2 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]4. Скобе М., Детмар М. Структура, функция и молекулярный контроль лимфатической системы кожи. J Investig Dermatol Symp Proc. (2000) 5:14–9. 10.1046/j.1087-0024.2000.00001.x [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]5. Кайпайнен А., Корхонен Дж., Мустонен Т., ван Хинсберг В.В., Фанг Г.Х., Дюмон Д. и другие.. Экспрессия гена fms-подобной тирозинкиназы 4 становится ограниченной лимфатическим эндотелием во время развития. Proc Natl Acad Sci USA. (1995) 92:3566–70. 10.1073/pnas.92.8.3566 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]6. Жуков В., Паюсола К., Кайпайнен А., Чилов Д., Лахтинен И., Кукк Э. и др. Новый фактор роста эндотелия сосудов, VEGF-C, является лигандом для тирозинкиназ рецепторов Flt4 (VEGFR-3) и KDR (VEGFR-2). ЭМБО Дж. (1996) 15:1751 10.1002/j.1460-2075.1996.tb00359.x [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]7. Макинен Т., Вейккола Т., Мустьоки С., Карпанен Т., Катимель Б., Найс ЕС и др. . Изолированные лимфатические эндотелиальные клетки передают сигналы роста, выживания и миграции через рецептор VEGF-C/D VEGFR-3. EMBO J. (2001) 20:4762–73. 10.1093/emboj/20.17.4762 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]8. Жуков В., Сорса Т., Кумар В., Йелч М., Клаессон-Уэлш Л., Цао Ю. и др. . Протеолитический процессинг регулирует специфичность рецептора и активность VEGF-C.Эмбо Дж. (1997) 16:3898–911. 10.1093/emboj/16.13.3898 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]9. Жуков В., Кумар В., Сорса Т., Ариги Э., Вейх Х., Саксела О. и др. . Рекомбинантный мутантный фактор роста эндотелия сосудов-С, утративший активность связывания, активации и проницаемости сосудов с рецептором фактора роста эндотелия сосудов-2. Дж. Биол. Хим. (1998) 273:6599–602. 10.1074/jbc.273.12.6599 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]10. Ахен М.Г., Йелч М., Кукк Э., Макинен Т., Виталий А., Уилкс А.Ф. и соавт.. Сосудистый эндотелиальный фактор роста D (VEGF-D) представляет собой лиганд для тирозинкиназ VEGF рецептора 2 (Flk1) и VEGF рецептора 3 (Flt4). Proc Natl Acad Sci USA. (1998) 95:548–53. 10.1073/pnas.95.2.548 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]11. Baldwin ME, Catimel B, Nice EC, Roufail S, Hall NE, Stenvers KL и др. . Специфичность связывания рецептора фактором роста эндотелия сосудов-d различна у мыши и человека. Дж. Биол. Хим. (2001) 276:19166–71. 10.1074/jbc.M100097200 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]12.Елч М., Кайпайнен А., Жуков В., Менг Х., Лаксо М., Раувала Х. и др. . Гиперплазия лимфатических сосудов у трансгенных мышей VEGF-C. Наука (1997) 276:1423–5. 10.1126/science.276.5317.1423 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]13. Veikkola T, Jussila L, Makinen T, Karpanen T, Jeltsch M, Petrova TV, et al. . Передача сигналов через рецептор фактора роста эндотелия сосудов-3 достаточна для лимфангиогенеза у трансгенных мышей. Эмбо Дж. (2001) 20:1223–31. 10.1093/emboj/20.6.1223 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]14.Макинен Т., Юссила Л., Вейккола Т., Карпанен Т., Кеттунен М.И., Пулкканен К.Дж. и соавт. . Ингибирование лимфангиогенеза с последующей лимфедемой у трансгенных мышей, экспрессирующих растворимый рецептор VEGF-3. Нат Мед. (2001) 7:199–205. 10.1038/84651 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar] 15. Чайтаня Г.В., Фрэнкс С.Е., Кромер В., Уэллс С.Р., Бьенковска М., Дженнингс М.Х. и соавт. . Дифференциальные ответы цитокинов в лимфатических эндотелиальных клетках человека и мыши на цитокины in vitro. Лимфатический Рез Биол. (2010) 8:155–64. 10.1089/фунт.2010.0004 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]16. Бреслин Дж.В., Юань С.Ю., Ву М.Х. VEGF-C изменяет барьерную функцию культивируемых лимфатических эндотелиальных клеток посредством VEGFR-3-зависимого механизма. Лимфатический Рез Биол. (2007) 5:105–13. 10.1089/lrb.2007.1004 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]17. Бреслин Дж. В. ROCK и цАМФ способствуют целостности барьера лимфатических эндотелиальных клеток и модулируют барьерную дисфункцию, индуцированную гистамином и тромбином. Лимфатический Рез Биол. (2011) 9:3–11. 10.1089/lrb.2010.0016 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]18. Курц К.Х., Мур А.Н., Соуза-Смит Ф.М., Бреслин Дж.В. Участие рецепторов h2 и h3 и растворимой гуанилатциклазы в индуцированном гистамином расслаблении собирательных лимфатических сосудов брыжейки крысы. Микроциркуляция (2014) 21: 593–605. 10.1111/micc.12138 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]19. Низамутдинова И.Т., Маэдзима Д., Нагаи Т., Бриденбо Э., Тангасвами С., Чаттерджи В. и др. . Участие гистамина в эндотелийзависимой релаксации мезентериальных лимфатических сосудов.Микроциркуляция (2014) 21:640–8. 10.1111/micc.12143 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]20. Гашева О.Ю., Завея Д.С., Гашев А.А. Инициируемая сокращением NO-зависимая лимфатическая релаксация: саморегулирующийся механизм в грудном протоке крысы. Дж. Физиол. (2006) 575:821–32. 10.1113/jphysiol.2006.115212 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]21. Бреслин Дж.В., Годро Н., Уотсон К.Д., Рейносо Р., Юань С.Ю., Ву М.Х. Фактор роста эндотелия сосудов-С стимулирует лимфатическую помпу с помощью механизма, зависимого от VEGF-рецептора-3.Am J Physiol Heart Circ Physiol. (2007) 293:H709–H718. 10.1152/ajpheart.00102.2007 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]22. Ляо С., Ченг Г., Коннер Д.А., Хуан Ю., Кучерлапати Р.С., Манн Л.Л. и др. . Нарушение лимфатического сокращения, связанное с иммуносупрессией. Proc Natl Acad Sci USA. (2011) 108:18784–9. 10.1073/pnas.1116152108 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]23. Браверман ИМ. Электронно-микроскопические исследования микроциркуляции при псориазе. Джей Инвест Дерматол. (1972) 59:91–8.10.1111/1523-1747.ep12625852 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]24. Кунстфельд Р. Индукция кожных реакций гиперчувствительности замедленного типа у трансгенных мышей VEGF-A приводит к хроническому воспалению кожи, связанному со стойкой лимфатической гиперплазией. Кровь (2004) 104: 1048–57. 10.1182/blood-2003-08-2964 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]25. Хенно А., Блахер С., Ламберт С., Колидж А., Зайдель Л., Ноэль А. и др. . Измененная экспрессия маркеров ангиогенеза и лимфангиогенеза в непораженной коже бляшечного псориаза.Бр Дж Дерматол. (2009) 160:581–90. 10.1111/j.1365-2133.2008.08889.x [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]26. Ся Ю.П., Ли Б., Хилтон Д., Детмар М., Янкопулос Г.Д., Рудж Дж.С. Трансгенная доставка VEGF на кожу мыши приводит к воспалительному состоянию, напоминающему псориаз человека. Кровь (2003) 102: 161–8. 10.1182/blood-2002-12-3793 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]27. ван дер Фитс Л., Муриц С., Воерман Дж. С. А., Кант М., Бун Л., Ламан Дж. Д. и др. . Индуцированное имиквимодом псориазоподобное воспаление кожи у мышей опосредуется через ось IL-23/IL-17.Дж Иммунол. (2009) 182:5836–45. 10.4049/jimmunol.0802999 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]28. Huggenberger R, Ullmann S, Proulx ST, Pytowski B, Alitalo K, Detmar M. Стимуляция лимфангиогенеза с помощью VEGFR-3 подавляет хроническое воспаление кожи. J Эксперт Мед. (2010) 207:2255–69. 10.1084/jem.20100559 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]29. Катару Р.П., Юнг К., Ян С., Ян Х., Швенденер Р.А., Байк Дж.Е. и др. . Критическая роль макрофагов CD11b+ и VEGF в воспалительном лимфангиогенезе, клиренсе антигена и разрешении воспаления.Кровь (2009) 113: 5650–9. 10.1182/blood-2008-09-176776 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]30. Christiansen AJ, Dieterich LC, Ohs I, Bachmann SB, Bianchi R, Proulx ST, et al. . Лимфатические эндотелиальные клетки ослабляют воспаление за счет подавления созревания дендритных клеток. Онкотаргет (2016) 7: 39421–35. 10.18632/oncotarget.9820 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]31. Хаггенбергер Р., Сиддики С.С., Брандер Д., Ульманн С., Циммерманн К., Анциферова М. и соавт. . Важная роль активации лимфатических сосудов в ограничении острого воспаления.Кровь (2011) 117: 4667–78. 10.1182/blood-2010-10-316356 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]32. Каджия К., Саване М., Хаггенбергер Р., Детмар М. Активация пути VEGFR-3 с помощью VEGF-C ослабляет вызванное УФ-В образование отека и воспаление кожи, способствуя лимфангиогенезу. Джей Инвест Дерматол. (2009) 129:1292–8. 10.1038/jid.2008.351 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]33. Д’Алессио С., Корреале С., Таккони С., Ганделли А., Пьетрогранде Г., Ветрано С. и др. . Зависимая от VEGF-C стимуляция лимфатической функции улучшает экспериментальное воспалительное заболевание кишечника.Джей Клин Инвест. (2014) 124:3863–78. 10.1172/JCI72189 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]34. Zhou Q, Guo R, Wood R, Boyce BF, Liang Q, Wang YJ и др. . Фактор роста эндотелия сосудов С ослабляет повреждение суставов при хроническом воспалительном артрите за счет ускорения локального лимфодренажа у мышей. Ревмирующий артрит. (2011) 63:2318–28. 10.1002/art.30421 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]35. Liang Q, Ju Y, Chen Y, Wang W, Li J, Zhang L, et al. . Лимфатические эндотелиальные клетки, эфферентные к воспаленным суставам, продуцируют iNOS и ингибируют сокращение и отток лимфатических сосудов при TNF-индуцированном артрите у мышей.Артрит Res Ther. (2016) 18:62. 10.1186/s13075-016-0963-8 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]36. Каджия К., Детмар М. Важная роль лимфатических сосудов в контроле образования отеков и воспалений, вызванных УФ-В. Джей Инвест Дерматол. (2006) 126:919–21. 10.1038/sj.jid.5700126 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]37. Jurisic G, Sundberg JP, Detmar M. Блокада рецептора VEGF-3 усугубляет воспалительное заболевание кишечника и увеличение лимфатических сосудов. Воспаление кишечника Dis. (2013) 19:1983–9.10.1097/MIB.0b013e31829292f7 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]38. Guo R, Zhou Q, Proulx ST, Wood R, Ji RC, Ritchlin CT, et al. . Ингибирование лимфангиогенеза и лимфодренажа посредством блокады рецептора 3 сосудистого эндотелиального фактора роста увеличивает тяжесть воспаления в мышиной модели хронического воспалительного артрита. Ревмирующий артрит. (2009) 60:2666–76. 10.1002/art.24764 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]39. Scaldaferri F, Vetrano S, Sans M, Arena V, Straface G, Stigliano E и др.. VEGF-A связывает ангиогенез и воспаление в патогенезе воспалительного заболевания кишечника. Гастроэнтерология (2009) 136:585–95.e585. 10.1053/j.gastro.2008.09.064 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]40. Chidlow JH, Glawe JD, Pattillo CB, Pardue S, Zhang S, Kevil CG. VEGF 164 изоформа специфическая регуляция Т-клеточно-зависимого экспериментального колита у мышей. Воспаление кишечника Dis. (2011) 17:1501–12. 10.1002/ibd.21525 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]41. Гелефф С., Шоппманн С.Ф., Оберхубер Г.Увеличение экспрессирующих подопланин кишечных лимфатических сосудов при воспалительном заболевании кишечника. Арка Вирхова. (2003) 442: 231–7. 10.1007/s00428-002-0744-4 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]42. Педика Ф., Лигорио С., Тонелли П., Бартолини С., Баккарини П. Лимфангиогенез при болезни Крона: иммуногистохимическое исследование с использованием моноклонального антитела D2-40. Арка Вирхова. (2008) 452:57–63. 10.1007/s00428-007-0540-2 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]43. Хитли Р.В., Болтон П.М., Хьюз Л.Е., Оуэн Э.В. Брыжеечная лимфатическая обструкция при болезни Крона.Пищеварение (1980) 20: 307–13. 10.1159/000198452 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]44. Ван Круининген Х.Дж., Хейс А.В., Коломбель Дж.Ф. Гранулемы закупоривают лимфатические сосуды во всех слоях кишечника при болезни Крона. Апмис (2014) 122:1125–9. 10.1111/apm.12268 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]45. Крон Б.Б., Гинзбург Л., Оппенгеймер Г.Д. Регионарный илеит: патологическая и клиническая форма. ДЖАМА (1932) 99: 1323–9. 10.1001/jama.1932.02740680019005 [CrossRef] [Google Scholar]46. Тонелли Ф., Джудичи Ф., Лиша Г.Связан ли лимфатический статус с регрессом воспаления при болезни Крона? Мир J Gastrointest Surg. (2012) 4: 228–33. 10.4240/wjgs.v4.i10.228 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]47. Rahier JF, Dubuquoy L, Colombel JF, Jouret-Mourin A, Delos M, Ferrante M, et al. . Снижение плотности лимфатических сосудов связано с послеоперационным эндоскопическим рецидивом болезни Крона. Воспаление кишечника Dis. (2013) 19:2084–90. 10.1097/MIB.0b013e3182971cec [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]48.Kühn R, Löhler J, Rennick D, Rajewsky K, Müller W. У мышей с дефицитом интерлейкина-10 развивается хронический энтероколит. Ячейка (1993) 75: 263–74. [PubMed] [Google Scholar]49. Спенсер Д.М., Вельдман Г.М., Банерджи С., Уиллис Дж., Левин А.Д. Различные воспалительные механизмы опосредуют ранний и поздний колит у мышей. Гастроэнтерология (2002) 122:94–105. 10.1053/gast.2002.30308 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]50. Окаясу И., Хатакеяма С., Ямада М., Окуса Т., Инагаки Ю., Накая Р. Новый метод индукции надежного экспериментального острого и хронического язвенного колита у мышей.Гастроэнтерология (1990) 98:694–702. 10.1016/0016-5085(90)-H [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]51. Chassaing B, Aitken JD, Malleshappa M, Vijay-Kumar M. Колит, вызванный декстрансульфатом натрия (DSS), у мышей. Карр Проток Иммунол. (2014) 104:Единица 15.25.−15.25.14. 10.1002/0471142735.im1525s104 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]54. Файрштейн ГС. Эволюция концепции ревматоидного артрита. Природа (2003) 423: 356–61. 10.1038/nature01661 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]56. Сюй Х., Эдвардс Дж., Банерджи С., Прево Р., Джексон Д.Г., Атанасу Н.А.Распределение лимфатических сосудов в нормальных и артритных синовиальных тканях человека. Энн Реум Дис. (2003) 62:1227–9. 10.1136/ard.2003.005876 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]57. Zhang Q, Lu Y, Proulx ST, Guo R, Yao Z, Schwarz EM, et al. . Повышенный лимфангиогенез в суставах мышей с воспалительным артритом. Артрит Res Ther. (2007) 9: R118. 10.1186/ar2326 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]58. Кеффер Дж., Проберт Л., Казларис Х., Георгопулос С., Касларис Э., Киуссис Д. и др.. Трансгенные мыши, экспрессирующие фактор некроза опухоли человека: прогностическая генетическая модель артрита. Эмбо Дж. (1991) 10:4025–31. 10.1002/j.1460-2075.1991.tb04978.x [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]59. Кусков В., Корганов А.С., Дюшатель В., Деготт С., Бенуа С., Матис Д. Органоспецифическое заболевание, вызванное системным аутоиммунитетом. Cell (1996) 87:811–22. 10.1016/S0092-8674(00)81989-3 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]60. Бута Э.М., Белл Р.Д., Рахими Х., Син Л., Вуд Р.В., Бингем К.О. и др.. Воздействие на лимфатическую функцию как новое терапевтическое вмешательство при ревматоидном артрите. Нат Рев Ревматол. (2018) 14:94–106. 10.1038/nrrheum.2017.205 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]61. Proulx ST, Kwok E, You Z, Beck CA, Shealy DJ, Ritchlin CT и другие. . МРТ и количественная оценка функции дренирующих лимфатических узлов при воспалительном артрите. Энн Нью-Йорк, Академия наук США. (2007) 1117:106–23. 10.1196/annals.1402.016 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]62. Чжоу К., Вуд Р., Шварц Э.М., Ван И-Дж., Син Л.Лимфатическая визуализация в ближней инфракрасной области демонстрирует динамику лимфотока и лимфангиогенеза во время острой и хронической фаз артрита у мышей. Ревмирующий артрит. (2010) 62:1881–9. 10.1002/art.27464 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]63. Proulx ST, Kwok E, You Z, Papuga MO, Beck CA, Shealy DJ и др. . Продольная оценка объемов синовиальных, лимфатических узлов и костей при воспалительном артрите у мышей с помощью магнитно-резонансной томографии in vivo и микрофокальной компьютерной томографии.Ревмирующий артрит. (2007b) 56:4024–37. 10.1002/art.23128 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]64. Бута Э.М., Ю. Ю., Рахими Х., де Меси-Бентли К.Л., Вуд Р.В., Син Л. и др. . Ультразвуковое энергетическое допплеровское фенотипирование расширяющихся по сравнению со спавшимися подколенных лимфатических узлов при воспалительном артрите у мышей. PLoS ONE (2013) 8:e73766. 10.1371/journal.pone.0073766 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]65. Бута Э.М., Вуд Р.В., Браун Э.Б., Рахими Х., Ричлин К.Т., Шварц Э.М. In vivo Количественное определение вязкости лимфы и давления в лимфатических сосудах и дренирующих лимфатических узлах пораженных артритом суставов у мышей.Дж. Физиол. (2014) 592:1213–23. 10.1113/jphysiol.2013.266700 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]66. Бута Э.М., Кузин И., де Меси Бентли К., Вуд Р.В., Рахими Х., Джи Р.С. и др. . Краткий отчет: лечение мышей, трансгенных по фактору некроза опухоли, с помощью антифактора некроза опухоли восстанавливает лимфатические сокращения, восстанавливает лимфатические сосуды и может увеличивать выход моноцитов/макрофагов. Артр Ревматол. (2017) 69:1187–93. 10.1002/art.40047 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]67.Манзо А., Капорали Р., Витоло Б., Алесси С., Бенальо Ф., Тодоэрти М. и др. . Субклиническое ремоделирование структуры дренирующих лимфатических узлов при раннем и развившемся ревматоидном артрите, оцениваемое с помощью ультразвуковой допплерографии. Ревматология (2011) 50:1395–400. 10.1093/rheumatology/ker076 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]68. Витечек Дж., Лоек А., Валакки Г., Кубала Л. Ингибиторы синтазы оксида азота на основе аргинина: терапевтический потенциал и проблемы. Медиаторы воспаления. (2012) 2012: 318087–22. 10.1155/2012/318087 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]69.Детмар М., Браун Л.Ф., Клаффи К.П., Йео К.Т., Кочер О., Джекман Р.В. и др. . Гиперэкспрессия фактора проницаемости сосудов/фактора роста эндотелия сосудов и его рецепторов при псориазе. J Эксперт Мед. (1994) 180:1141–6. 10.1084/jem.180.3.1141 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]70. Kim KE, Koh YJ, Jeon BH, Jang C, Han J, Kataru RP и др. . Роль макрофагов CD11b+ во внутрибрюшинном индуцированном липополисахаридами аберрантном лимфангиогенезе и лимфатической функции в диафрагме. Ам Джей Патол.(2009) 175:1733–45. 10.2353/ajpath.2009.0 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]71. Cursiefen C, Chen L, Borges LP, Jackson D, Cao J, Radziejewski C, et al. . VEGF-A стимулирует лимфангиогенез и гемангиогенез при воспалительной неоваскуляризации посредством рекрутирования макрофагов. J Clin Invest (2004) 113:1040–50. 10.1172/JCI20465 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]72. Ристимяки А., Нарко К., Энхольм Б., Жуков В., Алитало К. Провоспалительные цитокины регулируют экспрессию лимфатического эндотелиального митогена фактора роста эндотелия сосудов-С.Дж. Биол. Хим. (1998) 273:8413–8. [PubMed] [Google Scholar]73. Su J-L, Shih J-Y, Yen M-L, Jeng Y-M, Chang C-C, Hsieh C-Y и др. . Циклооксигеназа-2 индуцирует активацию EP1- и HER-2/Neu-зависимого сосудистого эндотелиального фактора роста-C: новый механизм лимфангиогенеза при аденокарциноме легкого. Рак рез. (2004) 64:554–64. 10.1158/0008-5472.CAN-03-1301 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]75. Чаухан С.К., Джин И., Гоял С., Ли Х.С., Фукслугер Т.А., Ли Х.К. и др. . Новая пролимфангиогенная функция Th27/IL-17.Кровь (2011) 118: 4630–4. 10.1182/blood-2011-01-332049 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]76. Choi I, Lee YS, Chung HK, Choi D, Ecoiffier T, Lee HN, et al. . Интерлейкин-8 уменьшает образование послеоперационной лимфедемы, способствуя регенерации лимфатических сосудов. Ангиогенез (2013) 16:29–44. 10.1007/s10456-012-9297-6 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]77. Ока М., Ивата С., Судзуки Х.И., Киёно К., Моришита Ю., Ватабе Т. и др. . Ингибирование эндогенной передачи сигналов TGF-бета усиливает лимфангиогенез.Кровь (2008) 111: 4571–9. 10.1182/blood-2007-10-120337 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]78. Авраам Т., Далувой С., Зампелл Дж., Ян А., Хавив Ю.С., Роксон С.Г. и др. . Блокада трансформирующего фактора роста-бета1 ускоряет лимфатическую регенерацию при заживлении ран. Ам Джей Патол. (2010) 177:3202–14. 10.2353/ajpath.2010.100594 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]79. Советский И.Л., Ганта С., Гарденье Дж.С., Торриси Дж.С., Гарсия Норес Г.Д., Хеспе Г.Э. и соавт. . Цитокины Th3 ингибируют лимфангиогенез.PLoS ONE (2015) 10:e0126908. 10.1371/journal.pone.0126908 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]80. Kataru RP, Kim H, Jang C, Choi DK, Koh BI, Kim M и др. . Т-лимфоциты негативно регулируют формирование лимфатических сосудов лимфатических узлов. Иммунитет (2011) 34:96–107. 10.1016/j.immuni.2010.12.016 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]81. Рехал С., Бланкерт П., Ройзес С., фон дер Вейд П.Ю. (2009). Характеристика биосинтеза и механизмов действия простагландина Е2 и простациклина в брыжеечных лимфатических сосудах морской свинки.бр. Дж. Фармакол. 158, 1961–1970. 10.1111/j.1476-5381.2009.00493.x [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]82. Олдрич М.Б., Севик-Мурака Э.М. Цитокины являются системными эффекторами лимфатической функции при остром воспалении. Цитокин (2013) 64:362–9. 10.1016/j.cyto.2013.05.015 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]83. Кромер В.Е., Завея С.Д., Таракан Б., Чайлдс Э.В., Ньюэлл М.К., Завея Д.К. Влияние воспалительных цитокинов на функцию лимфатического эндотелиального барьера. Ангиогенез (2014) 17:395–406.10.1007/s10456-013-9393-2 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]84. Nagy JA, Vasile E, Feng D, Sundberg C, Brown LF, Detmar MJ, et al. . Фактор проницаемости сосудов/фактор роста эндотелия сосудов индуцирует лимфангиогенез, а также ангиогенез. J Эксперт Мед. (2002) 196:1497–506. 10.1084/jem.20021244 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]85. Zhang Y, Lu Y, Ma L, Cao X, Xiao J, Chen J и др. . Активация рецептора фактора роста эндотелия сосудов-3 в макрофагах ограничивает передачу сигналов TLR4-NF-κB и защищает от эндотоксинового шока.Иммунитет (2014) 40:501–14. 10.1016/j.immuni.2014.01.013 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]86. Польцер К., Баетен Д., Солейман А., Дистлер Дж., Герлаг Д.М., Так П.П. и др. . Блокада фактора некроза опухоли увеличивает лимфангиогенез в артритных суставах мыши и человека. Энн Реум Дис. (2008) 67:1610–6. 10.1136/ard.2007.083394 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]87. Хос Д., Сабан Д.Р., Бок Ф., Регенфусс Б., Ондерка Дж., Масли С. и др. . Подавление воспалительного лимфангиогенеза роговицы путем применения топических кортикостероидов.Арка Офтальмол. (2011) 129:445–52. 10.1001/archophthalmol.2011.42 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]88. Yao LC, Baluk P, Feng J, McDonald DM. Устойчивое к стероидам ремоделирование лимфатической системы при хроническом воспалении дыхательных путей у мышей. Ам Джей Патол. (2010) 176:1525–41. 10.2353/ajpath.2010.0 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]89. Ивата С., Кано М.Р., Комуро А., Ока М., Киёно К., Йоханссон Э. и др. . Ингибирование циклооксигеназы-2 подавляет метастазирование в лимфатические узлы за счет снижения лимфангиогенеза.Рак Рез. (2007) 67:10181–9. 10.1158/0008-5472.CAN-07-2366 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]90. Джеймисон Т., Кук Д.Н., Ниббс Р.Дж.Б., Рот А., Никсон С., Маклин П. и др. . Хемокиновый рецептор D6 ограничивает воспалительную реакцию in vivo . Нат Иммунол. (2005) 6:403–11. 10.1038/ni1182 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]91. Ветрано С., Боррони Э.М., Сарухан А., Савино Б., Бонекки Р., Корреале С. и др. . Лимфатическая система контролирует воспаление кишечника и рак толстой кишки, связанный с воспалением, посредством хемокинового рецептора-приманки D6.Гут (2010) 59: 197–206. 10.1136/gut.2009.183772 [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]92. Караман С., Холлмен М., Юн С.И., Алкан Х.Ф., Алитало К., Вольфрум С. и др. . Трансгенная сверхэкспрессия VEGF-C вызывает увеличение массы тела и резистентность к инсулину у мышей. Научный доклад (2016) 6:31566. 10.1038/srep31566 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]93. Караман С., Холлмен М., Робчук М.Р., Алитало А., Нурми Х., Морф Б. и др. . Блокада VEGF-C и VEGF-D модулирует воспаление жировой ткани и улучшает метаболические параметры при диете с высоким содержанием жиров.Мол метаб. (2015) 4:93–105. 10.1016/j.molmet.2014.11.006 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]94. Скобе М., Хамберг Л.М., Хавигхорст Т., Ширнер М., Вольф Г.Л., Алитало К. и др. . Сопутствующая индукция лимфангиогенеза, ангиогенеза и рекрутирования макрофагов фактором роста эндотелия сосудов-С при меланоме. Ам Джей Патол. (2001) 159:893–903. 10.1016/S0002-9440(10)61765-8 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]95. Хиракава С., Браун Л.Ф., Кодама С., Паавонен К., Алитало К., Детмар М.Индуцированный VEGF-C лимфангиогенез в сигнальных лимфатических узлах способствует метастазированию опухоли в отдаленные участки. Кровь (2007) 109: 1010–7. 10.1182/blood-2006-05-021758 [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]96. Швагер С., Реннер С., Хеммерле Т., Караман С., Прулкс С.Т., Фетц Р. и др. . Опосредованная антителами доставка VEGF-C эффективно уменьшает хроническое воспаление кожи. JCI Insight (2018) 3:1983. 10.1172/jci.insight.124850 [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

    Важная роль кровеносных и лимфатических сосудов в воспалении и аллергии

    Ангиогенез и лимфангиогенез, рост новых сосудов из ранее существовавших, вызывают повышенный интерес из-за их роли в росте опухоли и метастатическом распространении.Однако ремоделирование сосудов, связанное с гиперпроницаемостью сосудов, также является ключевым признаком многих хронических воспалительных заболеваний, включая астму, атопический дерматит, псориаз и ревматоидный артрит. Основными драйверами ангиогенеза и лимфангиогенеза являются факторы роста эндотелия сосудов (VEGF-)A и VEGF-C, активирующие специфические рецепторы VEGF на эндотелии лимфатических и кровеносных сосудов. Недавние экспериментальные исследования обнаружили мощные противовоспалительные реакции после целенаправленного ингибирования активированных кровеносных сосудов на моделях хронических воспалительных заболеваний.Важно отметить, что наши недавние результаты показывают, что специфическая активация лимфатических сосудов уменьшает как острое, так и хроническое воспаление кожи. Таким образом, антиангиогенная и пролимфангиогенная терапия может представлять собой новый подход к лечению хронических воспалительных заболеваний, в том числе вызванных хроническим аллергическим воспалением.

    1. Введение

    По данным Всемирной организации по борьбе с аллергией, аллергические заболевания поражают 30–40% населения мира, и их распространенность возрастает до масштабов эпидемии.Большая часть патологии хронических аллергических заболеваний, таких как атопический дерматит и астма, является долгосрочным результатом хронического аллергического воспаления в месте воздействия аллергена [1]. Таким образом, для изучения дополнительных возможностей лечения хронических аллергических заболеваний важно понимать различные патомеханизмы и свойства хронического воспаления.

    Воспаление в целом представляет собой реакцию тканей на вредные раздражители, такие как инфекционные агенты, антигены, или физические и химические повреждения.Помимо усиления воспалительной клеточной инфильтрации в воспаленную ткань, в последние годы стало ясно, что острые и хронические воспалительные процессы сопровождаются выраженным ремоделированием сосудов. Ангиогенез и лимфангиогенез, рост новых кровеносных сосудов и лимфатических сосудов из ранее существовавших, участвуют в ряде физиологических и патологических состояний, таких как заживление ран, рост опухоли и метастатическое распространение [2-5]. Ангиогенез и лимфангиогенез также происходят при некоторых хронических воспалительных состояниях, включая ревматоидный артрит, воспалительное заболевание кишечника, астму, хроническое воспаление дыхательных путей, атопический дерматит и псориаз [6-9].

    Несмотря на то, что кровеносные и лимфатические сосуды играют ключевую роль в острых и хронических воспалительных процессах и, таким образом, могут служить новыми терапевтическими мишенями при воспалительных и аллергических заболеваниях, в настоящее время не существует клинически одобренного лечения, специально модулирующего сосудистую сеть.

    2. Функция кровеносных и лимфатических сосудов в тканевом гомеостазе

    У позвоночных животных различают две сосудистые системы: сердечно-сосудистую и лимфатическую. Для выполнения своих функций обе сосудистые системы строят сильно разветвленные древовидные трубчатые структуры.В сердечно-сосудистой системе сердце перекачивает кровь через артерии в более мелкие артериолы и в капиллярные русла. Оттуда кровь возвращается через венулы и вены к сердцу, чтобы перейти к легким для новой кислородной нагрузки. В физиологических условиях основные функции кровеносных сосудов включают поставку газов, жидкости, питания и сигнальных молекул к тканям с капиллярами как фактическими местами обмена. В этих местах происходит утечка плазмы из капилляров в интерстиций под действием артериального давления и осмотического градиента.Лимфатические капилляры поглощают эту богатую белком жидкость, тем самым поддерживая не только гомеостаз тканевой жидкости, но и обеспечивая иммунный надзор. Лимфатическая сеть состоит из тонкостенных капилляров со слепым началом без перицитного покрытия и с неполной базальной пластинкой, а также собирательных лимфатических сосудов с гладкомышечным слоем клеток, базальной мембраной и клапанами, препятствующими обратному току лимфы. Крупнейший собирательный лимфатический сосуд — грудной проток — соединяет лимфатическую систему с сердечно-сосудистой системой.У взрослых физиологический ангиогенез и лимфангиогенез встречаются редко. Однако новые лимфатические и кровеносные сосуды формируются во время женского репродуктивного цикла, цикла роста волос и при заживлении ран [10, 11].

    3. Анатомия кожной и легочной сосудистой системы

    Эпидермальный слой кожи лишен кровеносных и лимфатических сосудов. В дерме кровеносная система организована в глубокое и поверхностное горизонтальное сплетение с отходящими от последнего капиллярами [12, 13].Лимфатическая сосудистая сеть также образует два сплетения вблизи кровеносных сосудов. Ветви от сплетения поверхностных лимфатических сосудов отходят в дермальные сосочки и спускаются в более крупные лимфатические сосуды в нижних слоях дермы [14]. Основная масса кровеносных микрососудов располагается непосредственно под эпидермисом, тогда как лимфатические сосуды располагаются дальше от эпидермиса [15].

    Легочные кровеносные сосуды транспортируют кровь с низким содержанием кислорода от сердца к легким, тогда как бронхиальные сосуды снабжают легкие питательными веществами и кислородом.Бронхиальные кровеносные сосуды отходят от аорты или межреберных артерий и входят в легкие в воротах. В главном стволовом бронхе они разветвляются и спускаются в нижние отделы трахеи и внелегочные дыхательные пути. Они охватывают все легкое от бронхиального дерева до терминальных бронхиол, где бронхиальные сосуды анастомозируют друг с другом, а также с легочными сосудами [16]. Исследования лимфатических сосудов в нормальном легком человека проводятся редко не только потому, что в течение длительного времени не были известны специфические лимфатические маркеры, но и потому, что в легком обычно используемый лимфатический маркер эндотелиальный рецептор гиалуроновой кислоты лимфатических сосудов (LYVE-)1 окрашивает как лимфатические и эндотелиальные клетки кровеносных сосудов [17].Недавние исследования с использованием специфического маркера лимфатического эндотелия подопланина показали, что в легком человека лимфатические сосуды выходят за пределы дыхательных бронхиол, сопровождая внутридольковые артерии глубоко внутри дольки, наименьшей единицы легкого [18, 19]. В мышиной трахее лимфатическая сеть сильно упорядочена, а сосуды ограничены слизистой оболочкой, расположенной между хрящевыми кольцами [8].

    4. Роль кровеносных и лимфатических сосудов в воспалении

    Как кровь, так и лимфатическая сосудистая система участвуют в воспалительной реакции организма.При остром воспалении эндотелиальные клетки кровеносных сосудов активируются несколькими медиаторами воспаления (например, фактором роста эндотелия сосудов (VEGF-)A, фактором некроза опухоли (TNF-) α , интерлейкином (IL)-6 и IL-1). β ), что приводит к типичным признакам воспаления, усилению кровотока вследствие расширения сосудов и образованию отека вследствие повышения проницаемости сосудов. Кроме того, экспрессия молекул адгезии, таких как молекула межклеточной адгезии (ICAM-)1, молекула адгезии сосудистых клеток (VCAM-)1 и E-селектин на активированных эндотелиальных клетках кровеносных сосудов, обеспечивает взаимодействие между лейкоцитами и эндотелием. основное событие в воспалительном процессе [20, 21].При хроническом воспалении кровеносные сосуды остаются увеличенными, гиперпроницаемыми и активируются с высокой экспрессией молекул адгезии, что приводит к постоянной экстравазации воспалительных клеток и жидкости в воспаленную ткань. Ряд воспалительных состояний, таких как ревматоидный артрит, воспалительные заболевания кишечника, астма, атопический дерматит и псориаз, характеризуются выраженным ангиогенезом [7, 9, 22, 23].

    Помимо кровеносных сосудов важную роль в воспалении играют также лимфатические сосуды.Лимфатические сосуды регулируют воспалительную реакцию путем транспорта жидкости, внесосудистых лейкоцитов и антигенпрезентирующих клеток из воспаленной ткани в лимфатические узлы и другие вторичные лимфоидные органы, тем самым способствуя уменьшению воспалительного отека и инициированию специфический иммунный ответ. Тип C-C хемокинового рецептора (CCR) 7, экспрессируемый дендритными клетками, важен для их миграции в афферентные лимфатические сосуды, которые секретируют соответствующий лиганд хемокиновый (C-C мотив) лиганд (CCL) 21 [24].Лимфангиогенез происходит при некоторых хронических воспалительных состояниях, таких как псориаз человека и мышиные модели хронического воспаления кожи, хронического воспаления дыхательных путей и ревматоидного артрита [8, 25-27].

    5. Медиаторы ангиогенеза и лимфангиогенеза при воспалении

    В последние годы расширилось понимание воспалительных ангиогенных и лимфангиогенных процессов, таких как рост, миграция и выживание эндотелиальных клеток, и было идентифицировано множество вовлеченных медиаторов.Наиболее важной молекулой, контролирующей вызванный воспалением ангиогенез, является VEGF-A, член семейства ангиогенных и лимфангиогенных драйверов, таких как VEGF-C, VEGF-D и фактор роста плаценты (PlGF) [6, 28]. VEGF-A передает сигналы через свои рецепторные тирозинкиназы VEGFR-1 и VEGFR-2 и тем самым индуцирует ангиогенез и лимфангиогенез (рис. 1). Экспрессия VEGF-A и VEGFR-2 индуцируется цитокинами, такими как TNF- α , тем самым связывая ангиогенез с воспалительными состояниями [14, 29].VEGFR-1 экспрессируется в кровеносных сосудах, тогда как VEGFR-2 экспрессируется как в кровеносных, так и в лимфатических сосудах с высокой экспрессией в верхушечных клетках [30]. По сравнению с VEGFR-2, VEGFR-1 имеет более высокое сродство к VEGF-A, но более низкую киназную активность. Сообщалось, что VEGFR-1 улавливает VEGF-A для предотвращения избыточной передачи сигналов через VEGFR-2 во время эмбриогенеза, тогда как у взрослых функция VEGFR-1 остается более неуловимой [31, 32]. Сообщалось, что некоторые цитокины и хемокины, такие как IL-1, IL-8, IL-18, хемокиновый (мотив CXC) лиганд (CXCL) 3 и CXCL12, проявляют проангиогенную и лимфангиогенную активность (таблица 1).

    2 Название

    2 TNF- +

    [69-71]
     ИЖ-1 + [72–74]
     Ил-6 [41]
     Ил-8 (CXCL18) [75, 76]
     ИЖ-15 [77]
     Ил-17 [78]
     Ил-18 + [79–82]
    Хемокины
     CXCL1 [83, 84]
     CXCL2 [83, 84]
     CXCL3 [83–86]
     CXCL5 [83, 84]
     CXCL6 [83, 84]
     CXCL7 [83, 84]
     CXCL9 [83]
     CXCL12 (SDF-1) [87, 88]
     CCL2 (ГЦН-1) [89, 90]

    Сообщалось также об антиангиогенной активности.

    Воспалительный лимфангиогенез, как и лимфангиогенез в целом, в основном управляется передачей сигналов VEGFR-2 и -3. Таким образом, индуцированная VEGF-A передача сигналов VEGFR-2 играет роль не только в ангиогенезе, но также и в лимфангиогенезе. VEGFR-3, который экспрессируется на лимфатических эндотелиальных клетках, связывает VEGF-C и VEGF-D (рис. 1). Однако после протеолитического расщепления VEGF-C также может индуцировать передачу сигналов VEGFR-2 [33–35]. Было показано, что передача сигналов VEGFR-2 и -3 участвует в воспалительном лимфангиогенезе на мышиных моделях воспаления кожи и воспаления дыхательных путей [8, 36, 37].Подробнее эти модели будут рассмотрены позже. Экспрессия лимфангиогенного фактора VEGF-C индуцируется в ответ на различные провоспалительные цитокины, такие как TNF- α и IL-1 β , скорее всего, посредством активации ядерного фактора энхансера гена полипептида каппа-легкого в B- клетки (NF- κ B) путь [38, 39]. Кроме того, воспалительные клетки, такие как макрофаги, способствуют образованию лимфатических сосудов, секретируя VEGF-C и VEGF-D [8, 40].TNF- α также может способствовать воспалительному лимфангиогенезу дыхательных путей [39].

    6. Кровеносные и лимфатические сосуды при хроническом воспалении кожи

    Некоторые кожные заболевания, такие как атопический дерматит, контактный дерматит, УФ-повреждение и псориаз, связаны с усилением ремоделирования сосудов (рис. 2) [25, 41, 42]. В пораженной коже при атопическом дерматите и псориазе уровни ангиогенного фактора роста VEGF-A повышены [27, 43, 44], а у больных псориазом уровни VEGF-A в плазме крови положительно коррелируют с тяжестью заболевания [45]. .

    В последние годы был разработан ряд моделей мышей для изучения ремоделирования сосудов при хроническом воспалении кожи, например, эпидермально-специфические нокаутные мыши JunB/C-Jun [46], трансплантация псориатической кожи человека при тяжелом комбинированном иммунодефиците- ( SCID-)мыши [47] и K14 (кератин14) трансгенные мыши VEGF-A [48], которые были разработаны в нашей лаборатории. У этих мышей мышиный VEGF-A164 непрерывно экспрессируется в эпидермальных кератиноцитах под контролем промотора K14.У мышей, гомозиготных по этому трансгену, в возрасте примерно 5-6 месяцев развивается хроническое кожное воспаление, которое имеет большинство признаков псориаза человека, а именно эпидермальную гиперплазию и аномальную терминальную дифференцировку эпидермальных кератиноцитов, типичную лейкоцитарную инфильтрацию, включая дермальные CD4+ T-клетки и эпидермальное накопление CD8+ Т-клеток, а также выраженное увеличение количества и размеров кровеносных и лимфатических сосудов (рис. 3) [48]. У гемизиготных трансгенных мышей K14-VEGF-A хроническое воспаление кожи индуцируется применением контактного сенсибилизатора оксазолона [25].Несколько исследований на этих трансгенных мышах K14-VEGF-A, проведенных нашей и другими лабораториями, подтвердили, что эти мыши являются ценной моделью хронического кожного воспаления с соответствующим участием ремоделирования сосудов. В этой модели низкомолекулярный ингибитор VEGFR NVP-BAW2881 показал сильное противовоспалительное действие со снижением индуцированного воспалением ангиогенеза и лимфангиогенеза [49]. Кроме того, лечение специфическим анти-VEGFR-2 антителом DC101 подавляло воспаление кожи, инфильтрацию воспалительных клеток и ангиогенез [37], указывая на то, что ангиогенез играет важную роль в поддержании и прогрессировании заболевания.На этих мышах также изучали значение лимфатических сосудов при воспалении. Удивительно, но блокада передачи сигналов VEGFR-3 увеличивала тяжесть кожного воспаления. И наоборот, специфическая активация лимфатических сосудов путем внутрикожных инъекций рекомбинантного VEGF-C156S, специфического лиганда VEGFR-3, уменьшала хроническое воспаление кожи [37]. В совокупности гемизиготные мыши K14-VEGF-A tg представляют собой надежную модель для изучения ремоделирования сосудов кожи, вызванного воспалением, и для проверки потенциальной эффективности новых противовоспалительных препаратов.Однако псориаз является специфическим для человека заболеванием, которое в природе не наблюдается у животных. Таким образом, были разработаны различные генетические и ксенотрансплантированные мышиные модели, имитирующие некоторые особенности человеческого псориаза [50]. Однако, учитывая существенные различия между кожей мыши и кожи человека, большинство этих моделей не полностью повторяют все характеристики заболевания человека. Таким образом, для конкретных патогенетических исследований оценка различных моделей псориаза на мышах может оказаться полезной.В связи с этим недавно сообщалось, что местное лечение имихимодом, агонистом толл-подобных рецепторов 7 и 8, вызывает псориазоподобные поражения кожи у людей и мышей с участием оси IL23/IL17, которая, как известно, играет решающую роль в развитии псориаза у человека [51].

    7. Кровеносные сосуды при астме

    Астма представляет собой хроническое воспалительное заболевание дыхательных путей, характеризующееся гиперреактивностью дыхательных путей, эпизодическими ограничениями воздушного потока и снижением функции легких.Эти симптомы вызваны хроническим воспалением и ремоделированием дыхательных путей, включая увеличение толщины ретикулярной пластинки [52, 53], гиперплазию/гипертрофию гладкой мускулатуры и повышенную васкуляризацию [54, 55] в мелких и крупных дыхательных путях [56]. В 1960-х Dunill впервые продемонстрировал участие кровеносных сосудов в развитии астмы, показав отек слизистой оболочки бронхов с расширенными и гиперемированными капиллярами в образцах легких субъектов, умерших от острых астматических приступов [57]. С тех пор повышенная васкуляризация дыхательных путей была обнаружена не только в тяжелых, но и в легких случаях астмы, и в настоящее время установлено, что количество кровеносных сосудов и площадь ткани, покрытой кровеносными сосудами, у пациентов с астмой увеличены по сравнению со здоровыми субъектами. (обзор в [55]).В легких случаях астмы повышенная подслизистая васкуляризация во внутренней области средних дыхательных путей может способствовать ограничению воздушного потока, на что указывает обратная корреляция васкуляризации и объема форсированного выдоха, показатель обструкции дыхательных путей [56]. Уровень VEGF-A, основного фактора ангиогенеза, также был повышен в образцах мокроты пациентов с легкой астмой по сравнению со здоровыми людьми из контрольной группы [58]. Уровни мРНК VEGF-A и VEGFR-1 были повышены в образцах биопсии легких у пациентов с астмой легкой и средней степени тяжести по сравнению со здоровыми людьми.Сообщаемая совместная локализация VEGF-A с CD68, основным основным белком и химазопозитивными клетками предполагает, что макрофаги, эозинофилы и тучные клетки являются основным источником VEGF-A в легких [59, 60], что, таким образом, может способствовать ангиогенезу. при астме. Наоборот, в различных условиях было показано, что на эозинофилы, тучные клетки и макрофаги также влияют ангиогенные факторы. Благодаря экспрессии VEGFR-1 эти клетки способны мигрировать в направлении градиентов VEGF-A [61–65].Следовательно, повышенные уровни VEGF-A в месте воспаления способствуют привлечению различных воспалительных клеток, которые сами могут секретировать провоспалительные медиаторы.

    Макдональд и его коллеги создали модель инфекции Mycoplasma pulmonis хронического воспаления дыхательных путей в качестве ценного инструмента для исследования хронических воспалительных заболеваний дыхательных путей у мышей. Эта модель показывает несколько, хотя и не все, характерных признаков астмы, таких как приток воспалительных клеток, ангиогенез, отек слизистой оболочки, эпителиальные изменения, фиброз и гиперреактивность бронхов [8, 66].Вскоре после заражения M. pulmonis кровеносные сосуды слизистой оболочки увеличиваются за счет пролиферации эндотелиальных клеток, а ангиогенез достигает плато через 14 дней после заражения [8]. Удивительно, но исследования блокирования рецепторов VEGF показали, что этот патологический ангиогенез может не управляться VEGF-A [8]. Однако блокирование передачи сигнала TNF- α с помощью антитела против TNF- α резко снижало ремоделирование кровеносных сосудов через 14 дней после инфицирования M. pulmonis , что позволяет предположить, что передача сигнала TNF- α участвует в этом ангиогенном процессе. 39].

    8. Лимфатические сосуды при хронических заболеваниях дыхательных путей

    Формирование отека происходит, когда объем просачивания из кровеносных сосудов превышает дренажную способность лимфатических сосудов. Такие отеки являются кардинальным признаком хронического воспаления, и действительно повышенная проницаемость микрососудов, а также отеки являются признаками астмы [67]. Однако сведения об участии лимфатических сосудов в формировании отеков при астме крайне скудны. Лишь недавно было показано, что лимфангиогенез усиливается на поздних стадиях идиопатического легочного фиброза, хронического заболевания легких неизвестной этиологии со скрытым началом, приводящего к дыхательной недостаточности и дыхательной недостаточности [68].

    В мышиной модели M. pulmonis с хроническим воспалением дыхательных путей также наблюдается резкое ремоделирование лимфатических сосудов [8]. Надежный лимфангиогенез наиболее распространен на поверхности, обращенной к хрящевым кольцам, которые растут по направлению к покрывающему эпителию дыхательных путей. Интересно, что через 4 недели лечения антибиотиками прорастание лимфатических сосудов было полностью ингибировано, но лимфатические сосуды регрессировали лишь частично, по сравнению с почти полной регрессией кровеносных сосудов [8].VEGF-C, VEGF-D и TNF- α являются основными драйверами этого ремоделирования. Блокада передачи сигналов VEGFR-3 с помощью растворимого VEGFR-3-Fc или антитела против VEGFR-3 почти полностью предотвращала лимфангиогенез в трахеях инфицированных мышей [8]. Напротив, аденовирусная сверхэкспрессия VEGF-C в мышиной трахее приводит к усиленному образованию лимфатических филоподий и к отросткам, подобным наблюдаемым у мышей, инфицированных M. pulmonis . Иммунофлуоресцентное окрашивание показало, что воспалительные клетки слизистой оболочки, в частности макрофаги F4/80+, являются основным источником VEGF-C в этой модели.Снижение лимфангиогенеза после инфицирования M. pulmonis также наблюдалось после ингибирования передачи сигналов TNF блокирующим антителом и у мышей TNFR-1ko [39].

    9. Выводы и перспективы

    Имеются убедительные доказательства того, что ремоделирование сосудов у людей происходит при многих хронических воспалительных заболеваниях. Несмотря на то, что на рынке представлены различные противовоспалительные препараты, не существует специфической терапии, препятствующей патологическим сосудистым изменениям, возникающим при воспалении.Ангиогенез и лимфангиогенез тесно связаны с хроническим воспалением, и было показано, что нацеливание на кровеносные и лимфатические сосуды является эффективной стратегией в различных экспериментальных моделях хронического воспаления на мышах. Однако следует иметь в виду, что в большинстве состояний сосудистая активация, вероятно, представляет собой последующее событие, поддерживающее воспалительный процесс, а не патогенетическую причину соответствующего заболевания, которая часто остается неизвестной. Тем не менее, антиангиогенная и пролимфангиогенная терапия может представлять собой новые подходы к лечению хронических воспалительных заболеваний, в том числе вызванных хроническим аллергическим воспалением.

    Вклад авторов

    С. Зграгген и А.М. Оксенбейн также внес свой вклад в эту работу.

    Благодарности

    Работа в лаборатории авторов была поддержана грантом Национального института здравоохранения CA69184, грантами Швейцарского национального научного фонда 3100A0-108207 и 31003A-130627, грантом Европейского исследовательского совета LYVICAM, Oncosuisse, Krebsliga Zurich и Фондом Leducq. .

    Реакция лимфатических сосудов на острое воспаление

    Abstract

    Считается, что во время острого воспаления функционирующие лимфатические сосуды уменьшают отек и обеспечивают транзитный путь для иммунных клеток, но степень, в которой ремоделирование кожных лимфатических сосудов влияет на лимфатический транспорт или факторы, регулирующие эти изменения, остается неясным.Здесь мы количественно оцениваем увеличение лимфатических эндотелиальных клеток (LEC) и исследуем экспрессию проангиогенных и лимфангиогенных факторов во время острой кожной гиперчувствительности (CHS). Мы обнаружили, что LECs активно пролиферируют во время CHS, но эта пролиферация не влияет на плотность лимфатических сосудов. Вместо этого лимфатическое ремоделирование сопровождается негерметичностью лимфатических сосудов и снижением выброса лимфатической жидкости, что наблюдается только в проксимальных лимфатических сосудах, дренирующих воспаленный участок.LEC и иммунные клетки высвобождают факторы роста и цитокины во время воспаления, которые влияют на лимфатическую микросреду и функцию. Мы определили, что FGF-2, PLGF-2, HGF, EGF и KC/CXCL17 по-разному экспрессируются в тканях во время острого CHS, но уровни как VEGF-C, так и VEGF-D существенно не изменяются. Наши результаты показывают, что VEGF-C и VEGF-D являются не единственными игроками, и другие факторы могут быть ответственны за пролиферацию LEC и изменение лимфатической функции при остром CHS.

    Образец цитирования: Lachance P-A, Hazen A, Sevick-Muraca EM (2013) Реакция лимфатических сосудов на острое воспаление. ПЛОС ОДИН 8(9): е76078. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078

    Редактор: Jörg Hermann Fritz, Университет Макгилла, Канада

    Поступила в редакцию: 7 марта 2013 г.; Принято: 20 августа 2013 г.; Опубликовано: 27 сентября 2013 г.

    Авторское право: © 2013 Lachance et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания оригинального автора и источника.

    Финансирование: Эта работа была частично поддержана Национальным институтом здравоохранения (R01 CA128919), премией Канадского института исследований в области здравоохранения и частично грантом на совместное использование инструментов (RP 110776) от Центра профилактики и исследования рака. Техасский институт (CPRIT).Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Известно, что процессы ангиогенеза и лимфангиогенеза играют решающую роль в прогрессировании рака, метастазировании и многих хронических заболеваниях, но также играют непатологическую роль в нормальном прогрессировании и разрешении воспаления [1].Считается, что во время воспаления функционирующие лимфатические сосуды уменьшают отек и обеспечивают транзитный путь для иммунных клеток; но влияет ли обширное кожное лимфатическое ремоделирование, которое предположительно имеет место в воспаленной ткани, на транспорт, остается неясным. Действительно, используя ближнюю инфракрасную флуоресценцию (NIRF) лимфатическую визуализацию, мы и другие отметили как плотную гиперплазию, так и гипоплазию дермальных лимфатических сосудов в руках и ногах субъектов с лимфедемой с выраженным отеком, предполагая более сложную взаимосвязь между кожным лимфатическим ремоделированием и эффективным лимфатическим отеком. транспорт [2,3].Приносит ли ремоделирование кожных лимфатических сосудов непосредственное влияние на регионарный лимфатический транспорт и уменьшение отека, или же за это ответственны другие факторы, еще предстоит выяснить.

    Поскольку известно, что семейство лигандов и рецепторов фактора роста эндотелия сосудов (VEGF) способствует как гемоваскулярной, так и лимфатической пролиферации, несколько исследований были сосредоточены на их роли в ремоделировании сосудов при остром и хроническом воспалении кожи [4–7]. Передача сигналов VEGF-C через VEGFR3 необходима для эмбрионального лимфангиогенеза и, следовательно, считается основным игроком в ремоделировании лимфатической системы взрослых [1].Экспрессия VEGF-C в коже уменьшает воспалительные симптомы кожной гиперчувствительности (CHS) у мышей и, как предполагается, уменьшает отек и воспалительную реакцию на CHS за счет специфического усиления лимфатической пролиферации [4]. Другие члены семейства VEGF (такие как VEGF-A и VEGF-D) индуцируют лимфангиогенез in vivo за счет взаимодействия с VEGFR3, но каждый из них по-разному влияет на ХС [8,9]. В отличие от доказательств того, что лимфангиогенез опосредует отек, Huggenberger et al.использовали синий краситель Evans, чтобы показать, что при острых реакциях CHS не происходит изменений в паттернах лимфатического дренажа уха, несмотря на наблюдение, что отек, сопровождающий CHS, уменьшается у мышей со сверхэкспрессией K14-VEGF-C и K14-VEGF-D по сравнению с контрольными мышами [5]. Таким образом, в то время как лимфангиогенез, опосредованный VEGFR-3, изучался как часть инициации и разрешения воспаления, роль эффекторов лимфатической функции еще предстоит изучить с помощью неинвазивных методов, которые (i) непосредственно и лонгитюдно оценивают изменения в лимфатической функции. и (ii) обеспечить корреляцию с экспрессией иммунных и других стимулирующих факторов, которые влияют на фракцию сокращения и выброса «насосной» лимфатической системы.

    Чтобы исследовать роль лимфатической функции в остром воспалении, мы индуцировали острые реакции CHS у нормальных мышей и продольно визуализировали афферентные кожные лимфатические сосуды и сократительные, проводящие лимфатические сосуды, эфферентные к регионарным дренирующим лимфатическим узлам, используя визуализацию лимфатических узлов NIRF. Мы оценили популяцию клеток в воспаленной коже с помощью проточной цитометрии и гистологии в зависимости от времени после индукции острой реакции CHS и оценили пролиферацию лимфатических эндотелиальных клеток (LEC) с использованием метода включения для прямой количественной оценки пролиферации.Мы также оценили экспрессию тканевых белков факторов роста, связанных с ангиогенезом, лимфангиогенезом и воспалением.

    Наши результаты показывают, что LECs пролиферируют в начале CHS, но эта пролиферация не поддерживается с 4-го по 7-й день после CHS. Мы также определили, что эфферентный транспорт лимфы нарушен на ранних стадиях CHS, о чем свидетельствует снижение выброса лимфы, но не снижение сократительной способности лимфатических сосудов как на воспаленной, так и на контралатеральной необработанной стороне животных.Затем мы идентифицировали несколько факторов роста и воспалительных молекул, которые по-разному экспрессируются при раннем воспалении по сравнению с животными, не получавшими лечения, и животными на более поздних стадиях реакции CHS. Экспрессия VEGF-C и VEGF-D существенно не менялась в ходе реакции CHS. Эти данные могут указывать на то, что несколько факторов роста, отличных от VEGF-C и VEGF-D, работают в соответствии с семейством VEGF, способствуя пролиферации, регрессии LEC и опосредованию лимфотока для разрешения воспаления CHS.

    Материалы и методы

    Заявление об этике

    Это исследование проводилось в строгом соответствии с протоколами использования животных, одобренными Комитетом по благополучию животных Центра медицинских наук Техасского университета (IACUC, номер протокола AWC 12-015). Мышей подвергали эвтаназии, если они соответствовали каким-либо критериям раннего удаления (вялость, сгорбленная поза или взлохмаченная шерсть), чтобы уменьшить страдания.

    Индукция кожной реакции гиперчувствительности замедленного типа (CHS) и инъекции EdU

    У мышей C57B/6 дикого типа было индуцировано

    реакции CHS.Во всех исследованиях мышей сенсибилизировали путем местного нанесения на выбритую верхнюю часть спины 50 мкл 2% оксазолона (4-этоксиметилен-2-фенил-2-оксазолин-5-она) (Sigma, Сент-Луис, Миссури) в ацетоне: оливковом масле. (4:1 об./об.). Через пять дней после сенсибилизации (день 0) мышам вводили 100 мкл 1% раствора оксазолона на выбритую нижнюю часть спины. Для оценки клеточной пролиферации 200 мкг EdU (5-этинил-2′-дезоксиуридин) (Invitrogen Corporation, Carlsband, CA) в 200 мкл PBS инъецировали внутрибрюшинно зараженным и незараженным мышам каждые 24 часа в течение 3 дней, начиная с 0-го дня.Все исследования на животных были одобрены Комитетом по защите животных Центра медицинских наук Техасского университета.

    Выделение клеток из ткани мыши, флуоресцентно-активированная сортировка клеток и анализ методом проточной цитометрии

    Мышей подвергали эвтаназии на 0-й, 3-й или 7-й день после заражения CHS. Кожную ткань удаляли и помещали в 0,1% трипсин в HSBS с 1% FBS на 30 минут при комнатной температуре. Затем дерму отделяли от эпидермиса с помощью щипцов и ножниц и измельчали ​​на срезы по 1 мм перед инкубацией в 1 мг/мл коллагеназы/диспазы (Roche, Indianapolis, IN) в HSBS с 5% FBS при 37°C в течение 45 минут при встряхивании. Платформа.После инкубации образцы дермы помещали на лед. Дерму пропускали через сито для тканей с размером ячеек 70 мкм с помощью резинового поршня. Сито многократно промывали PBS. Собранную смесь клеток затем центрифугировали с образованием клеточного осадка. Клетки однократно промывали буфером для окрашивания (5% FBS в HSBS с 5 мМ ЭДТА), а затем ресуспендировали в буфере для окрашивания с блоком FC (BD Bioscience, Franklin Lakes, NJ) перед инкубацией с флуоресцентно-конъюгированными первичными антителами против CD45 (клон 30-F11). ) (Ebioscience, Сан-Диего, Калифорния), CD31 (клон 390) (Ebioscience), подопланин (клон eBio8.1.1) (Ebioscience) и Calcein AM 10 мкМ (BD Bioscience) в течение 30 минут на льду. Для идентификации ЛЭК мы выбрали маркеры CD31 и подопланин [10]. Адекватная выборка LEC была показана при количестве LEC> 300.

    Для анализа клеточной пролиферации выделение клеток проводили, как описано выше, но перед окрашиванием образцы обогащали CD31-положительными клетками. Образец инкубировали в течение 30 минут на льду с конъюгированным с биотином клоном CD31 390 (Ebioscience). К клеточной смеси добавляли магнитные шарики стрептавидина, MagCellect Streptavidin Ferrofluid (R&D Systems, Минеаполис, Миннесота) и инкубировали в течение 10 минут на льду.Пробирку с образцом помещали в магнитный держатель для разделения. Супернатант удаляли. Клетки CD31+ промывали и окрашивали на CD45, подопланин, кальцеин AM и стрептавидин PE-CY7 (Ebioscience). Клетки сортировали и собирали в среду с 20% FBS. После сортировки клетки фиксировали 2% PFA в течение 5 минут, пермеабилизировали сапонином в течение 1 минуты и окрашивали для интеркаляции EdU с использованием набора для анализа проточной цитометрии Click-iT EdU Alexa Fluor 647 (Invitrogen Corporation). Клетки ресуспендировали в буфере для окрашивания с DAPI в концентрации 5 мкг/мл.В этом случае DAPI использовали для дифференциации клеток от дебриса, который накапливался во время сортировки клеток. Во время анализа мы использовали общую популяцию клеток CD31+ в качестве контроля для установки положительных ворот для EdU, поскольку мы могли получить больший размер выборки, используя эту популяцию. Мы немного скорректировали ворота в каждом отдельном эксперименте, чтобы учесть изменения в эффективности окрашивания и переваривании, но ворота в каждом эксперименте остались прежними. Вся проточная цитометрия и сортировка клеток с активацией флуоресценции (FACS) выполнялись с использованием BD FACSAria™ II (BD Bioscience) и программного обеспечения BD FACSDiva (BD Bioscience), а анализ данных выполнялся с использованием FlowJo версии 7.5.6 (Tree Star, Ashland, OR) (см. рис. S1).

    Иммуноблот

    Клетки, выделенные с помощью FACS, высевали на 24-луночные планшеты для тканевых культур, покрытые фибронектином (Sigma Aldrich) (5 мкг/мл) в среде ECM (Sciencell Research Laboratories, Карлсбад, Калифорния), обогащенной 5% FBS, антибиотиком, 100 единиц/мл. пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и добавки для роста эндотелиальных клеток (Sciencell Research Laboratories) во влажном инкубаторе при 37°C и 5% CO 2 . Среду меняли после прилипания клеток к планшету (5 часов).Клетки культивировали в течение 2 дней перед лизисом с использованием буфера RIPPA (1% NP-40, 0,5% дезоксихолата натрия, 0,1% SDS, 0,15 М NaCl, 2 мМ ЭДТА в трис-основании). Белковые лизаты количественно определяли с использованием анализа BCA (Thermo, Fisher Science, Rockford, IL). Мембрану блоттировали антителами против PROX-1 (Relia Tech, Германия), LYVE-1 (Abcam, Cambridge, MA) и GAPDH (Cell Signaling, Danvers, MA). Вторичное обнаружение проводили с использованием антител, конъюгированных с IRDye800 (Li-Cor Biosciences, Lincoln, NB) и обнаруживаемых с помощью устройства формирования изображения системы Odyssey (Li-Cor Biosciences) для флуоресценции в ближней инфракрасной области.

    Иммуногистохимия

    Клетки, выделенные с помощью FACS, помещали на планшеты для тканевых культур, покрытые фибронектином (5 мкг/мл) (Sigma Aldrich). Клетки выращивали в среде ECM в течение 2 дней, затем обрабатывали трипсином и помещали на предметные стекла для культур (BD Bioscience). Клетки фиксировали 4% PFA и пермеабилизировали 0,1% tritonX. После промывания PBS в лунку добавляли блокирующий буфер (5% ослиная сыворотка в PBS с 1% BSA) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Первичные антитела к PROX-1 (Relia Tech) и подопланину (Santa Cruz Biotechnology, Санта-Круз, Калифорния) разводили в блокирующем буфере и инкубировали в лунках в течение ночи при 4°С.Затем клетки окрашивали вторичным антителом, конъюгированным с флуоресцентным красителем, для обнаружения. Затем проводили микроскопию с использованием Leica DM6000B/TCS SP5.

    Залитые парафином срезы цельной кожи мыши делали срезы при 7 мкМ и дважды депарафинизировали с использованием 100% ксилола в течение 3 минут, а затем регидратировали с использованием градиента этанола. Выделение теплового антигена проводили при 100°C в течение 30 минут в буфере цитрата кальция 10 мМ при pH 6. Срезы сначала инкубировали в блокирующем буфере в течение 1 часа, а затем окрашивали в течение ночи при 4°C первичным антителом к ​​подопланину (Santa Cruz Biotechnology).После промывки срезы инкубировали с вторичной антихомячковой алексой-546 (Invitrogen) в течение 2 часов при комнатной температуре. Окрашенные срезы визуализировали (Leica DM600B) и анализировали с помощью программного обеспечения Surveyor (Objective Imaging Ltd, Кембридж, Великобритания). Для измерения плотности лимфы были выбраны 5 случайных областей интереса размером 100 мкм x 100 мкм. Каждая область охватывала эпидермис. Подсчитывали количество сосудов, положительных на окрашивание подопланином. Сосуд определяли как структуру с просветом и по крайней мере одним DAPI-положительным ядром внутри структуры.Мы также использовали ImageJ для определения площади поперечного сечения каждого сосуда.

    Анализ образования трубок

    лунки 96-луночного планшета с тканевым покрытием покрывали 20 мкл Matrigel (BD Bioscience). Матригелю давали затвердеть при 37°С в течение 30 минут. Клетки, выделенные с помощью FACS, разводили в среде ЕСМ и в каждую лунку высевали 5×10 4 клеток. Планшеты инкубировали при 37°С во влажном инкубаторе в течение 24 часов. В то время для оценки структур выполнялась микроскопия светлого поля с использованием микроскопа Leica DM IL.

    Лимфатическая визуализация

    NIRF-визуализация лимфатических сосудов была проведена для определения того, имело ли место изменение архитектуры лимфатических сосудов, и для оценки изменений в эфферентной лимфатической функции из дренирующих лимфатических узлов на стороне воспаления и на нелеченой контралатеральной стороне одной и той же мыши в для того, чтобы определить, были ли последствия системными. Мышей дикого типа C57B/6 визуализировали до сенсибилизации, на 3-й и 7-й день после местного применения на правом бедре мыши.Эта область была выбрана потому, что она дренирует лимфу в паховый лимфатический узел, как и лимфа из хвоста, и, следовательно, позволила нам изучить влияние воспаления на лимфатическую сосудистую сеть, афферентную к дренирующим лимфатическим узлам, без необходимости введения красителя непосредственно в паховый лимфатический узел. воспаленная кожа. Подробный протокол визуализации лимфатических сосудов мышей см. у Robinson et al. [11]. Вкратце, мышей анестезировали изофлураном и с помощью иглы 31-го калибра внутримышечно инъецировали от 5 мкл до 10 мкл ICGreen (Akorn Inc., Лейк-Форест, Иллинойс) в дозе 5 мг/мл в левую и правую стороны основания иглы. хвостик.Затем животных визуализировали с помощью специальной системы визуализации NIRF. Использовали время интегрирования изображения 200 мс и анализировали 1000 кадров изображения для количественной оценки функции пропульсивного лимфатического потока на каждой боковой стороне мышей. Для анализа изображений использовались ImageJ и Matlab. Для определения влияния ХС на лимфатический поток проводящего сосуда, соединяющего паховые и подмышечные лимфатические узлы (ЛУ), измеряли путем подсчета количества «пакетов» красителя, проходящих по собирательным сосудам за время визуализации [12].График зависимости интенсивности флуоресценции от времени и длины вдоль лимфатического сосуда позволил провести пространственно-временную оценку дистальных и проксимальных лимфатических пропульсивных потоков. Мы использовали эти графики для определения лимфатической скорости, времени перемещения пакета из пахового лимфатического узла в подмышечный ЛУ после сокращения и времени, в течение которого сосуды насыщаются красителем. Эти измерения были проведены для серии из N>10 импульсов на животное в группе.

    Измерение ангиогенного и лимфангиогенного фактора

    Воспаленную кожу брали у нелеченых мышей, а также у мышей через 3 и 7 дней после CHS.Дерму отделяли от эпидермиса и дерму гомогенизировали в буфере RIPA с ингибиторами протеазы и ингибиторами фосфатазы. Уровни белка определяли количественно с использованием панели MILLIPLEX Mouse Angiogenesis/Growth Factor Panel (MAGPMAG-24K) (EMD Millipore) и протокола, предоставленного производителем. Анализ проводили на Luminex 200 (Luminex Corp., Остин, Техас) с использованием программного обеспечения Xpotent 3.1.871.0 (Luminex Corp., Остин, Техас), и концентрацию каждого аналита определяли с использованием логарифмической регрессионной кривой и стандартной кривой. .Анализ проводили в четырехкратной повторности для каждого образца, и сообщали о концентрации аналитов и значениях p для одной репрезентативной повторности.

    Статистический анализ

    Статистический анализ выполнен с использованием статистических функций R и Excel (Microsoft) [13]. Группы сравнивали с использованием непараметрического критерия Краскела-Уоллиса или Т-критерия Стьюдента или ANOVA, где это уместно. Эксперименты с участием нескольких групп сначала сравнивались с использованием дисперсионного анализа, а затем применялся Т-критерий для сравнения различий между конкретными релевантными группами.P-значения были скорректированы в каждом эксперименте с использованием коррекции частоты ложных открытий (FDR). Сравнения считались значимыми, если значение p < 0,05 и FDR < 0,1.

    Результаты

    Идентификация лимфатических эндотелиальных клеток у нормальной мыши

    За последние 15 лет идентифицировано

    маркера LEC. Эти маркеры использовались для выделения LEC из кожной ткани человека и мыши в прошлом [5,14,15]. Мы стремились определить относительные изменения в клеточных популяциях в коже мыши.CD45 использовали в качестве маркера для идентификации лейкоцитов, а CD31+/подпланин+ использовали в качестве маркеров для популяции LEC. В отличие от работы других, мы использовали краситель жизнеспособности Calcein AM, чтобы дифференцировать неклеточные события, ожидаемые от коллагеновых тканей, от событий, которые возникли в жизнеспособных клетках до гейтирования на точечной диаграмме FCS-A/SSC-A. Примечательно, что более 50% событий в воротах CD45-/CD31+/подопланин+ оказались нежизнеспособными событиями (рис. S1), что указывает на необходимость использования красителей жизнеспособности для получения точных процентов LEC из образцов кожи.После отбора живых клеток мы выделили с помощью FACS события, которые были отрицательными для CD45 и положительными как для CD31, так и для подопланина (рис. 1А). Эти выделенные с помощью FACS клетки составляли 1,16% клеток CD45 в необработанной коже мышей C57BL\6 дикого типа.

    Рисунок 1. Выделение популяции лимфатических эндотелиальных клеток.

    FACS проводили на клетках, выделенных из кожи спины мышей дикого типа. ( A ) События сначала проходят через FSC и SSC для мусора. Затем наносили на график гейтированные события для определения включения Calcein Am, которое будет происходить только в живых клетках.Мы наблюдали вариации уровней включения кальцеина в различных типах клеток, о чем свидетельствуют множественные наблюдаемые популяции. Затем мы закрыли положительные события для caicein Am, как показано на левом графике. На правом графике показаны жизнеспособные клетки для экспрессии CD31 и подопланина, которые мы идентифицировали как популяцию LEC. ( B ) Вестерн-блоттинг на PROX-1 и LYVE-1 клеточного лизата из выделенной популяции CD45 /CD31 + / подопланина + и культивируемых микрососудистых лимфатических эндотелиальных клеток человека (HMVEC) показывает сравнимую экспрессию этих лимфатические эндотелиальные маркеры в обоих типах клеток.( C ) Выделенные клетки CD45 /CD31 +/подопланин + культивировали и окрашивали на подопланин и PROX-1. Показано иммунофлуоресцентное изображение клеток. Масштабная линейка 100 мкм. ( D ) Изолированные CD45 / CD31 + / CD31 + / Podoplanin + клетки и CD45 + — / CD31 / CD31 / Podoplanin были высечены на Matrigel для 24 часа и только CD45 / CD31 Клетки + / подопланин + были способны образовывать трубчатые структуры.Масштабная линейка 100 мкм.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.g001

    Иммуноблот для PROX-1 и LYVE-1 показал сопоставимые уровни экспрессии в выделенных FACS клетках и культивируемых дермальных микрососудистых лимфатических эндотелиальных клетках человека (рис. 1B). Иммуноокрашивание клеток, выделенных с помощью FACS, также показало ядерную экспрессию PROX-1 и окрашивание мембран на подопланин, согласующееся с идентичностью LEC (рис. 1C). Наконец, клетки, выделенные с помощью FACS, образовали трубчатые структуры на матригеле в течение 24 часов, в то время как контрольные клетки, которые были CD45-/CD31-/подопланин-, не образовались (рис. 1D).Вместе эти данные указывали на то, что изолированная клеточная популяция имела происхождение LEC.

    Выявление изменений клеточных популяций кожи при реакциях ХГС

    Одним из признаков ХГС является инфильтрация лейкоцитами воспаленной области на 3-й день после лечения. Мы наблюдали значительное увеличение количества лейкоцитов (CD45+) с 42% до 75% от общей популяции жизнеспособных клеток, что указывает на инфильтрацию воспаленной кожи лейкоцитами (рис. 2А). Из-за этой большой инфильтрации происходит соответствующее изменение доли нелейкоцитарных (CD45-) клеток с 47% в необработанной коже до 12% от общей популяции жизнеспособных клеток на 3-й день после CHS (рис. 2B).Не было значительных изменений в процентном содержании как CD45+, так и CD45-клеток между 3-м днем ​​после CHS и 7-м днем ​​после CHS, что указывает на ограниченное изменение клеточного состава кожи между этими временными точками.

    Рисунок 2. Количественная оценка LEC in vivo .

    ( A C ) Суспензию отдельных клеток выделяли из необработанных мышей дикого типа через 3 или 7 дней после CHS (N>5). Жизнеспособные/CD45-, жизнеспособные/CD45 +, жизнеспособные/CD45 /CD31 +/подопланин + и жизнеспособные/CD45 /CD31 + клетки подсчитывали с использованием проточной цитометрии и количественно определяли с помощью проточной цитометрии. Программное обеспечение FLOWJo.Мы наблюдали, что процент жизнеспособных клеток CD45+ в популяции жизнеспособных клеток в коже мышей был повышен на 3 и 7 день после CHS по сравнению с необработанными животными (p<0,05). Процент популяции CD45-клеток в жизнеспособной популяции уменьшился на 3-й и 7-й день после CHS по сравнению с необработанными. Животные (p<0,05) Мы наблюдали, что процент жизнеспособных клеток CD45 /CD31 + / подопланин + в популяции CD45- значительно увеличился (p<0.05) на 3-й день после CHS по сравнению с необработанными и через 7 дней после CHS. ( E ) Иммунофлуоресцентный анализ был выполнен для подопланина (зеленый) и DAPI (синий) для идентификации лимфатических сосудов в коже. Стрелками показано расположение лимфатического сосуда. Масштабная линейка 200 мкм. ( F ) Количественную оценку лимфатических сосудов проводили с помощью imageJ. Сосуды подсчитывали, если наблюдали просвет и если хотя бы одно ядро ​​находилось в пределах сигнала подопланина. Значимого изменения плотности лимфы не наблюдалось. G ) Количественное определение площади поперечного сечения лимфатических сосудов в пикселях 2 . Мы обнаружили значительную разницу в размерах сосудов на 3-й день после ЧС по сравнению с другими временными точками. Значимость (p<0,05) обозначена *, а квадратные скобки используются для идентификации значительно различающихся групп.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.g002

    Мы сравнили относительные изменения процентного содержания LEC в популяции нелейкоцитарных клеток во время CHS, чтобы определить, можно ли наблюдать изменения количества LEC с помощью этого метода.Относительный процент популяции нелейкоцитарных клеток обеспечивал сравнение для определения относительного содержания LEC во время лечения. Анализ образцов воспаленной кожи с помощью проточной цитометрии показал, что относительный процент LEC (кальций Ам+/CD45-/CD31+/подопланин+) в популяции нелейкоцитарных клеток увеличился с 1,16% до 1,69% на 3-й день после КГС по сравнению с не-лейкоцитами. обработанных мышей, и уменьшилось в процентах на 7-й день после CHS (1,3%), p<0,05 (рис. 2C). Эти результаты показывают, что популяция LEC увеличивается в относительном количестве среди нелейкоцитарной популяции после начала острого воспаления.Напротив, мы обнаружили, что относительный процент нелейкоцитарных клеток, которые были CD45-/CD31+/подопланиновыми клетками (или эндотелиальными клетками крови (BECs)) значительно уменьшился от необработанной кожи (4,8%) до дня 3 (2,7%). и 7-й день после CHS (1,9%), без существенной разницы между этими двумя последними временными точками (рис. 2 D). Ранее другими исследователями было замечено, что плотность кровеносных сосудов не изменяется на 2-й день ЧС, но что кровеносные сосуды расширены и негерметичны во время ЧС [16–19]. Поэтому мы предположили, что, поскольку относительный процент LEC увеличился, популяция LEC может увеличиваться.

    Мы обнаружили, что интенсивность флуоресценции антител против CD31 и подопланина, которые определяли популяцию LEC, оставалась постоянной с лечением CHS и без него, что указывает на то, что экспрессия CD31 не меняется на LECs при воспалении, что согласуется с выводами, сделанными с использованием других методов [20].

    Мы измерили плотность лимфы в дерме с помощью гистологии у нелеченых животных и на 3, 5 и 7 день после CHS (рис. 2E). Не было существенной разницы в плотности лимфы между временными точками (рис. 2E-F), что согласуется с результатами других исследований [4,6].Хотя многие клетки были окрашены на подопланин на 3-й день после CHS, они не находились в структурах с определенным просветом. Эти клетки могут происходить не только из LEC, поскольку мы также наблюдали с помощью проточной цитометрии, что популяции лейкоцитов также экспрессируют подопланин. Мы обнаружили, что площадь поперечного сечения сосудов значительно больше на 3-й день после ЧС по сравнению с другими днями (рис. 2F).

    Измерение пролиферации лимфатических эндотелиальных клеток при реакциях ХС

    Чтобы определить, подвергаются ли LEC пролиферации в коже на 3-й день CHS, как показывают гистологические наблюдения и относительное количество LEC, мы использовали интеркаляцию EdU в качестве маркера клеточной пролиферации [21,22].Мы обнаружили, что более 20,45% LEC включали EdU между началом CHS и 3-м днем ​​по сравнению с 4,25% у необработанных мышей (p<0,001) (рис. 3A-B). Мы также хотели определить, была ли пролиферация LEC ограничена начальными днями начала CHS, и обнаружили, что только 6,75% LEC были положительными на EdU, если мышам вводили EdU с 4-го по 7-й день после CHS. Мы также измерили процент от общего количества клеток CD31+ (лейкоцитов и нелейкоцитов), которые интеркалировали EdU в кожу, чтобы определить уровень флуоресценции EdU в пролиферирующих клетках.Мы наблюдали аналогичную индукцию клеточной пролиферации в общей популяции CD31+ (рис. 3А, С). Эти данные указывают на то, что наблюдаемое увеличение относительного процента популяции LECs может быть ответственным за изменения в гистологическом наблюдении, и что целостность сосудов может быть частично обусловлена ​​временной индукцией пролиферации LECs.

    Рисунок 3. Идентификация пролиферирующих LEC.

    ( A ) EdU вводили каждые 24 часа внутрибрюшинно мышам либо без лечения, либо после CHS.Готовили суспензии отдельных клеток и выделяли жизнеспособные клетки CD45 /CD31 +/подопланин + с использованием FACS. Затем клетки фиксировали 2% PFA и окрашивали, используя химию click it с красителем Alexa647 и DAPI. Для идентификации клеточной популяции DAPI + /EdU + проводили анализ образца методом проточной цитометрии. Образец графика проточной цитометрии от FCS-A до флуоресценции EdU для всех трех групп, не получавших лечения, инъецированных с 0-го по 3-й день и с 4-го по 7-й день.( B ) Количественное определение LEC или общего числа клеток CD31+, окрашенных на DAPI + /EdU + , у нелеченых мышей, у мышей, которым инъецировали с 0-го по 3-й день после CHS, и у мышей, которым инъецировали на 4-й день до день 7. Мы наблюдали значительное увеличение количества LEC и общего количества клеток CD31+, которые интеркалировали EdU, с 0 по 3 день, обработанных животных с инъекцией с 4 по 7 день и необработанных групп (N = 3) (p <0,001).

    https://doi.org/10.1371/журнал.pone.0076078.g003

    Измерение лимфатического потока с использованием красителя ближнего инфракрасного диапазона ICG

    Лимфатические сосуды используются для инфильтрации иммунных клеток в очаг воспаления и обеспечивают их транспортировку к регионарным лимфатическим узлам, где возникает иммунный ответ. В этом исследовании мы показываем, как и другие, что лимфатический поток нарушается во время воспаления [4,23,24]. Результаты визуализации NIRF не показали изменений в лимфатической архитектуре во время реакции CHS. На изображениях, сделанных до CHS, краситель был хорошо очерчен внутри сосудов, но не на 3, 5 и 7 день после CHS, где визуализация указывала на экстравазацию красителя (рис. 4A-D).Как хорошо видно на дорсальных и латеральных видах обработанных CHS и не получавших лечение боковых сторон мыши через 3 дня после CHS, лимфатические сосуды «просачивали» краситель экстраваскулярно, но все еще проводили лимфу, о чем свидетельствует способность красителя достигать подмышечный лимфатический узел (рис. 4 EI).

    Рисунок 4. Лимфатическая визуализация с использованием ICG.

    ( A D ) Мышам инъецировали IGC I.D. в основание хвоста для выделения лимфатической архитектуры на 0, 3, 5 и 7 дни после лечения CHS.Мы показываем изображения от одной репрезентативной мыши. Оксазолон наносили на правое бедро мыши, а левую сторону не обрабатывали. Желтая пунктирная линия — это контур тела мыши. Мы наблюдали экстравазацию красителя ICG после начала CHS. ( E I ) Мы показываем изображения репрезентативной мыши на 3-й день после CHS, чтобы сравнить изменения, происходящие на стороне, обработанной CHS, и на стороне, не подвергавшейся лечению. Область бедра была увеличена в размерах, чтобы помочь визуализировать утечку красителя в интерстициальной области.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.g004

    До лечения в проводящих сосудах между паховыми и подмышечными лимфатическими узлами происходило продвижение лимфы с частотой 5,3 ± 2,7 имп/мин, что соответствовало ранее сообщаемые значения (см. видео S1 и рисунок 5A) [12]. Временное движение также можно визуализировать с помощью пространственно-временных карт интенсивности флуоресценции, которые очерчивают распространение лимфы, нагруженной ICG. На рисунке 5A область более высокой интенсивности из лимфы, нагруженной ICG, перемещается проксимально от ROI-1 к ROI-25 в 1.5 сек (стрелки на пространственно-временном графике). При фиксированной области интереса вдоль проводящего лимфатического сосуда (пунктирная стрелка, рис. 5A-D) интенсивность флуоресценции сначала увеличивается с заполнением лимфангиона, а затем снижается, указывая на сокращение лимфангиона и опорожнение нагруженной ICG лимфы, что повторяется в перистальтике. способ.

    Рис. 5. Измерение лимфатического потока с использованием красителя ICG ближнего инфракрасного диапазона.

    A-D Мышам вводили внутрикожно. с IGC у основания хвоста для количественной оценки сократительной способности и определения фракции выброса лимфы в дни 0 ( A ), 3 ( B ) и 7 ( C ) пост-CHS в контралатеральной вид на 3-й день ( D ) (N=3).Отобранные кадры показаны от одного и того же образца мышей, чтобы проиллюстрировать изменения, происходящие в лимфатическом потоке. Показано, что пространственно-временные карты интенсивности флуоресценции визуализируют фракцию выброса красителя ICG. Мы наблюдали, что у мышей до лечения ( A ), на 7-й день после CHS ( B ) или на контралатеральной стороне на 3-й день после CHS ( D ) наблюдался прямой ток, но на 3-й день ( C ) на стороне воспаления лимфоток нарушен и имеет обратный ток.

    https://дои.org/10.1371/journal.pone.0076078.g005

    На 3-й день после начала ХС мы наблюдали аналогичную скорость сократительной лимфатической пропульсии 5,6 ± 2,1 импульса в минуту, но с постоянным «рефлюксом» лимфы, нагруженной ICG ( Рисунок 5B и см. Видео S2). Типичная пространственно-временная карта интенсивности флуоресценции на 3-й день демонстрирует явление «рефлюкса» как с проксимальным, так и с дистальным током лимфы с ICG (черные стрелки, рис. 5B, рис. S2), а также расширение гребня интенсивности, что может указывать на неполное опорожнение и наполнение лимфатического сегмента.Мы измерили значительное двукратное увеличение времени, необходимого для заполнения сосуда красителем (гребень интенсивности), по сравнению с таковым у необработанных животных по сравнению с животными на 3-й день после CHS. Мы также наблюдали, что даже если скорость лимфы (т. е. время, необходимое лимфатическому пакету с ICG, чтобы пройти расстояние от пахового лимфатического узла до аксиального ЛУ) была одинаковой. Это наблюдение было сделано на каждом изображенном нами животном. Эти данные показывают, что на эффективность потока влияет CHS.На 7-й день после лечения CHS лимфатическая недостаточность была устранена, но все еще проявлялся «рефлюкс» (видео S3 и рисунок 5C). Феномен рефлюкса не наблюдался на противоположных, необработанных сторонах животных (видео S4 и рисунок 5D).

    Таким образом, в то время как показатели лимфатической сократимости не были затронуты при лечении ХС, лимфатический «рефлюкс» приводит к менее эффективному транспорту лимфы в воспаленных кожных лимфатических сосудах, что приводит к лимфатической недостаточности с последующим выздоровлением.

    Идентификация проангиогенных.- лимфангиогенных факторов в CHS

    Мы стремились определить, какие проангиогенные и пролимфангиогенные факторы присутствовали в кожных тканях мышей, подвергшихся активной пролиферации LEC, и у которых была нарушена лимфатическая функция. Чтобы обратиться к локальной среде лимфатических сосудов, мы исследовали концентрацию белка в дерме и исключили эпидермис, в котором отсутствуют лимфатические сосуды. Многие факторы роста и цитокины продуцируются клетками эпидермиса (такими как кератиноциты), но эти факторы должны проникать в дерму, чтобы воздействовать непосредственно на LEC.Таким образом, оценивая дерму, мы измеряли факторы роста в локальной среде лимфатических сосудов. Мы провели анализ миллиплекса для 27 аналитов общего белка, выделенного из дермы мышей у нелеченых животных, животных на 3-й день после лечения CHS и на 7-й день после лечения CHS. Мы сравнили отношения к нормальным уровням между группами и обнаружили, что 11 факторов из 27 были значительно повышены на 3-й день по сравнению как с необработанными животными, так и с 7-м днем ​​(таблица S1). Факторы, ангиопоэтин-2, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (G-CSF), sALK-1, амфирегулин, эндотелин-1, фактор роста гепатоцитов (HGF), фактор роста плаценты-2 (PLGF-2), макрофагальный воспалительный белок -1 α (MIP-1α), VEGF-A, TNF-α и KC/CXCL17 были значительно повышены (p<0.05 и FDR<0,1) по сравнению с обоими уровнями до лечения и на 7-й день после CHS (рис. 6). Интересно отметить, что с размером выборки, рассчитанным на 80%, и изменением отношения 0,6, концентрация VEGF-C и VEGF-D существенно не менялась в ходе реакции CHS с увеличением/уменьшением популяции LEC и уменьшением /увеличение лимфатической функции. Эти данные указывают на то, что другие факторы роста, экспрессия которых в тканях увеличивается или уменьшается, могут работать совместно с VEGFC и VEGFD, вызывая пролиферацию LEC и изменения лимфатической функции при остром CHS.

    Рисунок 6. Идентификация проангиогенных.-лимфангиогенных факторов, значительно изменяющих ЧС на 3-й день после ЧС по сравнению с необработанным и на 7-й день. 7-й день мышей после заражения CHS с использованием протокола производителя. Мы сообщаем среднее отношение ± стандартное значение концентрации, нормализованной к необработанным значениям для аналитов, которые значительно различаются. * p<0,05 (FDR<0,1) день 3 по сравнению с отсутствием лечения.# p<0,05 (FDR<0,1) день 3 по сравнению с днем ​​7.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.g006

    Обсуждение

    Явление ремоделирования лимфатической системы или изменение лимфатической функции, вызванное острым воспалением, изучено недостаточно. В этом исследовании мы определили, что пролиферация ЛЭК происходит на ранних стадиях воспаления и сопровождается инфильтрацией клеток CD45+ и потерей лимфатической функции.

    Мы разработали метод идентификации пролиферативных LEC in vivo, позволяющий нам определить, что LEC пролиферируют, начиная с начала CHS, но не пролиферируют после пика CHS на 3-й день.Процент нелейкоцитарных клеток значительно снизился на 3 и 7 день после CHS по сравнению с нелеченными животными. Это уменьшение относительного процента популяции нелейкоцитарных клеток, скорее всего, связано с инфильтрацией CD45+ лейкоцитов, что является отличительной чертой CHS. Относительный процент BEC в популяции лейкоцитов уменьшился от необработанной кожи до 3-го дня после CHS, но может быть артефактом относительного количества из-за увеличения инфильтрирующих лейкоцитов. Другие показали, что ангиогенеза в ухе во время КХС не происходит, поскольку не наблюдается изменений плотности сосудов, но сосуды увеличиваются в размерах и становятся негерметичными в ответ на КХС [16].Здесь мы определили, что популяция BEC уменьшается по сравнению с популяцией нелейкоцитов. Мы предполагаем, что это относительное снижение процента БЭК происходит не из-за уменьшения фактического числа клеток, а скорее из-за уменьшения общего вклада БЭК в нелейкоцитарную популяцию, возникающего из-за пролиферации других нелейкоцитов. лейкоциты. Используя аналогичную логику, увеличение относительного процента LEC внутри нелейкоцитарной популяции указывает на то, что популяция LEC должна изменяться с большей скоростью, чем средняя нелейкоцитарная популяция, и, следовательно, может пролиферировать.В соответствии с другими сообщениями, наши гистологические результаты показывают, что плотность лимфатической жидкости не увеличивается во время CHS [6]. Мы наблюдали увеличение площади лимфатических сосудов на 3-й день CHS, что соответствовало времени, когда мы обнаружили, что лимфатические сосуды становятся негерметичными с помощью визуализации NIRF. Эти данные свидетельствуют о модификации судна. Мы также обнаружили повышенное количество клеток подопланин+ по гистологии на 3-й день после CHS. Сочетание увеличения относительного процента LEC, гистологического наблюдения за увеличением числа одиночных клеток подопланина и негерметичности лимфатической сосудистой сети привело нас к гипотезе о том, что модификация лимфатических сосудов включает пролиферацию LEC.Чтобы подтвердить эту гипотезу, мы использовали интеркаляцию EdU как показатель уровня пролиферации LEC. Мы обнаружили, что скорость интеркаляции EdU увеличилась до 20,45% с 4,25% в необработанной коже, что свидетельствует о пролиферации LEC.

    Мы идентифицировали пролимфангиогенные факторы, которые по-разному экспрессируются на ранних стадиях CHS, в дополнение к тканевой экспрессии, которая параллельна увеличению и уменьшению пролиферации LEC и лимфатической функции. Наши данные также свидетельствуют о том, что пролиферация LEC приводит не к образованию сосудов de novo, а скорее к расширенным сосудам, которые могут быть причиной неэффективности лимфатической сократительной накачки.Кроме того, пролиферативные LEC могут интегрироваться в существующие сосуды для восстановления поврежденных сосудов в воспаленной коже. Восстановление лимфатических сосудов, возможно, требует динамического баланса между пролиферацией и регрессией сосудов, подобно тому, что хорошо известно и изучено в исследованиях ангиогенеза кровеносных сосудов [25-27].

    Мы определили, что поверхностные собирающие лимфатические сосуды в воспаленных участках кожи не демонстрируют изменений в архитектуре во время воспаления, но вместо этого обнаружили экстравазацию нагруженной ICG лимфы, что может указывать на негерметичность лимфатических сосудов, связанную с включением пролиферативных LEC.Мендес и др. также обнаружили, что при остром СГС в передней конечности крыс снижается лимфатический дренаж, о чем свидетельствует интерстициальное распространение красителя [24].

    Периферическая лимфатическая система отводит избыток интерстициальной жидкости обратно в кровоток, но также направляет транспорт иммунных клеток. Воспаление влияет на отток лимфы и объем лимфы, движимый лимфатическим сокращением [23,24]. Здесь мы продемонстрировали, что на сократительную способность лимфатических сосудов, выходящих к воспаленной области, воспаление не влияет, но что эффективность лимфатической прокачки снижается, о чем свидетельствует обратный ток, наблюдаемый на 3-й день после CHS, и снижение выброса. окрашивание после сжатия.Известно, что оксид азота (NO) влияет на функцию лимфатической системы посредством изменения местной концентрации. Ляо и др. предположили, что iNOS, продуцируемая CD11b+, привлеченными к воспаленной области, способствует расслаблению лимфатических сосудов, что делает сокращения неспособными эффективно продвигать лимфу [23]. Исследования на изолированных лимфатических сосудах показали, что большие изменения уровня NO подавляют сократительную способность, а небольшие изменения локальной концентрации влияют на силу сокращения [28, 29]. Эти локальные изменения продукции NO регулируются силами сдвига в сосуде, вызывая последующие сокращения [30].Кроме того, Скаллан и соавт. обнаружили, что у мышей с дефицитом эндотелиальной NO-синтазы наблюдается снижение амплитуды сокращения. В наших исследованиях мы наблюдали изменения амплитуды или силы сокращения, локализованные в очаге воспаления [28]. Этот эффект не был системным, на что указывает нормальный транспорт лимфы на противоположных, необработанных сторонах обработанных животных. Наши результаты подтверждают выводы Liao et al. показывая, что (i) лимфа не так эффективно выходит из лимфангионов на 3-й день после CHS по сравнению с до лечения, и что (ii) этот эффект наблюдается только на воспаленной стороне, что указывает на местный, а не систематический эффект.Исходя из наших данных и работы других авторов, мы можем предположить, что при ЧС регуляция локальных уровней NO, расширение сосудов и сила сдвига внутри сосуда могут регулировать лимфатический поток.

    Большинство исследований лимфангиогенеза сосредоточено на роли членов семейства VEGF в этом процессе. Было обнаружено, что экспрессия VEGF-A в коже вызывает хроническое воспаление после индукции CHS, что, в свою очередь, способствует лимфангиогенезу в воспаленной ткани [5]. Сообщалось, что экспрессия как VEGF-C, так и VEGF-D в коже увеличивает размер и количество лимфатических сосудов [4].Напротив, Goldman et al. обнаружили, что VEGF-C не способствует лимфангиогенезу в коже, а оказывает лишь временное влияние на сосудистую сеть [31]. Чтобы исследовать те факторы, которые потенциально ответственны за стимулирование пролиферации LEC во время CHS, мы сравнили уровни экспрессии белков в тканях на 3-й день после заражения CHS как у необработанных животных, так и у животных на 7-й день после лечения CHS. Мы включили только дерму в наш лизат ткани, чтобы определить факторы роста, которые локально влияют на лимфатические сосуды в соответствии с пролиферацией LEC.По наблюдениям Halin et al., мы также обнаружили увеличение экспрессии VEGF-A в воспаленной коже на 3-й день по сравнению с нелечеными животными (рис. 6) [5]. К нашему удивлению, мы не наблюдали значительного изменения экспрессии VEGF-C или VEGF-D на 3-й день по сравнению с необработанными и на 7-й день после CHS. В другой модели УФВ-облучения уровень VEGF-C в коже снижался, а лимфатические сосуды увеличивались [32]. В наших исследованиях ангиопоэтин-2, G-CSF, sALK-1, амфирегулин, эндотелин-1, HGF, PLGF-2, MIP-1α, VEGF-A, TNFα и KC/CXCL17 повышались на 3-й день по сравнению с обоими препаратами. день 7 после CHS и у нелеченых животных.Из одиннадцати белков, профили которых следовали за изменениями пролиферации LEC и лимфатической дисфункции, HGF, FGF-2, PLGF-2, ангиопоэтин-2 и G-CSF ранее ассоциировались с гиперплазией лимфатических сосудов и вызывали пролиферацию LEC [17,33]. –35]. Интересно, что KC/CXCL17 представляет собой хемокин с противовоспалительным действием, который ослабляет экспрессию провоспалительных генов, таких как TNF-α и IL-6, а также iNOS [36]. Эти факторы могут действовать прямо или косвенно на LEC, способствуя пролиферации, ремоделированию сосудов и потенциально влияя на лимфатический поток независимым от VEGF-C и -D образом.

    Наши данные свидетельствуют о том, что лимфатические сосуды ремоделируются и LEC пролиферируют при CHS. Кроме того, CHS индуцирует локальное снижение лимфатического транспорта за счет экспрессии факторов роста и хемокинов, которые способствуют расширению и проницаемости сосудов, и/или за счет изменений локальных сил сдвига. Наше исследование указывает на необходимость дальнейшего изучения важности других факторов, таких как KC/CXCL17, на лимфатическую функцию и пролиферацию.

    Дополнительная информация

    Рисунок S1.

    Использование красителя жизнеспособности Calcein Am требуется для идентификации LEC из кожной ткани. Другие использовали проточную цитометрию и лимфатические маркеры для идентификации LEC в ткани, но не использовали краситель жизнеспособности для различения неклеточных событий. Мы обнаружили, что менее 50% событий, которые были CD45-/CD31+/подопланин+, не включали Calcein Am. Это открытие указывает на то, что регулярного различения прямого и бокового рассеяния недостаточно для устранения дебриса и что для правильного количественного определения и идентификации LEC в ткани кожи требуется использование жизнеспособных красителей, таких как Calcein AM.Мы показываем образец графика событий, которые представляют собой подопланин + / CD31 +, которые мы гейтировали на SSC ​​и FSC и из-за отсутствия окрашивания CD45 (левый график). Затем мы выбрали двойные положительные события и искали процент клеток, которые также окрашивались для Calcein AM. Мы заметили, что только 35,6% клеток в воротах подопланин+/CD31+ на самом деле являются живыми клетками.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s001

    (PDF)

    Рисунок S2.

    Пространственно-временные графики для нескольких животных показывают обратный ток лимфы при CHS. Графики, показывающие интенсивность флуоресценции вдоль лимфатического сосуда от пахового ЛУ до подмышечного ЛУ, указывают на потерю эффективного кровотока на 3-й день после CHS. Графики относятся к двум животным до лечения и на 3-й день после CHS. Стрелки указывают направление пиков интенсивности. Наблюдается изменение направления пика интенсивности от постоянного движения вперед (от пахового ЛУ к подмышечному ЛУ) у предварительно обработанных животных на прямое и обратное движение (от подмышечного ЛУ к паховому ЛУ) у обработанных животных.Эти данные свидетельствуют об изменении эффективности лимфотока.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s002

    (PDF)

    Таблица S1.

    Выявление проангиогенных. — лимфангиогенные факторы при ЧГС .

    В таблице показано среднее отношение ± стандартное значение концентрации, нормализованной к необработанным значениям (N>8) всех проанализированных аналитов, для которых данные воспроизводились в множественном анализе. Мы также показываем результаты ANOVA, FDR для ANOVA и скорректированное значение p для каждого проведенного сравнения.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s003

    (PDF)

    Видео S1.

    Видеоскоростная флуоресцентная визуализация лимфатического потока, время экспозиции 200 мс. Мы записали флуоресцентный сигнал после инъекции IGG, как описано в разделе «Метод». На видео показано 200 кадров при выдержке 200 мс. На видео показаны пакеты с красителем ICG, движущиеся по лимфатическим сосудам. Флуоресцентные сигналы были преобразованы в псевдоцветные изображения (зеленые) с использованием MatLab.В ролике показано время, прошедшее с начала записи, и мы показываем 15 кадров в секунду.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s004

    (AVI)

    Видео S2.

    Видеоскоростная флуоресцентная визуализация лимфатического потока, время экспозиции 200 мс. Мы записали флуоресцентный сигнал после инъекции IGG, как описано в разделе «Метод». На видео показано 200 кадров при выдержке 200 мс. На видео показаны пакеты с красителем ICG, движущиеся по лимфатическим сосудам.Флуоресцентные сигналы были преобразованы в псевдоцветные изображения (зеленые) с использованием MatLab. В ролике показано время, прошедшее с начала записи, и мы показываем 15 кадров в секунду.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s005

    (AVI)

    Видео S3.

    Видеоскоростная флуоресцентная визуализация лимфатического потока, время экспозиции 200 мс. Мы записали флуоресцентный сигнал после инъекции IGG, как описано в разделе «Метод». На видео показано 200 кадров при выдержке 200 мс.На видео показаны пакеты с красителем ICG, движущиеся по лимфатическим сосудам. Флуоресцентные сигналы были преобразованы в псевдоцветные изображения (зеленые) с использованием MatLab. В ролике показано время, прошедшее с начала записи, и мы показываем 15 кадров в секунду.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s006

    (AVI)

    Видео S4.

    Видеоскоростная флуоресцентная визуализация лимфатического потока, время экспозиции 200 мс. Мы записали флуоресцентный сигнал после инъекции IGG, как описано в разделе «Метод».На видео показано 200 кадров при выдержке 200 мс. На видео показаны пакеты с красителем ICG, движущиеся по лимфатическим сосудам. Флуоресцентные сигналы были преобразованы в псевдоцветные изображения (зеленые) с использованием MatLab. В ролике показано время, прошедшее с начала записи, и мы показываем 15 кадров в секунду.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0076078.s007

    (AVI)

    Авторские взносы

    Задумал и разработал эксперименты: PAL AH. Проведены эксперименты: PAL.Проанализированы данные: PAL AH EMS. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: PAl AH EMS. Написал рукопись: PAL EMS.

    Каталожные номера

    1. 1. Адамс Р.Х., Алитало К. (2007)Молекулярная регуляция ангиогенеза и лимфангиогенеза. Nat Rev Mol Cell Biol 8: 464-478. doi: https://doi.org/10.1038/nrm2183. PubMed: 17522591.
    2. 2. Расмуссен Дж. К., Тан И. С., Маршалл М. В., Адамс К. Е., Квон С. и др. (2010) Лимфатическая архитектура человека и динамический транспорт, полученные с использованием флуоресценции в ближнем инфракрасном диапазоне.Перевод Онкол 3: 362-372. PubMed: 21151475.
    3. 3. Унно Н., Нишияма М., Судзуки М., Танака Х., Ямамото Н. и др. (2010)Новый метод измерения лимфатической прокачки человека с использованием индоцианиновой зеленой флуоресцентной лимфографии. J Vasc Surg 52: 946-952. doi: https://doi.org/10.1016/j.jvs.2010.04.067. PubMed: 20619581.
    4. 4. Хаггенбергер Р., Сиддики С.С., Брандер Д., Ульманн С., Циммерманн К. и др. (2011)Важная роль активации лимфатических сосудов в ограничении острого воспаления.Кровь 117: 4667-4678. doi: https://doi.org/10.1182/blood-2010-10-316356. PubMed: 21364190.
    5. 5. Halin C, Tobler NE, Vigl B, Brown LF, Detmar M (2007) VEGF-A, продуцируемый хронически воспаленной тканью, индуцирует лимфангиогенез в дренирующих лимфатических узлах. Кровь 110: 3158-3167. doi: https://doi.org/10.1182/blood-2007-01-066811. PubMed: 17625067.
    6. 6. Кунстфельд Р., Хиракава С., Хонг Ю.К., Шахт В., Ланге-Асшенфельдт Б. и другие. (2004) Индукция кожных реакций гиперчувствительности замедленного типа у мышей, трансгенных по VEGF-A, приводит к хроническому воспалению кожи, связанному со стойкой лимфатической гиперплазией.Кровь 104: 1048-1057. doi: https://doi.org/10.1182/blood-2003-08-2964. PubMed: 15100155.
    7. 7. Huggenberger R, Ullmann S, Proulx ST, Pytowski B, Alitalo K et al. (2010) Стимуляция лимфангиогенеза с помощью VEGFR-3 ингибирует хроническое воспаление кожи. J Exp Med 207: 2255-2269. doi: https://doi.org/10.1084/jem.20100559. PubMed: 20837699.
    8. 8. Halin C, Fahrngruber H, Meingassner JG, Bold G, Littlewood-Evans A et al. (2008)Подавление хронического и острого воспаления кожи путем лечения ингибитором тирозинкиназы рецептора фактора роста эндотелия сосудов.Ам Дж. Патол 173: 265-277. doi: https://doi.org/10.2353/ajpath.2008.071074. PubMed: 18535184.
    9. 9. Huggenberger R, Detmar M (2011)Кожная сосудистая система при хроническом воспалении кожи. J Investig Dermatol Symp Proc 15: 24-32. doi: https://doi.org/10.1038/jidsymp.2011.5. PubMed: 22076324.
    10. 10. Брайтенедер-Гелефф С., Солейман А., Ковальски Х., Хорват Р., Аманн Г. и др. (1999) Ангиосаркомы экспрессируют смешанные эндотелиальные фенотипы кровеносных и лимфатических капилляров: подопланин как специфический маркер лимфатического эндотелия.Ам Дж. Патол 154: 385-394. doi: https://doi.org/10.1016/S0002-9440(10)65285-6. PubMed: 10027397.
    11. 11. Робинсон Х., Квон С., Холл М., Расмуссен Дж., Олдрич М. и др. (2012)Неинвазивная оптическая визуализация лимфатических сосудов мыши. J Vis Exp: e4326.
    12. 12. Квон С., Севик-Мурака Э.М. (2007)Неинвазивная количественная визуализация функции лимфы у мышей. Lymph Res Biol 5: 219-231. doi: https://doi.org/10.1089/lrb.2007.1013. PubMed: 18370912.
    13. 13.Team RDC (2008) R: Язык и среда для статистических вычислений. R Foundation Статистические вычисления.
    14. 14. Крихубер Э., Брайтенедер-Гелефф С., Гроегер М., Солейман А., Шоппманн С.Ф. и другие. (2001) Выделение и характеристика дермальных лимфатических и кровяных эндотелиальных клеток выявили стабильные и функционально специализированные клеточные линии. J Exp Med 194: 797-808. doi: https://doi.org/10.1084/jem.194.6.797. PubMed: 11560995.
    15. 15. Мякинен Т., Вейккола Т., Мустьоки С., Карпанен Т., Катимель Б. и другие.(2001) Изолированные лимфатические эндотелиальные клетки передают сигналы роста, выживания и миграции через рецептор VEGF-C/D VEGFR-3. EMBO J 20: 4762-4773. doi: https://doi.org/10.1093/emboj/20.17.4762. PubMed: 11532940.
    16. 16. Lange-Asschenfeldt B, Weninger W, Velasco P, Kyriakides TR, von Andrian UH et al. (2002)Увеличение и пролонгирование воспаления и ангиогенеза при реакциях гиперчувствительности замедленного типа, вызванных в коже мышей с дефицитом тромбоспондина-2. Кровь 99: 538-545.doi: https://doi.org/10.1182/blood.V99.2.538. PubMed: 11781236.
    17. 17. Оура Х., Бертончини Дж., Веласко П., Браун Л.Ф., Кармелиет П. и др. (2003) Критическая роль плацентарного фактора роста в индукции воспаления и образования отека. Кровь 101: 560-567. doi: https://doi.org/10.1182/blood-2002-05-1516. PubMed: 12393422.
    18. 18. Velasco P, Huegel R, Brasch J, Schröder JM, Weichenthal M et al. (2009) Ингибитор ангиогенеза тромбоспондин-1 ингибирует острые кожные реакции гиперчувствительности.J Invest Dermatol 129: 2022-2030. doi: https://doi.org/10.1038/jid.2008.447. PubMed: 1

      74.
    19. 19. Ким И, Ким К, Пак Д, Ом С, Пак Х и др. (2011) Интегрин альфа (5) взаимодействует с EGFR, необходим для передачи сигналов FcvarepsilonRI и необходим для аллергического воспаления в связи с ангиогенезом. Мол Иммунол 48: 1035-1045. doi: https://doi.org/10.1016/j.molimm.2011.01.013. PubMed: 21349584.
    20. 20. Vigl B, Aebischer D, Nitschké M, Iolyeva M, Röthlin T et al.(2011)Воспаление тканей модулирует экспрессию генов лимфатических эндотелиальных клеток и миграцию дендритных клеток в зависимости от стимула. Кровь 118: 205-215. doi: https://doi.org/10.1182/blood-2010-12-326447. PubMed: 21596851.
    21. 21. Cappella P, Gasparri F, Pulici M, Moll J (2008)Новый метод, основанный на клик-химии, который преодолевает ограничения анализа клеточного цикла за счет классического определения включения BrdU, позволяя окрашивать множественные антитела. Цитометрия А 73: 626-636.PubMed: 18521918.
    22. 22. Salic A, Mitchison TJ (2008) Химический метод быстрого и чувствительного обнаружения синтеза ДНК in vivo. Proc Natl Acad Sci USA 105: 2415-2420. doi: https://doi.org/10.1073/pnas.0712168105. PubMed: 18272492.
    23. 23. Ляо С., Ченг Г., Коннер Д.А., Хуан Ю., Кучерлапати Р.С. и др. (2011)Нарушение лимфатического сокращения, связанное с иммуносупрессией. Proc Natl Acad Sci USA 108: 18784-18789. doi: https://doi.org/10.1073/pnas.1116152108.PubMed: 22065738.
    24. 24. Mendez U, Stroup EM, Lynch LL, Waller AB, Goldman J (2012)Хроническая и латентная лимфатическая недостаточность следует за выздоровлением от острой лимфедемы в передней конечности крысы. Am J Physiol Heart Circ Physiol 303: h2107-h2113. doi: https://doi.org/10.1152/ajpheart.00522.2012. PubMed: 22942182.
    25. 25. Capla JM, Ceradini DJ, Tepper OM, Callaghan MJ, Bhatt KA et al. (2006) Васкуляризация кожного трансплантата включает точно регулируемую регрессию и замену эндотелиальных клеток посредством как ангиогенеза, так и васкулогенеза.Plast Reconstr Surg 117: 836-844. doi: https://doi.org/10.1097/01.prs.0000201459.

      .7f. PubMed: 16525274.

    26. 26. Dimmeler S, Zeiher AM (2000)Апоптоз эндотелиальных клеток при ангиогенезе и регрессии сосудов. Циркуляр Рез. 87: 434-439. doi: https://doi.org/10.1161/01.RES.87.6.434. PubMed: 10988233.
    27. 27. Im E, Kazlauskas A (2006)Новое понимание регрессии сосудов. Клеточный цикл 5: 2057-2059. doi: https://doi.org/10.4161/cc.5.18.3210. ПабМед: 16969103.
    28. 28. Scallan JP, Davis MJ (2013)Генетическое удаление базального оксида азота усиливает сократительную активность в изолированных мышиных собирающих лимфатических сосудах. J Physiol 591: 2139-2156. PubMed: 23420659.
    29. 29. Bohlen HG, Wang W, Gashev A, Gasheva O, Zawieja D (2009)Фазовые сокращения мезентериальных лимфатических сосудов крыс увеличивают базальную и фазовую выработку оксида азота in vivo. Am J Physiol Heart Circ Physiol 297: h2319-h2328. doi: https://doi.org/10.1152/ajpheart.00039.2009. PubMed: 19666850.
    30. 30. Диксон Дж.Б., Грейнер С.Т., Гашев А.А., Кот Г.Л., Мур Дж.Е. и соавт. (2006)Ток лимфы, напряжение сдвига и скорость лимфоцитов в брыжеечных пренодальных лимфатических сосудах крысы. Микроциркуляция 13: 597-610. doi: https://doi.org/10.1080/10739680600893909. PubMed: 169.
    31. 31. Goldman J, Le TX, Skobe M, Swartz MA (2005)Сверхэкспрессия VEGF-C вызывает транзиторную лимфатическую гиперплазию, но не увеличивает лимфангиогенез в регенерирующей коже.Циркуляр Рез. 96: 1193-1199. doi: https://doi.org/10.1161/01.RES.0000168918.27576.78. PubMed: 158.
    32. 32. Kajiya K, Sawane M, Huggenberger R, Detmar M (2009)Активация пути VEGFR-3 с помощью VEGF-C ослабляет вызванное UVB образование отека и воспаление кожи, способствуя лимфангиогенезу. Дж. Инвест Дерматол 129: 1292-1298. doi: https://doi.org/10.1038/jid.2008.351. PubMed: 1
      91.
    33. 33. Чанг Л.К., Гарсия-Карденья Г., Фарнебо Ф., Фэннон М., Чен Э.Дж. и др.(2004) Дозозависимый ответ FGF-2 на лимфангиогенез. Proc Natl Acad Sci USA 101: 11658-11663. doi: https://doi.org/10.1073/pnas.0404272101. PubMed: 15289610.
    34. 34. Kajiya K, Hirakawa S, Ma B, Drinnenberg I, Detmar M (2005)Фактор роста гепатоцитов способствует формированию и функционированию лимфатических сосудов. EMBO J 24: 2885-2895. doi: https://doi.org/10.1038/sj.emboj.7600763. PubMed: 16052207.
    35. 35. Брахер А., Кардона А.С., Таубер С., Финк А.М., Штайнер А. и другие.(2012)Эпидермальный фактор роста способствует метастазированию меланомы в лимфатические узлы, влияя на лимфангиогенез опухоли. J Invest Dermatol 133: 230-238. PubMed: 22951723.
    36. 36. Lee WY, Wang CJ, Lin TY, Hsiao CL, Luo (2013) CW CXCL17, орфанный хемокин, действует как новый ангиогенный и противовоспалительный фактор. Am J Physiol Endocrinol Metab 304: E32-E40. doi: https://doi.org/10.1152/ajpendo.00083.2012. ПабМед: 23115081.

    Лимфатические сосуды: новые мишени для лечения воспалительных заболеваний

  • Альбрехт И., Кристофори Г. (2011) Молекулярные механизмы лимфангиогенеза при развитии и раке.Int J Dev Biol 55 (4–5): 483–494. doi:10.1387/ijdb.103226ia

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Alitalo K (2011) Лимфатическая сосудистая система при заболеваниях. Nat Med 17 (11): 1371–1380. дои: 10.1038/nm.2545

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Cueni LN, Detmar M (2006) Новое понимание молекулярного контроля лимфатической сосудистой системы и его роли в заболевании.J Invest Dermatol 126(10):2167–2177. дои: 10.1038/sj.jid.5700464

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Halin C, Detmar M (2008) Глава 1. Воспаление, ангиогенез и лимфангиогенез. Методы Enzymol 445:1–25. дои: 10.1016/S0076-6879(08)03001-2

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Хиракава С., Хонг Ю.К., Харви Н., Шахт В., Мацуда К., Либерманн Т., Детмар М. (2003) Идентификация генов, специфичных для сосудистых линий, путем профилирования транскрипции изолированных эндотелиальных клеток кровеносных сосудов и лимфатических сосудов.Ам Дж. Патол 162 (2): 575–586. дои: 10.1016/S0002-9440(10)63851-5

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Kriehuber E, Breiteneder-Geleff S, Groeger M, Soleyman A, Schoppmann SF, Stingl G, Kerjaschki D, Maurer D (2001) Выделение и характеристика кожных лимфатических и кровяных эндотелиальных клеток выявили стабильные и функционально специализированные клеточные линии. J Exp Med 194(6):797–808

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Петрова Т.В., Макинен Т., Макела Т.П., Саарела Дж., Виртанен И., Феррелл Р.Е., Финеголд Д.Н., Керяшки Д., Ила-Херттуала С., Алитало К. (2002) Лимфатическое эндотелиальное перепрограммирование эндотелиальных клеток сосудов с помощью Prox-1 фактор транскрипции гомеобокс.EMBO J 21(17):4593–4599

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Makinen T, Veikkola T, Mustjoki S, Karpanen T, Catimel B, Nice EC, Wise L, Mercer A, Kowalski H, Kerjaschki D, Stacker SA, Achen MG, Alitalo K (2001) Преобразование изолированных лимфатических эндотелиальных клеток сигналы роста, выживания и миграции через рецептор VEGF-C/D VEGFR-3. EMBO J 20 (17): 4762–4773. doi: 10.1093/emboj/20.17.4762

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Таммела Т., Алитало К. (2010) Лимфангиогенез: молекулярные механизмы и перспективы на будущее.Ячейка 140 (4): 460–476. doi:10.1016/j.cell.2010.01.045

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kaipainen A, Korhonen J, Mustonen T, van Hinsbergh VW, Fang GH, Dumont D, Breitman M, Alitalo K (1995) Экспрессия гена fms-подобной тирозинкиназы 4 становится ограниченной лимфатическим эндотелием во время развития. Proc Natl Acad Sci USA 92(8):3566–3570

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Partanen TA, Arola J, Saaristo A, Jussila L, Ora A, Miettinen M, Stacker SA, Achen MG, Alitalo K (2000) Экспрессия VEGF-C и VEGF-D в нейроэндокринных клетках и их рецептор, VEGFR- 3, в фенестрированных кровеносных сосудах тканей человека.FASEB J 14 (13): 2087–2096. doi: 10.1096/fj.99-1049com

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Wigle JT, Oliver G (1999) Функция Prox1 необходима для развития лимфатической системы мышей. Cell 98(6):769–778

    PubMed Статья КАС Google ученый

  • Hong YK, Foreman K, Shin JW, Hirakawa S, Curry CL, Sage DR, Libermann T, Dezube BJ, Fingeroth JD, Detmar M (2004)Лимфатическое перепрограммирование эндотелия кровеносных сосудов с помощью вируса герпеса, связанного с саркомой Капоши.Нат Жене 36(7):683–685

    PubMed Статья КАС Google ученый

  • Banerji S, Ni J, Wang SX, Clasper S, Su J, Tammi R, Jones M, Jackson DG (1999) LYVE-1, новый гомолог гликопротеина CD44, является лимфоспецифическим рецептором гиалуроновой кислоты. . J Cell Biol 144(4):789–801

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Гейл Н.В., Прево Р., Эспиноса Дж., Фергюсон Д.Дж., Домингес М.Г., Янкопулос Г.Д., Терстон Г., Джексон Д.Г. (2007)Нормальное развитие и функция лимфатической системы у мышей с дефицитом лимфатического рецептора гиалуроновой кислоты LYVE-1.Mol Cell Biol 27 (2): 595–604. дои: 10.1128/MCB.01503-06

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Makinen T, Adams RH, Bailey J, Lu Q, Ziemiecki A, Alitalo K, Klein R, Wilkinson GA (2005) Сайт взаимодействия PDZ в эфрине B2 необходим для ремоделирования лимфатической сосудистой сети. Гены Дев 19 (3): 397–410. doi: 10.1101 / gad.330105

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Mouta Carreira C, Nasser SM, di Tomaso E, Padera TP, Boucher Y, Tomarev SI, Jain RK (2001) LYVE-1 не ограничивается лимфатическими сосудами: экспрессия в нормальных синусоидах крови печени и подавление при раке и циррозе печени человека.Рак Res 61 (22): 8079–8084

    PubMed КАС Google ученый

  • Брейтенедер-Гелефф С., Солейман А., Ковальски Х., Хорват Р., Аманн Г., Крихубер Э., Дием К., Венингер В., Чахлер Э., Алитало К., Керяшки Д. (1999) Ангиосаркомы экспрессируют смешанные эндотелиальные фенотипы крови и лимфатической системы. капилляры: подопланин как специфический маркер лимфатического эндотелия. Ам Дж. Патол 154 (2): 385–394. дои: 10.1016/S0002-9440(10)65285-6

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Schacht V, Ramirez MI, Hong YK, Hirakawa S, Feng D, Harvey N, Williams M, Dvorak AM, Dvorak HF, Oliver G, Detmar M (2003) Дефицит T1-альфа/подопланина нарушает нормальное формирование лимфатических сосудов и вызывает лимфедема.EMBO J 22 (14): 3546–3556. дои: 10.1093/emboj/cdg342

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый (2008) ) Лимфатические преколлекторы содержат новую, специализированную субпопуляцию лимфатических эндотелиальных клеток с низким содержанием подопланина, экспрессирующих CCL27.Ам Дж. Патол 173 (4): 1202–1209. дои: 10.2353/ajpath.2008.080101

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Hamrah P, Chen L, Zhang Q, Dana MR (2003) Новая экспрессия рецептора фактора роста эндотелия сосудов (VEGFR)-3 и VEGF-C на дендритных клетках роговицы. Ам Дж. Патол 163 (1): 57–68. дои: 10.1016/S0002-9440(10)63630-9

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Cursiefen C, Chen L, Saint-Geniez M, Hamrah P, Jin Y, Rashid S, Pytowski B, Persaud K, Wu Y, Streilein JW, Dana R (2006) Экспрессия неваскулярного рецептора VEGF 3 эпителием роговицы поддерживается аваскуляризация и зрение.Proc Natl Acad Sci U S A 103(30):11405–11410. doi:10.1073/pnas.0506112103

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Burke Z, Oliver G (2002) Prox1 является ранним специфическим маркером для развивающихся печени и поджелудочной железы в энтодерме передней кишки млекопитающих. Mech Dev 118 (1–2): 147–155

    PubMed Статья КАС Google ученый

  • Lavado A, Oliver G (2007) Паттерны экспрессии Prox1 в мозге развивающихся и взрослых мышей.Дев Дин 236 (2): 518–524. дои: 10.1002/dvdy.21024

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Галеева А., Треутер Э., Томарев С., Пелто-Хуикко М. (2007) Связанный с просперо гомеобоксный ген Prox-1 экспрессируется во время постнатального развития мозга, а также в мозге взрослых грызунов. Неврология 146 (2): 604–616. doi:10.1016/j.neuroscience.2007.02.002

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Chen L, Cursiefen C, Barabino S, Zhang Q, Dana MR (2005)Новая экспрессия и характеристика эндотелиального гиалуронатного рецептора 1 лимфатических сосудов (LYVE-1) клетками конъюнктивы.Invest Ophthalmol Vis Sci 46(12):4536–4540. doi:10.1167/iovs.05-0975

    Центральный пабмед пабмед Статья Google ученый

  • Cho CH, Koh YJ, Han J, Sung HK, Jong Lee H, Morisada T, Schwendener RA, Brekken RA, Kang G, Oike Y, Choi TS, Suda T, Yoo OJ, Koh GY (2007) Ангиогенный роль LYVE-1-позитивных макрофагов в жировой ткани. Циркуляр Рез. 100 (4): e47–e57. doi:10.1161/01.RES.0000259564.92792.93

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Schledzewski K, Falkowski M, Moldenhauer G, Metharom P, Kzhyshkowska J, Ganss R, Demory A, Falkowska-Hansen B, Kurzen H, Ugurel S, Geginat G, Arnold B, Goerdt S (2006) Лимфатический эндотелий- специфический рецептор гиалуроновой кислоты LYVE-1 экспрессируется макрофагами stabilin-1+, F4/80+, CD11b+ в злокачественных опухолях и ранозаживляющих тканях in vivo и в культурах костного мозга in vitro: значение для оценки лимфангиогенеза.Дж. Патол 209 (1): 67–77. дои: 10.1002/path.1942

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Williams MC, Cao Y, Hinds A, Rishi AK, Wetterwald A (1996) Белок T1 альфа регулируется в процессе развития и экспрессируется клетками альвеолярного типа I, сосудистыми сплетениями и цилиарным эпителием взрослых крыс. Am J Respir Cell Mol Biol 14(6):577–585. дои: 10.1165/ajrcmb.14.6.8652186

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kaji C, Tomooka M, Kato Y, Kojima H, Sawa Y (2012) Экспрессия подопланина и классических кадгеринов в мозге мыши.Дж Анат 220 (5): 435–446. doi:10.1111/j.1469-7580.2012.01484.x

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Ramirez MI, Millien G, Hinds A, Cao Y, Seldin DC, Williams MC (2003) T1alpha, ген дифференцировки клеток легких I типа, необходим для нормальной пролиферации клеток легких и формирования альвеол при рождении. Dev Biol 256(1):61–72

    PubMed Статья КАС Google ученый

  • Bekiaris V, Withers D, Glanville SH, McConnell FM, Parnell SM, Kim MY, Gaspal FM, Jenkinson E, Sweet C, Anderson G, Lane PJ (2007) Роль CD30 в сегрегации B/T в селезенке .J Immunol 179(11):7535–7543

    PubMed Статья КАС Google ученый (2012) Транскрипционное профилирование стромы воспаленных и покоящихся лимфатических узлов определяет иммунологические признаки. Нат Иммунол 13(5):499–510. дои: 10.1038/ni.2262

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Hou TZ, Bystrom J, Sherlock JP, Qureshi O, Parnell SM, Anderson G, Gilroy DW, Buckley CD (2010) Отдельное подмножество подопланина (gp38), экспрессирующее макрофаги F4/80+, опосредует фагоцитоз и индуцируется после зимозановый перитонит.FEBS Lett 584 (18): 3955–3961. doi:10.1016/j.febslet.2010.07.053

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Керриган А.М., Наварро-Нуньес Л., Пиз Э., Финни Б.А., Уиллмент Дж.А., Уотсон С.П., Браун Г.Д. (2012)Подопланин-экспрессирующие воспалительные макрофаги активируют мышиные тромбоциты через CLEC-2. Дж. Тромб Хемост 10 (3): 484–486. doi:10.1111/j.1538-7836.2011.04614.x

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Peters A, Pitcher LA, Sullivan JM, Mitsdoerffer M, Acton SE, Franz B, Wucherpfennig K, Turley S, Carroll MC, Sobel RA, Bettelli E, Kuchroo VK (2011) Клетки Th27 индуцируют эктопические лимфоидные фолликулы в центральной воспаление тканей нервной системы.Иммунитет 35(6):986–996. doi:10.1016/j.immuni.2011.10.015

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Fujii T, Zen Y, Sato Y, Sasaki M, Enomae M, Minato H, Masuda S, Uehara T, Katsuyama T, Nakanuma Y (2008) Подопланин является полезным диагностическим маркером эпителиоидной гемангиоэндотелиомы печени. Мод Патол 21 (2): 125–130. doi: 10.1038/modpathol.3800986

    ПабМед КАС Google ученый

  • Baluk P, McDonald DM (2008)Маркеры для микроскопической визуализации лимфангиогенеза и ангиогенеза.Ann NY Acad Sci 1131: 1–12. doi: 10.1196 / летопись 1413.001

    ПабМед Статья Google ученый

  • Clasper S, Royston D, Baban D, Cao Y, Ewers S, Butz S, Vestweber D, Jackson DG (2008) Новый профиль экспрессии генов в лимфатических сосудах, связанный с ростом опухоли и узловым метастазированием. Рак Рез. 68 (18): 7293–7303. дои: 10.1158/0008-5472.CAN-07-6506

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Groger M, Loewe R, Holnthoner W, Embacher R, Pillinger M, Herron GS, Wolff K, Petzelbauer P (2004) IL-3 индуцирует экспрессию лимфатических маркеров Prox-1 и подопланина в эндотелиальных клетках человека.J Immunol 173(12):7161–7169

    PubMed Статья Google ученый (2005) Патогенез стойкой гиперплазии лимфатических сосудов при хроническом воспалении дыхательных путей. J Clin Invest 115 (2): 247–257. дои: 10.1172/JCI22037

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Джонсон Л.А., Прево Р., Класпер С., Джексон Д.Г. (2007)Вызванное воспалением поглощение и деградация лимфатического эндотелиального рецептора гиалуроновой кислоты LYVE-1.J Biol Chem 282(46):33671–33680. дои: 10.1074/jbc.M702889200

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Vigl B, Aebischer D, Nitschke M, Iolyeva M, Rothlin T, Antsiferova O, Halin C (2011)Воспаление тканей модулирует экспрессию генов лимфатических эндотелиальных клеток и миграцию дендритных клеток в зависимости от стимула. Кровь 118 (1): 205–215. дои: 10.1182 / кровь-2010-12-326447

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Huggenberger R, Siddiqui SS, Brander D, Ullmann S, Zimmermann K, Antsiferova M, Werner S, Alitalo K, Detmar M (2011)Важная роль активации лимфатических сосудов в ограничении острого воспаления.Кровь 117 (17): 4667–4678. дои: 10.1182 / кровь-2010-10-316356

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Flister MJ, Wilber A, Hall KL, Iwata C, Miyazono K, Nisato RE, Pepper MS, Zawieja DC, Ran S (2010) Воспаление индуцирует лимфангиогенез посредством повышающей регуляции VEGFR-3, опосредованной NF-kappaB и Прокс1. Кровь 115 (2): 418–429. дои: 10.1182/кровь-2008-12-196840

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Proulx ST, Luciani P, Dieterich LC, Karaman S, Leroux JC, Detmar M (2013)Расширение лимфатических сосудов при раке и воспалении: новые возможности для визуализации in vivo и доставки лекарств.J Управление выпуском. doi: 10.1016/j.jconrel.2013.04.027

    ПабМед Google ученый

  • Kunstfeld R, Hirakawa S, Hong YK, Schacht V, Lange-Asschenfeldt B, Velasco P, Lin C, Fiebiger E, Wei X, Wu Y, Hicklin D, Bohlen P, Detmar M (2004) Индукция кожных Реакции гиперчувствительности замедленного типа у мышей, трансгенных по VEGF-A, приводят к хроническому воспалению кожи, связанному со стойкой лимфатической гиперплазией.Кровь 104 (4): 1048–1057. дои: 10.1182 / кровь-2003-08-2964

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Zhang Q, Lu Y, Proulx ST, Guo R, Yao Z, Schwarz EM, Boyce BF, Xing L (2007)Увеличение лимфангиогенеза в суставах мышей с воспалительным артритом. Резистентность к артриту Ther 9(6):R118. дои: 10.1186/ar2326

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Xu H, Edwards J, Banerji S, Prevo R, Jackson DG, Athanasou NA (2003)Распределение лимфатических сосудов в нормальных и артритных синовиальных тканях человека.Энн Реум Дис 62(12):1227–1229

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Shi J, Liang Q, Wang Y, Mooney R, Boyce B, Xing L (2012) Использование системы визуализации всего предметного стекла для оценки наличия и изменения лимфатических сосудов в срезах суставов мышей с артритом. Биотехнологический гистохим. дои: 10.3109/10520295.2012.729864

    Центральный пабмед Google ученый

  • Shi VY, Bao L, Chan LS (2012)Вызванный воспалением дермальный лимфангиогенез при атопическом дерматите связан с рекрутированием макрофагов CD11b+ и активацией VEGF-C в модели IL-4-трансгенных мышей.Микроциркуляция 19(7):567–579. doi:10.1111/j.1549-8719.2012.00189.x

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Александр Дж.С., Чайтанья Г.В., Гришам М.Б., Боктор М. (2010) Новые роли лимфатических сосудов при воспалительных заболеваниях кишечника. Ann NY Acad Sci 1207 (Приложение 1): E75–E85. doi:10.1111/j.1749-6632.2010.05757.x

    ПабМед Статья Google ученый

  • Jurisic G, Sundberg JP, Bleich A, Leiter EH, Broman KW, Buechler G, Alley L, Vestweber D, Detmar M (2010)Количественный анализ признаков лимфатических сосудов предлагает Vcam1 в качестве гена-кандидата-модификатора воспалительного заболевания кишечника.Гены Иммун 11 (3): 219–231. doi: 10.1038 / ген.2010.4

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Nagy JA, Vasile E, Feng D, Sundberg C, Brown LF, Detmar MJ, Lawitts JA, Benjamin L, Tan X, Manseau EJ, Dvorak AM, Dvorak HF (2002) Фактор проницаемости сосудов/фактор роста эндотелия сосудов индуцирует лимфангиогенез, а также ангиогенез. J Exp Med 196(11):1497–1506

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Mumprecht V, Roudnicky F, Detmar M (2012) Индуцированный воспалением лимфангиогенез лимфатических узлов обратим.Ам Дж. Патол 180 (3): 874–879. doi: 10.1016 / j.ajpath.2011.11.010

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Келли П.М., Коннер А.Л., Темперо Р.М. (2013) Память лимфатических сосудов, стимулированная рецидивирующим воспалением. Ам Джей Патол. doi: 10.1016 / j.ajpath.2013.02.025

    Google ученый

  • Hirakawa S, Kodama S, Kunstfeld R, Kajiya K, Brown LF, Detmar M (2005) VEGF-A индуцирует лимфангиогенез опухоли и сигнальных лимфатических узлов и способствует лимфатическому метастазированию.J Exp Med 201 (7): 1089–1099. doi: 10.1084/jem.20041896

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Angeli V, Ginhoux F, Llodra J, Quemeneur L, Frenette PS, Skobe M, Jessberger R, Merad M, Randolph GJ (2006)В-клеточный лимфангиогенез в воспаленных лимфатических узлах усиливает мобилизацию дендритных клеток. Иммунитет 24(2):203–215. doi:10.1016/j.immuni.2006.01.003

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Halin C, Tobler NE, Vigl B, Brown LF, Detmar M (2007) VEGF-A, продуцируемый хронически воспаленной тканью, индуцирует лимфангиогенез в дренирующих лимфатических узлах.Кровь 110 (9): 3158–3167. дои: 10.1182 / кровь-2007-01-066811

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Kataru RP, Jung K, Jang C, Yang H, Schwendener RA, Baik JE, Han SH, Alitalo K, Koh GY (2009) Критическая роль макрофагов CD11b+ и VEGF в воспалительном лимфангиогенезе, клиренсе антигена и разрешении воспаления . Кровь 113 (22): 5650–5659. дои: 10.1182 / кровь-2008-09-176776

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kataru RP, Kim H, Jang C, Choi DK, Koh BI, Kim M, Gollamudi S, Kim YK, Lee SH, Koh GY (2011) Т-лимфоциты негативно регулируют образование лимфатических узлов в лимфатических узлах.Иммунитет 34(1):96–107. doi:10.1016/j.immuni.2010.12.016

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Hong YK, Lange-Asschenfeldt B, Velasco P, Hirakawa S, Kunstfeld R, Brown LF, Bohlen P, Senger DR, Detmar M (2004) VEGF-A способствует формированию лимфатических сосудов, связанных с восстановлением тканей, посредством VEGFR-2 и интегрины альфа1бета1 и альфа2бета1. FASEB J 18(10):1111–1113

    PubMed КАС Google ученый

  • Huggenberger R, Ullmann S, Proulx ST, Pytowski B, Alitalo K, Detmar M (2010)Стимуляция лимфангиогенеза с помощью VEGFR-3 ингибирует хроническое воспаление кожи.J Exp Med 207 (10): 2255–2269. doi: 10.1084/jem.20100559

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Forsythe JA, Jiang BH, Iyer NV, Agani F, Leung SW, Koos RD, Semenza GL (1996) Активация транскрипции гена сосудистого эндотелиального фактора роста с помощью индуцируемого гипоксией фактора 1. Mol Cell Biol 16(9): 4604–4613

    Центральный пабмед пабмед КАС Google ученый

  • Гейл Н.В., Терстон Г., Хакетт С.Ф., Ренард Р., Ван К., Макклейн Дж., Мартин С., Витте С., Витте М.Х., Джексон Д., Сури С., Кампокиаро П.А., Виганд С.Дж., Янкопулос Г.Д. (2002) Ангиопоэтин- 2 необходим для постнатального ангиогенеза и формирования лимфатического паттерна, и только последнюю роль выполняет ангиопоэтин-1.Dev Cell 3(3):411–423

    PubMed Статья КАС Google ученый

  • Morisada T, Oike Y, Yamada Y, Urano T, Akao M, Kubota Y, Maekawa H, Kimura Y, Ohmura M, Miyamoto T, Nozawa S, Koh GY, Alitalo K, Suda T (2005) Angiopoietin- 1 способствует образованию LYVE-1-позитивных лимфатических сосудов. Кровь 105 (12): 4649–4656. дои: 10.1182 / кровь-2004-08-3382

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Chang LK, Garcia-Cardena G, Farnebo F, Fannon M, Chen EJ, Butterfield C, Moses MA, Mulligan RC, Folkman J, Kaipainen A (2004) Дозозависимый ответ FGF-2 на лимфангиогенез.Proc Natl Acad Sci U S A 101(32):11658–11663. doi:10.1073/pnas.0404272101

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Shin JW, Min M, Larrieu-Lahargue F, Canron X, Kunstfeld R, Nguyen L, Henderson JE, Bikfalvi A, Detmar M, Hong YK (2006) Prox1 способствует специфичной для линии экспрессии фактора роста фибробластов (FGF). ) рецептор-3 в лимфатическом эндотелии: роль передачи сигналов FGF в лимфангиогенезе.Mol Biol Cell 17 (2): 576–584. doi: 10.1091/mbc.E05-04-0368

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Kajiya K, Hirakawa S, Ma B, Drinnenberg I, Detmar M (2005) Фактор роста гепатоцитов способствует формированию и функционированию лимфатических сосудов. EMBO J 24 (16): 2885–2895. doi:10.1038/sj.emboj.7600763

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Cao R, Bjorndahl MA, Religa P, Clasper S, Garvin S, Galter D, Meister B, Ikomi F, Tritsaris K, Dissing S, Ohhashi T, Jackson DG, Cao Y (2004) PDGF-BB индуцирует внутриопухолевое лимфангиогенез и способствует лимфатическому метастазированию.Раковая ячейка 6 (4): 333–345. doi: 10.1016/j.ccr.2004.08.034

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Bjorndahl M, Cao R, Nissen LJ, Clasper S, Johnson LA, Xue Y, Zhou Z, Jackson D, Hansen AJ, Cao Y (2005) Инсулиноподобные факторы роста 1 и 2 индуцируют лимфангиогенез in vivo. Proc Natl Acad Sci U S A 102(43):15593–15598. doi: 10.1073/pnas.0507865102

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Kang S, Lee SP, Kim KE, Kim HZ, Memet S, Koh GY (2009) Toll-подобный рецептор 4 в лимфатических эндотелиальных клетках способствует индуцированному LPS лимфангиогенезу путем хемотаксического рекрутирования макрофагов.Кровь 113 (11): 2605–2613. дои: 10.1182 / кровь-2008-07-166934

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kim KE, Koh YJ, Jeon BH, Jang C, Han J, Kataru RP, Schwendener RA, Kim JM, Koh GY (2009) Роль макрофагов CD11b+ во внутрибрюшинном индуцированном липополисахаридами аберрантном лимфангиогенезе и лимфатической функции в диафрагме . Ам Дж. Патол 175 (4): 1733–1745. дои: 10.2353/ajpath.2009.0

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Baluk P, Hogmalm A, Bry M, Alitalo K, Bry K, McDonald DM (2013)Трансгенная сверхэкспрессия интерлейкина-1бета индуцирует стойкий лимфангиогенез, но не ангиогенез в дыхательных путях мышей.Ам Дж. Патол 182 (4): 1434–1447. doi: 10.1016/j.ajpath.2012.12.003

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Ватари К., Накао С., Фотовати А., Басаки Й., Хосой Ф., Берецки Б., Хигучи Р., Миямото Т., Кувано М., Оно М. (2008) Роль макрофагов в воспалительном лимфангиогенезе: усиленное производство фактора роста эндотелия сосудов C и D через активацию NF-kappaB. Biochem Biophys Res Commun 377 (3): 826–831.doi: 10.1016/j.bbrc.2008.10.077

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kubota Y, Takubo K, Shimizu T, Ohno H, Kishi K, Shibuya M, Saya H, Suda T (2009) Ингибирование M-CSF избирательно нацелено на патологический ангиогенез и лимфангиогенез. J Exp Med 206 (5): 1089–1102. doi: 10.1084/jem.20081605

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Cha HS, Bae EK, Koh JH, Chai JY, Jeon CH, Ahn KS, Kim J, Koh EM (2007) Фактор некроза опухоли-альфа индуцирует экспрессию сосудистого эндотелиального фактора роста-C в ревматоидных синовиоцитах.J Rheumatol 34(1):16–19

    PubMed Google ученый

  • Чайтанья Г.В., Фрэнкс С.Е., Кромер В., Уэллс С.Р., Бьенковска М., Дженнингс М.Х., Радделл А., Андо Т., Ван Ю, Гу И, Сапп М., Матис Дж.М., Джордан П.А., Минагар А., Александр Дж.С. (2010 г. ) Дифференциальные ответы цитокинов в лимфатических эндотелиальных клетках человека и мыши на цитокины in vitro. Lymphat Res Biol 8 (3): 155–164. doi:10.1089/lrb 2010.0004

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Kajiya K, Hirakawa S, Detmar M (2006) Фактор роста эндотелия сосудов-A опосредует индуцированное ультрафиолетом B нарушение функции лимфатических сосудов.Ам Дж. Патол 169 (4): 1496–1503. дои: 10.2353/ajpath.2006.060197

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Zhou Q, Wood R, Schwarz EM, Wang YJ, Xing L (2010)Визуализация лимфатических сосудов в ближнем инфракрасном диапазоне демонстрирует динамику лимфотока и лимфангиогенеза во время острой и хронической фаз артрита у мышей. Артрит Реум 62 (7): 1881–1889. дои: 10.1002/арт.27464

    Центральный пабмед пабмед Google ученый

  • Zhou Q, Guo R, Wood R, Boyce BF, Liang Q, Wang YJ, Schwarz EM, Xing L (2011)Фактор роста эндотелия сосудов C ослабляет повреждение суставов при хроническом воспалительном артрите за счет ускорения местного лимфодренажа у мышей.Артрит Реум 63 (8): 2318–2328. дои: 10.1002/арт.30421

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Guo R, Zhou Q, Proulx ST, Wood R, Ji RC, Ritchlin CT, Pytowski B, Zhu Z, Wang YJ, Schwarz EM, Xing L (2009) Ингибирование лимфангиогенеза и лимфодренажа с помощью фактора роста эндотелия сосудов Блокада рецептора 3 увеличивает тяжесть воспаления в мышиной модели хронического воспалительного артрита.Ревматический артрит 60 (9): 2666–2676. дои: 10.1002/арт.24764

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Xia YP, Li B, Hylton D, Detmar M, Yancopoulos GD, Rudge JS (2003) Трансгенная доставка VEGF на кожу мыши приводит к воспалительному состоянию, напоминающему псориаз человека. Кровь 102 (1): 161–168. дои: 10.1182 / кровь-2002-12-3793

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Hirakawa S, Fujii S, Kajiya K, Yano K, Detmar M (2005) Фактор роста эндотелия сосудов повышает чувствительность к ультрафиолетовому B-индуцированному фотоповреждению кожи.Кровь 105 (6): 2392–2399. дои: 10.1182 / кровь-2004-06-2435

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kajiya K, Sawane M, Huggenberger R, Detmar M (2009) Активация пути VEGFR-3 с помощью VEGF-C ослабляет вызванное УФВ образование отека и воспаление кожи, способствуя лимфангиогенезу. J Invest Dermatol 129(5):1292–1298. дои: 10.1038 / jid.2008.351

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kajiya K, Detmar M (2006) Важная роль лимфатических сосудов в контроле образования отеков и воспалений, вызванных УФ-В.J Invest Dermatol 126(4):919–921. дои: 10.1038/sj.jid.5700126

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Jurisic G, Sundberg JP, Detmar M (2013) Блокада рецептора VEGF-3 усугубляет воспалительное заболевание кишечника и увеличение лимфатических сосудов. Воспаление кишечника 19:1983–1989

    PubMed Google ученый

  • Tewalt EF, Cohen JN, Rouhani SJ, Engelhard VH (2012)Лимфатические эндотелиальные клетки — ключевые игроки в регуляции толерантности и иммунитета.Фронт Иммунол 3:305. doi: 10.3389/fimmu.2012.00305

    Центральный пабмед пабмед Статья Google ученый (2013) функция и экспрессия D6 на лимфатических эндотелиальных клетках. Кровь. дои: 10.1182 / кровь-2012-04-425314

    ПабМед Google ученый

  • Ветрано С., Боррони Э.М., Сарухан А., Савино Б., Бонекки Р., Корреале С., Арена В., Фантини М., Ронкалли М., Малески А., Мантовани А., Локати М., Данезе С. (2010) Лимфатическая система контролирует кишечник воспаление и связанный с воспалением рак толстой кишки через хемокиновый рецептор-приманку D6.Гут 59 (2): 197–206. doi: 10.1136/gut.2009.183772

    ПабМед Статья Google ученый

  • Cyster JG, Schwab SR (2012)Сфингозин-1-фосфат и выход лимфоцитов из лимфоидных органов. Annu Rev Immunol 30: 69–94. doi:10.1146/annurev-иммунол-020711-075011

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Tan KW, Yeo KP, Wong FH, Lim HY, Khoo KL, Abastado JP, Angeli V (2012) Расширение кортикальных и медуллярных синусов сдерживает гипертрофию лимфатических узлов при длительном воспалении.J Immunol 188(8):4065–4080. doi: 10.4049/jиммунол.1101854

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Хан О., Хедли М., Джерард А., Вей В., Лю Л., Круммель М.Ф. (2011) Регуляция примирования Т-клеток лимфоидной стромой. ПЛОС ОДИН 6(11):e26138. doi:10.1371/journal.pone.0026138

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Lukacs-Kornek V, Malhotra D, Fletcher AL, Acton SE, Elpek KG, Tayalia P, Collier AR, Turley SJ (2011) Регулируемое высвобождение оксида азота некроветворной стромой контролирует расширение пула активированных Т-клеток в лимфе. узлы.Нат Иммунол 12(11):1096–1104. дои: 10.1038/ni.2112

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Podgrabinska S, Kamalu O, Mayer L, Shimaoka M, Snoeck H, Randolph GJ, Skobe M (2009) Воспаленный лимфатический эндотелий подавляет созревание и функцию дендритных клеток посредством Mac-1/ICAM-1-зависимого механизма. J Immunol 183 (3): 1767–1779. doi: 10.4049/jиммунол.0802167

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Cohen JN, Guidi CJ, Tewalt EF, Qiao H, Rouhani SJ, Ruddell A, Farr AG, Tung KS, Engelhard VH (2010) Лимфатические эндотелиальные клетки, резидентные в лимфатических узлах, опосредуют периферическую толерантность посредством Aire-независимой прямой презентации антигена .J Exp Med 207 (4): 681–688. doi:10.1084/jem.200

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Fletcher AL, Lukacs-Kornek V, Reynoso ED, Pinner SE, Bellemare-Pelletier A, Curry MS, Collier AR, Boyd RL, Turley SJ (2010)Фибробластные ретикулярные клетки лимфатических узлов непосредственно представляют антиген периферической ткани при устойчивом состояния и воспалительные процессы. J Exp Med 207 (4): 689–697.doi:10.1084/jem.200

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Tewalt EF, Cohen JN, Rouhani SJ, Guidi CJ, Qiao H, Fahl SP, Conaway MR, Bender TP, Tung KS, Vella AT, Adler AJ, Chen L, Engelhard VH (2012) Лимфатические эндотелиальные клетки вызывают толерантность через PD-L1 и отсутствие костимуляции, что приводит к высокому уровню экспрессии PD-1 на Т-клетках CD8. Кровь 120 (24): 4772–4782. дои: 10.1182/кровь-2012-04-427013

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Алитало А., Детмар М. (2012) Взаимодействие опухолевых клеток и лимфатических сосудов при прогрессировании рака. Онкоген 31(42):4499–4508. doi: 10.1038/onc.2011.602

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Shimizu Y, Shibata R, Shintani S, Ishii M, Murohara T (2012)Терапевтический лимфангиогенез с имплантацией регенеративных клеток, полученных из жировой ткани.J Am Heart Assoc 1 (4): e000877. дои: 10.1161/JAHA.112.000877

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Чхве И., Ли Ю.С., Чанг Х.К., Чой Д., Экоффье Т., Ли Х.Н., Ким К.Е., Ли С., Парк Е.К., Мэнг Ю.С., Ким Н.Ю., Ладнер Р.Д., Петасис Н.А., Кох СиДжей, Чен Л., Ленц HJ, Hong YK (2013)Интерлейкин-8 уменьшает образование послеоперационной лимфедемы, способствуя регенерации лимфатических сосудов. Ангиогенез 16(1):29–44.doi: 10.1007/s10456-012-9297-6

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Чхве И, Ли С, Кён Чунг Х, Сук Ли И, Ый Ким К, Чхве Д, Пак Э.К., Ян Д, Экоффье Т, Монахан Дж, Чен В, Агилар Б, Ли ХН, Ю Дж, Кох CJ, Chen L, Wong AK, Hong YK (2012) 9-цис-ретиноевая кислота способствует лимфангиогенезу и усиливает регенерацию лимфатических сосудов: терапевтические последствия 9-цис-ретиноевой кислоты при вторичной лимфедеме.Тираж 125 (7): 872–882. doi: 10.1161 / РАСПРОСТРАНЕНИЕ AHA.111.030296

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Марино Д., Дабурас В., Брандли А.В., Детмар М. (2011)Роль полностью транс-ретиноевой кислоты на ранних этапах развития лимфатических сосудов. J Vasc Res 48: 236–251

    PubMed Central пабмед Статья КАС Google ученый

  • Iwata C, Kano MR, Komuro A, Oka M, Kiyono K, Johansson E, Morishita Y, Yashiro M, Hirakawa K, Kaminishi M, Miyazono K (2007) Ингибирование циклооксигеназы-2 подавляет метастазирование в лимфатические узлы за счет уменьшения лимфангиогенеза.Рак Рез. 67 (21): 10181–10189. дои: 10.1158/0008-5472.CAN-07-2366

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kashiwagi S, Hosono K, Suzuki T, Takeda A, Uchinuma E, Majima M (2011) Роль ЦОГ-2 в лимфангиогенезе и восстановлении лимфатического потока при вторичной лимфедеме. Лаборатория Инвест 91 (9): 1314–1325. doi:10.1038/лабинвест.2011.84

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Карнезис Т., Шаян Р., Цезарь С., Руфайл С., Харрис Н.К., Ардипраджа К., Чжан Ю.Ф., Уильямс С.П., Фарнсворт Р.Х., Чай М.Г., Рупасингх Т.В., Талл Д.Л., Болдуин М.Э., Слоан Э.К., Фокс С.Б., Ахен MG, Stacker SA (2012) VEGF-D способствует метастазированию опухоли, регулируя простагландины, продуцируемые собирающим лимфатическим эндотелием.Раковая ячейка 21 (2): 181–195. doi: 10.1016/j.ccr.2011.12.026

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Yao LC, Baluk P, Feng J, McDonald DM (2010) Устойчивое к стероидам лимфатическое ремоделирование в хронически воспаленных дыхательных путях мышей. Ам Дж. Патол 176 (3): 1525–1541. дои: 10.2353/ajpath.2010.0

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Steele MM, Kelley PM, Schieler AM, Tempero RM (2011)Глюкокортикоиды подавляют лимфангиогенез роговицы.Роговица 30 (12): 1442–1447. doi: 10.1097/ICO.0b013e318213f39f

    ПабМед Статья Google ученый

  • Hos D, Saban DR, Bock F, Regenfuss B, Onderka J, Masli S, Cursiefen C (2011)Подавление воспалительного лимфангиогенеза роговицы путем применения местных кортикостероидов. Arch Ophthalmol 129 (4): 445–452. doi:10.1001/архофтальмол.2011.42

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Yano A, Fujii Y, Iwai A, Kawakami S, Kageyama Y, Kihara K (2006)Глюкокортикоиды подавляют опухолевый лимфангиогенез клеток рака предстательной железы.Clin Cancer Res 12 (20 Pt 1): 6012–6017. дои: 10.1158/1078-0432.CCR-06-0749

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Оканобо А., Чаухан С.К., Дастьерди М.Х., Кодати С., Дана Р. (2012)Эффективность местной блокады интерлейкина-1 при экспериментальной болезни сухого глаза. Am J Офтальмол 154 (1): 63–71. doi: 10.1016 / j.ajo.2012.01.034

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Shinriki S, Jono H, Ueda M, Ota K, Ota T, Sueyoshi T, Oike Y, Ibusuki M, Hiraki A, Nakayama H, Shinohara M, Ando Y (2011) Передача сигналов интерлейкина-6 регулирует рост эндотелия сосудов Синтез фактора С и лимфангиогенез при плоскоклеточной карциноме полости рта человека.Дж. Патол 225 (1): 142–150. дои: 10.1002/путь.2935

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Польцер К., Баетен Д., Солейман А., Дистлер Дж., Герлаг Д.М., Так П.П., Шетт Г., Зверина Дж. (2008)Блокада фактора некроза опухоли увеличивает лимфангиогенез в артритных суставах мыши и человека. Энн Реум Дис 67 (11): 1610–1616. doi: 10.1136/ard.2007.083394

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Schulz MM, Reisen F, Zgraggen S, Fischer S, Yuen D, Kang GJ, Chen L, Schneider G, Detmar M (2012) Скрининг химической библиотеки с высоким содержанием на основе фенотипа идентифицирует статины как ингибиторы лимфангиогенеза in vivo .Proc Natl Acad Sci USA 109(40):E2665–E2674. doi:10.1073/pnas.1206036109

    Центральный пабмед пабмед Статья Google ученый

  • Baluk P, Yao LC, Feng J, Romano T, Jung SS, Schreiter JL, Yan L, Shealy DJ, McDonald DM (2009) ФНО-альфа стимулирует ремоделирование кровеносных сосудов и лимфатических сосудов при устойчивом воспалении дыхательных путей у мышей. J Clin Invest 119 (10): 2954–2964. дои: 10.1172/JCI37626

    Центральный пабмед пабмед КАС Google ученый

  • Fiorentini S, Luganini A, Dell’Oste V, Lorusso B, Cervi E, Caccuri F, Bonardelli S, Landolfo S, Caruso A, Gribaudo G (2011) Цитомегаловирус человека продуктивно инфицирует лимфатические эндотелиальные клетки и индуцирует секретом, который способствует ангиогенезу и лимфангиогенезу через интерлейкин-6 и гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор.J Gen Virol 92 (Pt 3): 650–660. doi:10.1099/vir.0.025395-0

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Chen X, Xie Q, Cheng X, Diao X, Cheng Y, Liu J, Xie W, Chen Z, Zhu B (2010) Роль интерлейкина-17 в лимфангиогенезе при немелкоклеточном раке легкого: усиление производство сосудистого эндотелиального фактора роста С в клетках немелкоклеточной карциномы легкого. Раковые науки 101 (11): 2384–2390. дои: 10.1111 / j.1349-7006.2010.01684.х

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Chauhan SK, Jin Y, Goyal S, Lee HS, Fuchsluger TA, Lee HK, Dana R (2011) Новая пролимфангиогенная функция Th27/IL-17. Кровь 118 (17): 4630–4634. дои: 10.1182 / кровь-2011-01-332049

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Yamashita M, Iwama N, Date F, Shibata N, Miki H, Yamauchi K, Sawai T, Sato S, Takahashi T, Ono M (2009) Макрофаги участвуют в лимфангиогенезе при идиопатическом диффузном альвеолярном повреждении через сигнал CCL19-CCR7 .Хум Патол 40 (11): 1553–1563. doi:10.1016/j.humpath.2009.03.021

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Zhuo W, Jia L, Song N, Lu XA, Ding Y, Wang X, Song X, Fu Y, Luo Y (2012)Хемокиновый путь CXCL12-CXCR4: новая ось регулирует лимфангиогенез. Clin Cancer Res 18 (19): 5387–5398. дои: 10.1158/1078-0432.CCR-12-0708

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Su JL, Shih JY, Yen ML, Jeng YM, Chang CC, Hsieh CY, Wei LH, Yang PC, Kuo ML (2004) Циклооксигеназа-2 индуцирует EP1- и HER-2/Neu-зависимый рост эндотелия сосудов Активация фактора C: новый механизм лимфангиогенеза при аденокарциноме легкого.Рак Res 64 (2): 554–564

    PubMed Статья КАС Google ученый

  • Хосоно К., Судзуки Т., Тамаки Х., Сакагами Х., Хаяши И., Нарумия С., Алитало К., Мадзима М. (2011)Роли передачи сигналов рецептора простагландина E2-EP3/EP4 в усилении лимфангиогенеза во время фактора роста фибробластов. 2-индуцированное образование грануляций. Arterioscler Thromb Vasc Biol 31 (5): 1049–1058. doi: 10.1161/ATVBAHA.110.222356

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Kajiya K, Huggenberger R, Drinnenberg I, Ma B, Detmar M (2008) Оксид азота опосредует активацию лимфатических сосудов через влияние растворимой гуанилатциклазы альфа1бета1 на воспаление.FASEB J 22 (2): 530–537. doi: 10.1096/fj.07-8873com

    ПабМед Статья КАС Google ученый

  • Lahdenranta J, Hagendoorn J, Padera TP, Hoshida T, Nelson G, Kashiwagi S, Jain RK, Fukumura D (2009)Эндотелиальная синтаза оксида азота опосредует лимфангиогенез и лимфатические метастазы. Рак Res 69 (7): 2801–2808. дои: 10.1158/0008-5472.CAN-08-4051

    Центральный пабмед пабмед Статья КАС Google ученый

  • Эндогенный TNFα управляет переносом нейтрофилов в лимфатические сосуды и внутри них во время острого воспаления

  • Nemeth, T.и Моксай, А. Усиление функции нейтрофилов с обратной связью. Trends Immunol 37 , 412–424, doi: 10.1016/j.it.2016.04.002 (2016).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Mayadas, T.N., Cullere, X. & Lowell, C.A. Многогранные функции нейтрофилов. Annu Rev Pathol 9 , 181–218, doi: 10.1146/annurev-pathol-020712-164023 (2014).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Колачковска Э.& Kubes, P. Привлечение и функция нейтрофилов в норме и воспалении. Nat Rev Immunol 13 , 159–175, doi: 10.1038/nri3399 (2013).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Pillay, J. et al. Метка in vivo с помощью 2h3O показывает, что продолжительность жизни нейтрофилов человека составляет 5,4 дня. Blood 116 , 625–627, doi: 10.1182/blood-2010-01-259028 (2010).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Кобаяши С.Д., Войич Дж. М., Уитни А. Р. и ДеЛео Ф. Р. Спонтанный апоптоз нейтрофилов и регуляция выживания клеток гранулоцитарно-макрофагально-колониестимулирующим фактором. J Leukoc Biol 78 , 1408–1418, doi: 10.1189/jlb.0605289 (2005).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Coxon, A., Tang, T. & Mayadas, T. N. Цитокин-активированные эндотелиальные клетки задерживают апоптоз нейтрофилов in vitro и in vivo .Роль гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора. J Exp Med 190 , 923–934 (1999).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хачия, О. и др. Ингибирование бактериальным липополисахаридом спонтанного и TNF-альфа-индуцированного апоптоза нейтрофилов человека in vitro . Microbiol Immunol 39 , 715–723 (1995).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Уолмсли, С.Р. и др. Индуцированное гипоксией выживание нейтрофилов опосредовано HIF-1альфа-зависимой активностью NF-kappaB. J Exp Med 201 , 105–115, doi: 10.1084/jem.20040624 (2005).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Seely, A.J., Swartz, D.E., Giannias, B. & Christou, N.V. Снижение экспрессии рецепторов фактора некроза опухоли на поверхности нейтрофильных клеток, но не Fas после трансмиграции: последствия для регуляции апоптоза нейтрофилов. Arch Surg 133 , 1305–1310 (1998).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • McGettrick, H.M. et al. Хемокин- и адгезионно-зависимая выживаемость нейтрофилов после трансмиграции через цитокин-стимулированный эндотелий. J Leukoc Biol 79 , 779–788, doi: 10.1189/jlb.0605350 (2006).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хаслетт, К.Разрешение острого воспаления и роль апоптоза в тканевой судьбе гранулоцитов. Clin Sci (Лондон) 83 , 639–648 (1992).

    Артикул КАС Google ученый

  • Cox, G., Crossley, J. & Xing, Z. Поглощение макрофагами апоптотических нейтрофилов способствует разрешению острого воспаления легких in vivo . Am J Respir Cell Mol Biol 12 , 232–237, doi: 10.1165/ajrcmb.12.2.7865221 (1995).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Смит, Дж. Б., Макинтош, Г. Х. и Моррис, Б. Движение клеток через ткани: исследование периферической лимфы у овец. J Anat 107 , 87–100 (1970).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Моксай, А. Разнообразные новые функции нейтрофилов в иммунитете, воспалении и не только. J Exp Med 210 , 1283–1299, doi: 10.1084/jem.20122220 (2013).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Абади В. и др. Нейтрофилы быстро мигрируют через лимфатические сосуды после внутрикожной вакцинации БЦЖ Mycobacterium bovis и перемещают живые бациллы в дренирующие лимфатические узлы. Blood 106 , 1843–1850, doi: 10.1182/blood-2005-03-1281 (2005).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Малетто, Б.А. и др. Наличие нейтрофильного антигена в лимфоидных органах иммунных мышей. Blood 108 , 3094–3102, doi: 10.1182/blood-2006-04-016659 (2006).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Yang, C.W., Strong, B.S., Miller, M.J. & Unanue, E.R. Нейтрофилы влияют на уровень презентации антигена во время иммунного ответа на белковые антигены в адъювантах. J Immunol 185 , 2927–2934, doi: 10.4049/jimmunol.1001289 (2010).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Аби Абдалла, Д. С., Иган, С. Е., Бутчер, Б. А. и Денкерс, Е. Ю. Нейтрофилы мышей представляют собой профессиональные антигенпрезентирующие клетки, запрограммированные на инструктирование дифференцировки Т-клеток Th2 и Th27. Int Immunol 23 , 317–326, doi: 10.1093/intimm/dxr007 (2011).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Beauvillain, C. et al. Нейтрофилы эффективно перекрестно примируют наивные Т-клетки in vivo . Blood 110 , 2965–2973, doi: 10.1182/blood-2006-12-063826 (2007).

    Артикул КАС Google ученый

  • Iking-Konert, C. et al. Трансдифференцировка полиморфноядерных нейтрофилов в дендритные клетки в месте воспаления при ревматоидном артрите: свидетельство активации Т-клетками. Энн Реум Дис 64 , 1436–1442, doi: 10.1136/ard.2004.034132 (2005).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Iking-Konert, C. et al. Активация маркера дендритных клеток CD83 на полиморфноядерных нейтрофилах (PMN): дивергентная экспрессия при острых бактериальных инфекциях и хронических воспалительных заболеваниях. Clin Exp Immunol 130 , 501–508 (2002).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Черутти А., Пуга И. и Магри Г. Вспомогательная сторона нейтрофилов В-клеток. J Leukoc Biol 94 , 677–682, doi: 10.1189/jlb.1112596 (2013).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Беннуна С., Блисс С. К., Куриэль Т. Дж.и Денкерс, Э. Ю. Перекрестные помехи в системе врожденного иммунитета: нейтрофилы инструктируют рекрутирование и активацию дендритных клеток во время микробной инфекции. J Immunol 171 , 6052–6058 (2003).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Чтанова Т. и др. Динамика взаимодействий Т-клеток, антигенпрезентирующих клеток и патогенов во время ответных реакций в лимфатическом узле. Иммунитет 31 , 342–355, doi: 10.1016/j.immuni.2009.06.023 (2009).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Калабро, С. и др. Вакцинные адъюванты квасцы и MF59 индуцируют быстрое привлечение нейтрофилов и моноцитов, которые участвуют в транспорте антигена к дренирующим лимфатическим узлам. Vaccine 29 , 1812–1823, doi: 10.1016/j.vaccine.2010.12.090 (2011).

    Артикул КАС Google ученый

  • Хэмптон, Х.Р., Бейли Дж., Томура М., Бринк Р. и Чтанова Т. Микробно-зависимая лимфатическая миграция нейтрофилов модулирует пролиферацию лимфоцитов в лимфатических узлах. Nat Commun 6 , 7139, doi: 10.1038/ncomms8139 (2015).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Beauvillain, C. et al. CCR7 участвует в миграции нейтрофилов в лимфатические узлы. Кровь 117 , 1196–1204, doi: 10.1182/кровь-2009-11-254490 (2011).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Горлино, К.В. и др. Нейтрофилы проявляют различные потребности в самонаводящихся молекулах в их лимфатическом и кровяном транспорте в дренирующие лимфатические узлы. J Immunol 193 , 1966–1974, doi: 10.4049/jimmunol.1301791 (2014).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Балук П.и другие. Функционально специализированные соединения между эндотелиальными клетками лимфатических сосудов. J Exp Med 204 , 2349–2362, doi: 10.1084/jem.20062596 (2007).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Дежана Э., Орсениго Ф., Молендини К., Балук П. и Макдональд Д.М. Организация и передача сигналов эндотелиальных межклеточных соединений в различных областях кровеносных и лимфатических сосудов. Cell Tissue Res 335 , 17–25, doi: 10.1007/s00441-008-0694-5 (2009).

    Артикул Google ученый

  • Ригби, Д. А., Фергюсон, Д. Дж., Джонсон, Л. А. и Джексон, Д. Г. Нейтрофилы быстро перемещаются через воспаленный эндотелий лимфатических сосудов посредством интегрин-зависимого протеолиза и индуцированной липоксином ретракции соединения. J Leukoc Biol 98 , 897–912, doi: 10.1189/jlb.1HI0415-149R (2015).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Джонсон, Л. А. и Джексон, Д. Г. Транспорт клеток и лимфатический эндотелий. Ann NY Acad Sci 1131 , 119–133, doi: 10.1196/annals.1413.011 (2008).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ КАС пабмед Google ученый

  • Phillipson, M. et al. Внутрипросветное ползание нейтрофилов к местам эмиграции: молекулярно отличный процесс от адгезии в каскаде рекрутирования. J Exp Med 203 , 2569–2575, doi: 10.1084/jem.20060925 (2006).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Proebstl, D. et al. Перициты поддерживают ползание нейтрофильных субэндотелиальных клеток и нарушение венозных стенок in vivo . J Exp Med 209 , 1219–1234, doi: 10.1084/jem.20111622 (2012).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • де Веер, М.и другие. Рекрутирование клеток и перенос антигена в афферентную лимфу после инъекции липосом, содержащих антиген и поли(I:C), в составах на водной или масляной основе. Vaccine 31 , 1012–1018, doi: 10.1016/j.vaccine.2012.12.049 (2013).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Ерусланов Э.Б. и др. Ассоциированные с опухолью нейтрофилы стимулируют Т-клеточный ответ при раке легкого человека на ранней стадии. J Clin Invest 124 , 5466–5480, doi: 10.1172/JCI77053 (2014).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Kielian, T., Esen, N. & Bearden, E. D. Толл-подобный рецептор 2 (TLR2) играет ключевую роль в распознавании микроглией пептидогликана S. aureus, но не интактных бактерий. Glia 49 , 567–576, doi: 10.1002/glia.20144 (2005).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Стензель, В.и другие. И TLR2, и TLR4 необходимы для эффективного иммунного ответа при экспериментальном мышином абсцессе головного мозга, вызванном Staphylococcus aureus. Am J Pathol 172 , 132–145, doi: 10.2353/ajpath.2008.070567 (2008).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Йимин и др. Вклад толл-подобного рецептора 2 во врожденный ответ против инфекции Staphylococcus aureus у мышей. PLoS One 8 , e74287, doi: 10.1371/journal.pone.0074287 (2013).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Фурнье Б. и Филпотт Д. Дж. Распознавание золотистого стафилококка врожденной иммунной системой. Clin Microbiol Rev 18 , 521–540, doi: 10.1128/CMR.18.3.521-540.2005 (2005).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Гаджишенгаллис Г., Ван, М., Лян, С., Триантафилу, М. и Триантафилу, К. Индукция патогенами перекрестных помех CXCR4 / TLR2 нарушает защитную функцию хозяина. Proc Natl Acad Sci USA 105 , 13532–13537, doi: 10.1073/pnas.0803852105 (2008).

    Артикул ОБЪЯВЛЕНИЯ пабмед Google ученый

  • Kleinnijenhuis, J., Oosting, M., Joosten, L.A., Netea, M.G. & Van Crevel, R. Распознавание Mycobacterium tuberculosis врожденным иммунитетом. Clin Dev Immunol 2011 , 405310, doi: 10.1155/2011/405310 (2011).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Cui, W., Morrison, D.C. & Silverstein, R. Дифференциальная экспрессия фактора некроза опухоли альфа и высвобождение из перитонеальных мышиных макрофагов in vitro в ответ на пролиферацию грамположительных и грамотрицательных бактерий. Infect Immun 68 , 4422–4429 (2000).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Брюль Х. и др. Посттрансляционная и специфичная для типа клеток регуляция экспрессии CXCR4 цитокинами. Eur J Immunol 33 , 3028–3037, doi: 10.1002/eji.200324163 (2003).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Ким, Х.К., Ким, Дж.Э., Чанг, Дж., Хан, К. С. и Чо, Х. И. Поверхностная экспрессия нейтрофильного CXCR4 подавляется бактериальным эндотоксином. Int J Hematol 85 , 390–396, doi: 10.1532/IJH97.A30613 (2007).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Martin, C. et al. Хемокины, действующие через CXCR2 и CXCR4, контролируют высвобождение нейтрофилов из костного мозга и их возвращение после старения. Иммунитет 19 , 583–593 (2003).

    Артикул КАС Google ученый

  • Vigl, B. et al. Воспаление тканей модулирует экспрессию генов лимфатических эндотелиальных клеток и миграцию дендритных клеток в зависимости от стимула. Blood 118 , 205–215, doi: 10.1182/blood-2010-12-326447 (2011).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Амачек, С.и другие. Программы дифференцировки эндотелиальных клеток крови и лимфатических сосудов строго контролируются тканевой средой. Blood 109 , 4777–4785, doi: 10.1182/blood-2006-10-053280 (2007).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Вик, Н. и др. Транскриптомное сравнение дермальных лимфатических эндотелиальных клеток человека ex vivo и in vitro . Physiol Genomics 28 , 179–192, doi: 10.1152/physiolgenomics.00037.2006 (2007).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Ульвмар, М. Х. и др. Атипичный хемокиновый рецептор CCRL1 формирует функциональные градиенты CCL21 в лимфатических узлах. Nat Immunol 15 , 623–630, doi: 10.1038/ni.2889 (2014).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Murdaca, G. et al.Риск инфекции, связанный с агентами против TNF-альфа: обзор. Экспертное заключение о безопасности лекарственных средств 14 , 571–582, doi: 10.1517/14740338.2015.1009036 (2015).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Taylor, P.C. et al. Снижение уровня хемокинов и транспорта лейкоцитов в суставы путем блокады фактора некроза опухоли альфа у пациентов с ревматоидным артритом. Ревматоидный артрит 43 , 38–47, doi: 10.1002/1529-0131(200001)43:1<38::AID-ANR6>3.0.CO;2-L (2000).

  • Johnson, L.A. et al. Индуцированный воспалением механизм трансмиграции лейкоцитов через эндотелий лимфатических сосудов. J Exp Med 203 , 2763–2777, doi: 10.1084/jem.20051759 (2006).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сава Ю. и др. Влияние TNF-альфа на экспрессию молекул адгезии лейкоцитов в культивируемом лимфатическом эндотелии человека. J Histochem Cytochem 55 , 721–733, doi: 10.1369/jhc.6A7171.2007 (2007).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Ничке, М. и др. Дифференциальная потребность в ROCK при миграции дендритных клеток в лимфатических капиллярах в стационарном состоянии и при воспалении. Blood 120 , 2249–2258, doi: 10.1182/blood-2012-03-417923 (2012).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Пфлике, Х.& Sixt, M. Предварительно сформированные порты облегчают проникновение дендритных клеток в афферентные лимфатические сосуды. J Exp Med 206 , 2925–2935, doi: 10.1084/jem.200

    (2009).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Russo, E. et al. Внутрилимфатический CCL21 способствует выходу дендритных клеток из ткани через афферентные лимфатические сосуды. Cell Rep 14 , 1723–1734, doi: 10.1016/j.celrep.2016.01.048 (2016).

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Вудфин, А. и др. Молекула соединительной адгезии JAM-C регулирует поляризованную трансэндотелиальную миграцию нейтрофилов in vivo . Nat Immunol 12 , 761–769, doi: 10.1038/ni.2062 (2011).

    Артикул КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • ИЖМС | Бесплатный полнотекстовый | Воспалительные проявления лимфедемы

    Несколько групп пытались охарактеризовать воспалительную реакцию при лимфедеме [21,22,41,42,43,44,45,46].Недавние исследования, проведенные как минимум в трех лабораториях, продемонстрировали роль клеток CD4 + в патофизиологии [22,43,44,47]. В двух отдельных исследованиях с использованием модели операции на хвосте мыши и модели диссекции лимфатических узлов, соответственно, Avraham et al. и Zampell et al. показали, что лимфатическое повреждение приводит к смешанному воспалительному ответу, из которых более 70% составляют клетки CD4 + [22,41]. Авраам и др. также сообщили об аналогичных изменениях в образцах биопсии, взятых у пациентов с односторонней лимфедемой верхней конечности, связанной с раком молочной железы.Что еще более важно, они обнаружили, что количество проникающих в ткани клеток CD4 + имеет положительную линейную корреляцию с тяжестью заболевания. Кроме того, используя модель лимфедемы хвоста у голых мышей (у которых отсутствуют все Т-клетки) и мышей с нокаутом CD4 (у которых отсутствуют клетки CD4 + ), Avraham et al. и Zampell et al. обнаружили, что отсутствие Т-клеток в целом и клеток CD4 + в частности защищало от развития лимфедемы. У мышей с нокаутом значительно уменьшился отек, толщина подкожной ткани, инфильтрация CD45 + и фиброз, а также улучшилась лимфатическая функция.Эти авторы сообщили об аналогичных изменениях, когда клетки CD4 + были истощены с использованием нейтрализующих антител у мышей дикого типа. Этот эффект был специфичен для клеток CD4 + , поскольку истощение клеток CD8 + или CD25 + аналогичными методами не предотвращало развитие лимфедемы [41]. В недавнем исследовании другой группы, в которой также использовалась модель операции на хвосте мыши, Gousopoulos et al., сообщили, что ремоделирование лимфатических сосудов и нарушение собирательных сосудов при лимфедеме коррелируют с увеличением количества иммунных клеток, особенно Ly6G + и CD4 + клеток [47].Точно так же Ogata et al. обнаружили, что Т-клетки CD4 + взаимодействуют с макрофагами, что приводит к экспрессии фактора роста эндотелия сосудов С (VEGF-C), что затем способствует образованию незрелых лимфатических сосудов, необходимых для развития начального отека [43]. Взятые вместе, коллективные результаты этих исследований, проведенных в трех разных лабораториях, позволяют предположить, что лимфедема приводит к усилению тканевой инфильтрации клеток CD4 + в лимфедематозных тканях мышей и людей.Кроме того, нейтрализующие исследования и эксперименты с нокаутными животными предполагают, что эти клетки играют ключевую роль в патофизиологии лимфедемы.

    Лимфатические эндотелиальные клетки, эфферентные к воспаленным суставам, продуцируют iNOS и ингибируют сокращение и отток лимфатических сосудов при TNF-индуцированном артрите у мышей | Arthritis Research & Therapy

    Животные

    Все исследования на мышах проводились в соответствии с протоколами, одобренными Комитетом по ресурсам животных Университета Рочестера.Линия 3647 мышей TNF-Tg была создана доктором Джорджем Коллиасом (Институт иммунологии, Исследовательский центр биомедицинских наук Александра Флеминга, Вари, Греция) [10]. Мышей TNF-Tg разводили как гетерозигот на фоне C57BL/6, а их однопометников дикого типа (WT) использовали в качестве здоровых контролей. Эти мыши TNF-Tg имеют нормальные голеностопные суставы в возрасте 1 месяца, проявляют легкое воспаление голеностопного сустава и эрозию кости в возрасте 2–2,5 месяцев и имеют тяжелый эрозивный артрит в возрасте> 5 месяцев [35, 36].Первичные LSMC были получены от крыс Sprague-Dawley в возрасте от 1 до 2 месяцев, которые были приобретены в Шанхайском центре лабораторных животных (Шанхай, Китай). Эти исследования были проведены в соответствии с Руководящими принципами по уходу и использованию лабораторных животных в соответствии с Правилами Китайской Народной Республики для управления лабораторными животными. Лекарственные обработки in vivo проводили следующим образом. Для оценки немедленных эффектов ингибитора iNOS L-NIL (CAS 159190-45-1; Cayman Chemical, Анн-Арбор, Мичиган, США) мышей анестезировали примерно 2 % об./об. изофлюрана в кислороде и индоцианином зеленым (ICG). ) вводили им в подушечки стопы и визуализировали с помощью визуализации в ближнем инфракрасном диапазоне (БИК).Через тридцать минут во время сеанса визуализации NIR-ICG в подушечки лап вводили 0,1 мл (4 мг/кг) l-NIL или физиологического раствора. Лимфатический пульс и клиренс контролировали с помощью визуализации NIR-ICG после лечения. Эффекты длительного ингибирования NO оценивали путем добавления 100 нг/мл L-NIL или 100 нг/мл общего ингибитора NOS L-NAME (CAS 51298-62-5; Cayman Chemical) в питьевую воду, которая меняли каждый день в течение 6 недель. Феруловую кислоту (CAS 1135-24-6; Shanghai Forever Biotech Co., Ltd, Шанхай, Китай) растворяли в физиологическом растворе.Мышам ежедневно вводили через зонд раствор феруловой кислоты (20 мг/кг/день) или физиологический раствор в течение 12 недель. С помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии мы определили, что чистота феруловой кислоты составляет более 98 % (дополнительный файл 1).

    Иммуногистохимия

    Иммуногистохимию (ИГХ) проводили на замороженных срезах свежих подколенных лимфатических узлов (PLN) и тканей конечностей, содержащих лимфатические сосуды, полученных от мышей, как описано ранее [37]. Ткани замораживали в Tissue-Tek® O.Состав C.T (Sakura Finetek, Торранс, Калифорния, США). Чтобы облегчить идентификацию лимфатических сосудов между лапами и PLN, 0,5 % красителя Evans Blue вводили в подушечки лап за 5 минут до умерщвления животных и рассечения тканей. Срезы (толщиной 6 мкм) вырезали из блоков, содержащих PLN и лимфатические сосуды, с использованием системы переноса ленты CryoJane (Leica Biosystems, Wetzlar, Германия). Перед окрашиванием предметные стекла выдерживали при комнатной температуре (КТ) не менее 30 минут. Срезы фиксировали в 4 % параформальдегиде в течение 10 минут при комнатной температуре или в ацетоне/этаноле в течение 5 минут при -20 °C с последующей промывкой фосфатно-солевым буфером (PBS) три раза по 5 минут каждый.Блокирующий буфер (3 % бычий сывороточный альбумин [БСА] в PBS) наносили на 30 минут при комнатной температуре. Флуоресцентно-конъюгированные антитела, в том числе мышиные анти-LYVE-1 Alexa Fluor 488 (eBioscience, Сан-Диего, Калифорния, США), мышиные анти-iNOS/NOS типа II флуоресцеин изотиоцианат (FITC; BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США), антимышиный фикоэритрин (PE) Gr-1 (eBioscience) и хомячий антимышиный PDPN (Abcam, Кембридж, Массачусетс, США) разводили в блокирующем буфере и инкубировали срезы в течение ночи при 4 °C. После промывки 0.1 % PBS с Tween 20 три раза, срезы монтировали с реагентом против выцветания Molecular Probes ProLong Gold и 4′, 6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI; Life Technologies, Карлсбад, Калифорния, США). Изображения были получены с помощью Zeiss Axio Imager (Carl Zeiss Microscopy, Оберкохен, Германия) и проанализированы с помощью AxioVision Rel (Carl Zeiss Microscopy).

    Проточная цитометрия и очистка синовиальных лимфатических эндотелиальных клеток

    Мягкие ткани и мышцы удаляли со всей ноги и расщепляли 2 мл 1 мг/мл коллагеназы I (Worthington Biochemical, Лейквуд, Нью-Джерси, США) в течение 1 ч при 37 ° С.Расщепление завершали добавлением 8 мл 2 % фетальной телячьей сыворотки (FBS) в PBS и фильтровали через 40-мкм фильтр для клеток Falcon (Corning, Corning, NY, USA). Центрифугированные клетки дважды промывали буфером MACS (0,5% BSA, 2 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты [ЭДТА] в PBS, pH 7,2), центрифугировали и ресуспендировали с 95 мкл буфера MACS плюс 5 мкл PE-конъюгированного антитела против PDPN (каталог номер 127407, партия B164982; BioLegend, Сан-Диего, Калифорния, США) в течение 30 минут при 4 °C, а затем с 95 мкл буфера MACS плюс 5 мкл микрогранул против PE (номер по каталогу 130-048-801; Miltenyi Biotec , Оберн, Калифорния, США) еще на 30 минут при 4 °C.Клетки ресуспендировали с 0,5 мл буфера MACS и пропускали через разделительную колонку LS (каталожный номер 130-42-401; Miltenyi Biotec). После обширной промывки клетки PDPN + собирали из колонки LS путем промывки 0,5 мл буфера MACS. На одну ногу мыши получали около 20 000 клеток. Чтобы охарактеризовать клетки PDPN + как LEC, клетки окрашивали козьим антителом к ​​рецептору 3 фактора роста эндотелия сосудов мыши (каталожный номер AF743, партия DAB0231021; R&D Systems, Миннеаполис, Миннесота, США), а затем конъюгированным с Alexa Fluor 488 антикозьим иммуноглобулином G. вторичное антитело (каталожный номер A11078, партия 1613914; Life Technologies) или с биотин-конъюгированным мышиным LYVE-1 (каталожный номер 13-0443-80; eBioscience) с последующим введением стрептавидина, конъюгированного с аллофикоцианином (каталожный номер 17-4317-82, партия E07261-169; eBioscience), или PE-конъюгированное мышиное антитело к PDPN, и подвергли проточной цитометрии (12-цветный проточный цитометр BD LSR II; BD Biosciences).Данные анализировали с помощью программного обеспечения FlowJo (версия 7.6.5; FlowJo, Ashland, OR, USA).

    Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени

    РНК экстрагировали из LEC и LSMC с использованием реагента TRIzol (Life Technologies), а комплементарную ДНК получали из тотальной РНК с использованием набора GeneAmp RNA PCR Core Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA ). Количественную амплификацию в полимеразной цепной реакции (ПЦР) проводили в трех экземплярах с использованием геноспецифических праймеров и iQ SYBR Green Supermix (оба производства Bio-Rad Laboratories, Геркулес, Калифорния, США) на приборе iCycler для ПЦР в реальном времени (Bio-Rad Laboratories). .Относительную распространенность каждого гена рассчитывали путем вычитания значения порогового цикла (C t ) каждого образца для отдельного гена из соответствующего значения C t β-актина (ΔC t ). Значение ΔΔC t было получено путем вычитания ΔC t испытуемых образцов из ΔC t контрольных образцов. Затем эти значения были возведены в степень 2 (2 -ΔΔCt ), чтобы получить выражение кратности относительно эталонного уровня.Уровни экспрессии функциональных мышечных генов исследовали с использованием специфичных для последовательности праймеров, которые перечислены в дополнительном файле 2.

    Вестерн-блот-анализ

    Образцы лизата цельных клеток были фракционированы с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и перенесены на нитроцеллюлозные мембраны. (20 мкг белка/дорожка). Иммуноблотинг проводили с использованием антител к тяжелой цепи миозина гладкой мускулатуры 2 ([sMYh3] каталожный номер ab53219, лот GR162408-3; Abcam), h2-кальпонина ([h2-Cal] каталожный номер C2687, лот 052 M4849; Sigma-Aldrich, св.Louis, Миссури, США), SMα22) (каталожный номер ab14106, лот SR103317-2; Abcam), ядерный фактор κB2 ([NF-κB2] каталожный номер 8242, лот 1; Cell Signaling Technology, Дэнверс, Массачусетс, США) в 1 : разведение 1000, iNOS (каталожный номер ab3523, партия GR187485-2; Abcam) в разведении 1:800 и β-актин (каталожный номер A2228, партия 052M4816V; Sigma-Aldrich) в разведении 1:5000. Полосы визуализировали с использованием усиленной хемилюминесценции (Amersham, Little Chalfont, UK). Интенсивность сигнала полос измеряли с помощью денситометрии.

    Уровни оксида азота

    LEC высевали по 10 6 /лунку в шестилуночные планшеты в течение ночи, предварительно обрабатывали 1 мкМ аминогуанидингемисульфатной соли (Ami) и FLA (250 мкМ) в течение 3 ч, а затем 1 нг/ мл ФНО за 24 ч.Собирали супернатанты и оценивали уровни нитритов с использованием набора для анализа NO (номер по каталогу A012; Nanjing Jian Cheng Bioengineering Institute, Нанкин, Китай). Этот набор сначала преобразует нитраты в нитриты с помощью нитратредуктазы, а затем использует реактив Грисса для определения общего количества нитритов, на основе которого рассчитываются общие уровни NO. Он не обнаруживает активные формы кислорода [38].

    Выделение лимфатических клеток гладкой мускулатуры

    Мы следовали опубликованному протоколу выделения LSMC [39].Брыжеечные лимфатические сосуды у крыс в возрасте от 1 до 2 месяцев идентифицировали путем инъекции 10 мкл 0,5 % красителя синего Эванса в мезентериальные лимфатические узлы. Окрашенные в синий цвет лимфатические сосуды, которые легко отделялись от кровеносных сосудов, собирали, разрезали на мелкие кусочки и переносили в покрытую 1 % желатином пластиковую чашку для культивирования тканей. Мы использовали крыс для этих выделений, потому что невозможно изолировать LSMC от мышиных брыжеечных лимфатических сосудов из-за их гораздо меньшего размера и трудности в отделении лимфатических от кровеносных сосудов.Клетки культивировали в среде Игла, модифицированной Дульбекко с высоким содержанием глюкозы, с добавлением 20% FBS, 2 мМ пирувата натрия, 2 мМ 1-глутамина и антибиотиков. Культуральную среду меняли каждые 3 дня. Гладкомышечные клетки, покрывающие лимфатические сосуды, мигрировали из сосудов через 3–4 дня, а сегменты сосудов удаляли асептически. Через 7–10 дней клетки трипсинизировали 0,25 % трипсина в 0,02 % ЭДТА и перенесли в новую чашку, покрытую гелем (пассаж 0). Через 1–2 недели клетки достигали слияния и их разделяли на две чашки (пассаж 1).Клетки фиксировали 10 % формалином в течение 10 минут, блокировали 0,2 % Triton-100 и 1 % BSA в PBS в течение 30 минут при комнатной температуре, окрашивали антителом FITC против αSMA (1:400) при 4 °C в течение ночи и наблюдали под флуоресцентным микроскопом (Olympus IX 71; Olympus America, Center Valley, PA, USA). Лизаты цельных клеток исследовали с помощью вестерн-блоттинга с использованием антитела против sMYH в разведении 1:1000 (номер по каталогу ab53219, партия GR162408-3; Abcam) и антитела против β-актина в разведении 1:5000 (номер в каталоге A2228, партия 052M4816V; Sigma-Aldrich).

    Совместное культивирование LEC и LSMC

    Клеточная линия мышиных LEC, полученная из доброкачественных лимфангиом, индуцированных адъювантом Фрейнда [40] (клетки предоставлены доктором С. Раном из Университета Иллинойса, Спрингфилд, Иллинойс, США), была высеяна на десять покровные стекла (толщиной 15 мм ×0,25 мм) в количестве 10 6 клеток/покровное стекло в 10-сантиметровой чашке. Через 2 дня LEC обрабатывали 1 нг/мл TNF (каталожный номер 510-RT-010; R&D Systems) с селективным ингибитором iNOS или без него (1 мкМ Ami, каталожный номер M7033; Sigma-Aldrich) в течение 24 ч.Затем покровные стекла с LEC переносили в другую чашку диаметром 10 см, которая уже была покрыта 2 × 10 5 LSMC в течение 4 дней. Через 24 часа совместного культивирования покровные стекла с LEC удаляли, а LSMC собирали для анализа.

    Визуализация лимфатической системы с индоцианином зеленым в ближней инфракрасной области

    Визуализация лимфатической системы NIR-ICG выполнялась, как описано ранее [13, 37]. Вкратце, с лапок мышей удаляли шерсть с помощью крема для депиляции (Veet; Reckitt Benckiser, Слау, Великобритания). 6 мкл раствора ICG в дистиллированной воде (0.1 мг/мл) вводили внутрикожно в подушечки стопы. Как показано на рис. 3 и 4, передачу сигналов ICG измеряли с помощью изготовленной на заказ системы NIR-ICG, в которой флуоресценция ICG возбуждается светом от вольфрамово-галогенной лампы с недихроичным параболическим отражателем для усиления выходного сигнала NIR и проходит через узкий фильтр возбуждения (частично номер ICG-B; Семрок, Рочестер, Нью-Йорк, США). Как показано на рис. 5, сигнал ICG был измерен с использованием системы Fluobeam 800 (Fluoptics, Гренобль, Франция), которая состоит из электрической коробки, содержащей лазер, блок питания лазера, аналого-числовой модуль и светоизлучающий диод ( LED) источник питания и оптическую головку, содержащую камеру устройства с зарядовой связью и светодиодные лампы.Система визуализации управлялась с помощью программного обеспечения Fluobeam (V3.0; Fluoptics). БИК-флуоресценцию всей ноги регистрировали в течение 1 часа, чтобы наблюдать эфферентные собирающие лимфатические сосуды от лодыжки, включая суставы, синовиальную оболочку и окружающие мягкие ткани. Сеансы записи повторяли через 6 и 24 часа для сравнения с записями первых 5 минут после инъекции. С помощью программного обеспечения ImageJ (Национальные институты здравоохранения, Бетесда, Мэриленд, США) области интереса (ROI) были определены в подушечке стопы и собирающих лимфатических сосудах для оценки (1) процентного удаления от области интереса подушечки лапы через 1 ч или 6 ч и 24 часа. ч после инъекции ICG и (2) скорость сокращения сосудов, основанная на событиях, превышающих порог интенсивности флуоресценции ROI через 400 секунд после инъекции, как мы описали ранее [13, 37].

    Гистологический и гистоморфометрический анализы

    Голеностопные суставы фиксировали в 10 % фосфатно-буферном формалине, декальцинировали в 10 % ЭДТА на 21 день и заливали в парафин. Нарезали серию срезов толщиной 4 мкм, всего собирали десять срезов и делили на три уровня. Каждый уровень находился на расстоянии 40 мкм от предыдущего уровня. Один срез с каждого из трех уровней окрашивали Alcian Blue/Orange G или на активность устойчивой к тартрату кислой фосфатазы (TRAP) для идентификации остеокластов.Срезы всего голеностопного сустава, включая дистальную часть большеберцовой кости и проксимальные плюсневые кости, оцифровывали с использованием системы визуализации всего предметного стекла Olympus VS120-S5-E (Olympus America). Все изображения были проанализированы с использованием программного обеспечения Olympus OlyVIA (Olympus America). Мы наметили ROI, которые включали дистальный отдел большеберцовой кости, таранную кость, пяточную кость, проксимальный отдел плюсневой кости, синовиальные капсулы, связки и прилегающие мягкие ткани. Общая площадь ткани области интереса определялась автоматически с помощью программного обеспечения Olympus VS120 и варьировалась от 3.от 77 мм 2 до 4,89 мм 2 . Площадь воспаления и площадь кости выражали в процентах от общей площади ткани. Площадь клеток TRAP + и площадь хряща выражали в квадратных миллиметрах. Данные представлены в виде средних значений трех уровней.

    Статистический анализ

    Данные представлены в виде средних значений ± стандартных отклонений.

    Похожие записи

    Что такое шунтирование сердца и сосудов: актуальный взгляд на прогноз и риски

    Содержание актуальный взгляд на прогноз и рискиЧто это такоеКак проводится аортокоронарное шунтирование сосудовВиды и типы аортокоронарного шунтирования сердцаЧто необходимо знать […]

    Чистка сосудов народными средствами лимоном и чесноком: 5 рецептов народных средств из чеснока и лимона для чистки сосудов

    Содержание Чеснок, лимон, мед для чистки сосудов (классический рецепт)Эффективность лимона, чеснока и других продуктов при атеросклерозеНародные варианты для очищения сосудов […]

    Питание после шунтирования сосудов сердца меню: чем можно питаться после операции сосудов сердца, антихолестериновая диета после аорртокоронарного ШС

    Содержание первые дни в послеоперационный период, диета, правила питания, жизнь после, инвалидностьТак ли важна реабилитация после шунтирования сосудов сердцаЦели реабилитации […]

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.